TNFAIP8在小鼠肠道组织及肠道炎症中的表达及意义

目的:探讨TNFAIP8(TIPE)在小鼠正常肠道组织和结肠炎症组织中的表达及意义。方法:选择8～10周龄的C57BL/6野生型(WT)雄性小鼠3只并取其结肠组织,进行研磨破碎后用TRIzol试剂提取结肠总RNA,聚合酶链反应(PCR)和实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)检测结肠中TIPE家族成员mRNA表达情况。选择8～10周龄的WT雄性小鼠5只,分离其十二指肠、空肠、回肠和结肠的上皮细胞后,提取细胞总蛋白和总RNA,Western blot和qPCR检测十二指肠、空肠、回肠和结肠上皮细胞中TIPE蛋白及mRNA的表达。选择8～10周龄的WT雄性小鼠18只,分成6组,每组3只,用含3.0%DSS的饮用水饲养小鼠,在不同的时间点处理小鼠并提取其结肠上皮细胞,qPCR检测DSS诱导肠炎后结肠上皮细胞中TIPE的表达变化。选择8～10周龄的WT雄性小鼠9只,分成3组,每组3只,为了检测感染效率,将小鼠进食8 h后,然后用2×10⁹ CFU的Citrobacter rodentium给小鼠灌胃,在不同的时间点处理小鼠并提取其结肠上皮细胞,qPCR检测Citrobact...     

CPI-17调控血管平滑肌表型对动脉粥样硬化形成的影响

目的  研究CPI-17（PKC-potentiated protein phosphatase inhibitory protein-17）通过诱导血管平滑肌细胞表型改变影响动脉粥样硬化形成的作用。方法  载脂蛋白E基因敲除（ApoE-knockout）小鼠经颈动脉套管术诱导形成动脉粥样斑块,以野生型C57BL/6小鼠为对照,分离颈动脉并提取总RNA,采用实时荧光定量PCR技术对比检测斑块组织与对照小鼠颈动脉中CPI-17及血管平滑肌细胞收缩功能相关蛋白-平滑肌肌球蛋白重链（sm-MHC）、α-肌动蛋白（α-actin）的mRNA水平。然后分别用50mg/L氧化型低密度脂蛋白（ox-LDL）刺激及乏氧环境下培养作用于小鼠平滑肌细胞系MOVAS 细胞,实时荧光定量PCR检测两种刺激条件下CPI-17表达的变化。结果  ApoE-knock out小鼠粥样斑块平滑肌细胞的CPI-17 mRNA水平及sm-MHC、α-actin显著低于C57BL/6小鼠,ox-LDL刺激及乏氧培养的MOVAS细胞的CPI-17表达水平显著降低（P均<0.05）。结论  ox-LDL刺激及乏氧培养使MOVAS 细胞的CPI-17表达水平降低,可能通过调控血管平滑肌细胞的收缩特性参与动脉粥样硬化的发生。     

慢性阻塞性肺疾病患者外周血单个核细胞中S100A10表达及意义

目的 探讨S100A10在慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者外周血单个核细胞(PBMC)中的表达变化及意义。方法 选择2020年8月至2021年6月新乡医学院附属人民医院收治的42例COPD患者(COPD组)和同期体检健康的31例志愿者(健康对照组)为研究对象,比较2组受试者第1秒用力呼气容积(FEV₁)占预计值的百分比(FEV₁%pred)和FEV₁占用力肺活量(FVC)的百分比(FEV₁/FVC);应用实时荧光定量聚合酶链反应法检测2组受试者PBMC中S100A10 mRNA相对表达量,Western blot法检测2组受试者PBMC中S100A10蛋白相对表达量,流式细胞术检测2组受试者PBMC各细胞亚群中S100A10蛋白相对表达量,分析COPD患者PBMC中S100A10 mRNA表达水平与FEV₁%pred的相关性。结果 COPD组患者的FEV₁%pred、FEV₁/FVC显著低于健康对照组(P<0.05)。COPD组...     

肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2在T细胞发育过程中的表达及其对哮喘发病的潜在作用

目的 探讨肿瘤坏死因子α诱导蛋白8样分子2(TIPE2)在T细胞发育过程中的表达及作用,分析其在哮喘发病中的潜在作用。方法 选择C57BL/6J雌性野生型(WT)小鼠、C57BL/6J雄性TIPE2基因敲除(Tipe2^-/-)小鼠、C57BL/6J雄性绿色荧光蛋白敲入(Tipe2^gfp/+)小鼠为研究对象。取WT和Tipe2^gfp/+小鼠结肠组织和胸腺组织,获取肠道固有层淋巴细胞(LPLs)和胸腺细胞,采用流式细胞术检测结肠组织CD45^-细胞、CD45⁺细胞及双阴性(DN)T细胞、双阳性(DP)T细胞、CD4⁺T细胞和CD8⁺ T细胞中TIPE2的表达。取WT和Tipe2^-/-小鼠外周血、脾脏和肠系膜淋巴结,采用流式细胞术检测外周血、脾脏和肠系膜淋巴结中CD4⁺和CD8⁺T细胞水平。将10只Tipe2^gfp/+小鼠随机分为对照组和哮喘组,每组5只。...