2''-5''寡腺苷酸合成酶1基因多态性与乙型肝炎病毒易感性和抗病毒疗效的相关性

人体感染HBV后,可自身清除病毒或持续性感染,在成人感染者中有5%～10%不能清除病毒,导致慢性病毒携带状态。其造成肝损伤的程度不一,发展为肝硬化或肝癌进程不一、药物治疗的反应个体差异亦很大,宿主的遗传因素对乙型肝炎的这些临床转归起了关键作用。目前干扰素诱导抗病毒基因2′-5′寡腺苷酸合成酶1（OAS1）与HBV易感性和抗病毒疗效的相关性研究鲜见报道，[第一段]     

特发性血小板减少性紫癜患者血小板表面相关IgG与体液免疫指标测定结果的关系

44例特发性血小板减少性紫癜(ITP)患者中,有41例(93%)血小板表面相关免疫球白蛋 G(PAIgG)明显高于正常(30.93±18.52ng/10~7PL),其均值为239.57±108.91ng/10~7PL。PAIgG 与血小板计数密切相关,但两者与其他体液免疫指标(如 Ig、CIC、抗核因子、C_3和CH_(50)等)均不存在相关关系。PAIgG 有一定特异性,对 ITP 的诊断和预后较其他免疫指标更有意义.     

PCR-荧光探针法检测乙型肝炎病毒YMDD变异与DNA序列分析法的比较

目的评估聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法用于乙型肝炎病毒基因聚合酶区YMDD变异检测的敏感性、特异性和准确性。方法采用PCR-荧光探针法和DNA序列分析法,平行比对检测202份标本中HBVYMDD变异情况。结果以DNA序列检测分析为相对标准,PCR-荧光探针法检测YMDD变异的相对灵敏度为99.06%,相对特异性为97.92%,YMDD变异位点检测的准确性为98.51%。PCR-荧光探针法检测YMDD位点混合变异株稍优于序列分析法。结论 PCR-荧光探针法与DNA序列分析法检测HBV YMDD变异具有较好的一致性,说明对单个位点变异的检测该方法临床应用性能较好。     

乙型肝炎病毒基因s区准种特点与临床转归关系的初步研究

目的 初步探讨hbv基因s区的准种特点与乙型肝炎病毒(hbv)感染临床转归的关系.方法 选择慢性hbv携带者、慢性乙型肝炎患者、慢性重型肝炎患者各3例,所有患者均为男性,且hbv基因型均为c型.扩增患者血清中hbv基因s区片段并克隆,每份样本挑选20个克隆进行测序,并用spss 15.0软件进行统计分析.结果 慢性hbv携带者以及慢性乙型肝炎患者的hbv基因s区准种复杂度小于慢性重型乙型肝炎患者,但差异无统计学意义(t=1.7,p=0.26).对于hbv s区t细胞表位的第45、47和85位氨基酸,慢性乙型肝炎患者的准种构成情况比hbv携带者复杂(p=0.01),与慢性重型乙型肝炎的差别无统计学意义(p=0.06),计算机模拟分析提示优势克隆和非优势克隆的t细胞表位均能与ctl受体有效结合.结论 hbv基因s区部分t细胞表位的准种构成差异可能与hbv慢性感染的临床转归相关. abstract： objective to investigate the association of hepatitis b virus(hbv) s gene quasispecies with the outcome of hbv infection.methods serum samples were collected from three chronic hbv carriers, three chronic hepatitis b and three chronic severe hepatitis b patients.all subjects were male and with hbv genotype c.hbv s gene was amplified, and 20 clones of hbv fragment were randomly selected and sequenced from each sample.spss 15.0 software was adopted for analysis.results quasispecies complexity of hbv s gene in chronic hbv carriers and chronic hepatitis b tended lower than that of the severe chronic hepatitis b, but the difference was not of statistical significance (p＞0.05).in t cell epitope 45, 47, 85 amino acid sites of the hbv s gene, the constitution of quasispecies in the chronic hepatitis b was more complex than that of the hbv carriers (p=0.01), but compared with the severe chronic hepatitis, the difference was not significant (p=0.06).the computer model showed that both the dominant clones and the non dominant clones could effectively bind to the receptors of cytotoxic t lymphocytes.conclusion quasispecies in some t cell epitopes of hbv s gene may be related with the clinical outcome of hepatitis b.     

PCR-荧光探针法检测乙型肝炎病毒YMDD变异与DNA序列分析法的比较

目的 评估聚合酶链反应(PCR)-荧光探针法用于乙型肝炎病毒基因聚合酶区YMDD变异检测的敏感性、特异性和准确性.方法 采用PCR-荧光探针法和DNA序列分析法,平行比对检测202份标本中HBV YMDD变异情况.结果 以DNA序列检测分析为相对标准,PCR-荧光探针法检测YMDD变异的相对灵敏度为99.06%,相对特...     

恩替卡韦初治耐药的乙型肝炎病毒体外表型分析

目的:探讨恩替卡韦初治患者发生病毒学突破的可能病毒学原因。方法:扩增1例恩替卡韦初治发生病毒学突破的患者在治疗基线和发生病毒学突破时的乙型肝炎病毒(HBV)全长基因组,构建全长基因组克隆并测序,筛选代表性基因组构建1.3倍复制型质粒,转染Huh7细胞后以Southern blot方法观察病毒复制能力,并分别以单克隆病毒和病毒准种群的形式进行恩替卡韦体外药敏试验,Southern blot检测基线及病毒学突破时单个病毒株及准种群的体外药敏情况。结果:在治疗基线和病毒学突破时间点的22个和25个全长克隆中分别筛选出7个和8个代表性克隆,体外药敏结果显示该患者血清中无论是基线还是病毒突破后的病毒株,无论单克隆病毒株还是本研究所构建的病毒准种群在体外情况下均对恩替卡韦敏感。结论:在本例恩替卡韦初治患者未发现与病毒学突破相关的病毒因素,其耐药机制值得进一步研究。     

药物临床试验中护理人员的作用

目的 提高护理人员在药物临床试验中的作用,保证试验的真实性、科学性和安全性。方法 回顾5年来参加药物临床试验的工作方法,讨论护士的作用。结果 药物临床试验取得了真实、有效的结果。结论 护士严谨的工作作风、科学规范的研究方法,对受试者无微不至的关怀,将保证临床试验的正常开展。     

微粒子酶免疫分析法检测HBsAg

ＡＸＳＹＭ／ＭＥＩＡ是美国Ａｂｂｏｔ公司在ＥＬＩＳＡ的基础上发展起来的测定ＨＢＶ标志的方法。其原理是在包被有抗体的微粒子与标本中的被检物质结合，然后置微粒于玻璃纤维柱上、洗去不被反应的成分，加入碱性磷酸酶标记抗体使之与微粒上的被检成份再反应形成Ａｂ－...     

乙型肝炎病毒C型重组杆状病毒的构建及鉴定

目的构建乙型肝炎病毒（HBV）中国株及其拉米夫定耐药相关变异株的重组杆状病毒.方法将1.2倍HBV基因组（血清adr型、基因C型）连接至杆状病毒的转移载体pFastBacI上,然后转化入DH10Bac菌株中,在细菌内的辅助质粒辅助作用下与杆状病毒基因组Bacmid发生位点特异性转座,形成含有HBV基因组的重组Bacmid,转染昆虫sf9细胞后,包装产生HBV重组杆状病毒vAcHBVc.采用连续聚合酶链反应（PCR）引入方法进行定点突变,构建YVDD变异株质粒,并按照上述方法构建HBV YVDD变异株重组杆状病毒vAcHBVYVDD,扩增并滴定.为便于观察重组杆状病毒的转染和扩增效率及病毒滴度测定,同时构建了含绿色荧光蛋白（GFP）的HBV重组杆状病毒vAcGFPHBVc.结果 HBV野毒株和变异株重组杆状病毒均构建成功,通过免疫空斑及TCID50定量测定病毒滴度为106～108pfu/ml左右.结论应用Bac to Bac杆状病毒表达系统可有效快速地构建HBV C型重组杆状病毒,以用于HBV体外复制系统的建立,为HBV野毒株及变异株生物学特性的研究及抗病毒药物的筛选提供技术平台.     

乙型肝炎患者血清中HBV的前S_1和前S_2蛋白的检测及其意义

乙肝病毒的外壳是由S、前S_1、前S_2蛋白所组成。我们用抗前S_1和抗前S_2单克隆抗体检测106例病毒性肝炎的前S_1蛋白和前S_2蛋白,结果表明急性乙肝早期的前S_1、前S_2蛋白(n=16,75％和87,5％)明显高于急性乙肝恢复期(n=33,21.2％、12.1％);慢活肝的前S_2蛋白(n=15,93.7％)明显高于慢迁肝(n=18,55.6％),前S_2蛋白与HBsAg、eAg和HBV-DNA呈正相关(P<0.05,<0.05<0.001),支持前S_2蛋白的出现和HBV复制有关。