不同交联方法处理的牛颈静脉移植后免疫学的研究

目的 探讨不同交联方法处理的带瓣牛颈静脉(BJVV)移植后免疫学变化。方法 采用重建犬右心室-肺动脉连接动物模型方法植入多聚环氧化合物(PC)、戊二醛(GA)、光氧化(DMP)交联处理的BJVC，用免疫学及组织学方法，研究其免疫反应。结果 经PC、GA交联的BJVC引发宿主产生特异性抗体，在体外刺激淋巴细胞增殖；DMP交联的BJVC植入后引发的宿主抗体和体外刺激淋巴细胞增殖水平均较低。结论 经PC、GA交联处理的BJVC带瓣管道仍具有一定的免疫原性，移植后仍存在细胞免疫和体液免疫，用DMP交联处理的BJVC带瓣管道具有不引起明显的免疫反应的特点，是一种较好的交联处理方法。     

去细胞处理对牛颈静脉带瓣管道细胞外基质骨架的影响

目的:探讨去细胞处理对牛颈静脉带瓣管道细胞外基质骨架成分及组织稳定性的影响,为确立构建组织工程化的人工血管技术提供依据.方法:采集新鲜牛颈静脉,筛选瓣膜功能良好的血管,采用曲那通X-100、胰蛋白酶/EDTA和DNase-I/RNase-A三步法去细胞处理,组织化学染色和透射电镜观察细胞外基质骨架成分(胶原和弹力蛋白)的变化.对新鲜和去细胞处理的牛颈静脉血管壁(n=10)分别进行弹力蛋白(Fastin弹性蛋白法)和羟脯氨酸(碱水解、分光光度法)含量测定;并测定处理前后的热皱缩温度和抗张强度以比较组织稳定性.结果:去细胞处理牛颈静脉血管壁光镜和透射电镜检测提示细胞及其成分完全去除,组织间隙增宽,但胶原成分较好保留,弹力蛋白部分减少及断裂.与新鲜组织比较,去细胞组羟脯氨酸含量相对增加[(25.73±2.97)mg/g vs.(29.25±2.99)mg/g,P＜0.05],弹力蛋白含量相对减少[(159.71±21.06)ng/g vs.(134.91±35.40)mg/g,P＜0.05],热皱缩温度降低[(72.50±0.53)℃ vs.(69.75±0.54)℃,P＜0.05],抗张强度也下降明显[(5.19±0.65)MPa vs.(3.13±0.94)MPa,P＜0.05].结论:去细胞处理对牛颈静脉细胞外基质骨架有一定损害,牛颈静脉的组织稳定性有所下降,得到的细胞外基质基本成分需经进一步交联处理才可以作为组织工程支架材料.     

辛醇/乙醇混合液处理的牛颈静脉的遗传毒理学评价

【目的】对辛醇／乙醇混合液处理的牛颈静脉的遗传毒性进行评价。【方法】采用微核试验、染色体畸变试验及AMES试验进行遗传毒性评价。【结果】试验组股骨骨髓细胞微核率及染色体畸变率与阴性对照组之间X^2检验差异无显著性（P〉0．05）;与阳性对照环磷酰胺组差异有显著性（P〈0．05）;AMES试验中试验组菌落数均未超过阴性对照组菌落数的2倍．试验结果为阴性。【结论】辛醇／乙醇混合液处理的牛颈静脉无明显遗传毒性作用。     

再次停跳温血灌注处理在心脏直视手术复苏困难中的应用

目的总结45例患者心脏复苏困难的成功处理经验,寻求心脏直视术中心脏复苏困难的有效治疗方法。方法对经多次除颤不能复苏的心脏手术患者,采用重新阻断升主动脉,行4∶1半钾或全钾温血停搏液诱停加纯温血持续灌注,待心脏完全静止后再开放升主动脉的方法。结果 45例心脏手术患者心脏复苏困难经过再次停跳温血灌注的处理后均复苏成功。结论再次阻断升主动脉,行4∶1半钾或全钾温血停搏液诱停加纯温血持续灌注的处理,对于复苏困难的心脏具有较好的临床效果。     

搏动信号对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合成酶表达的影响

目的：观察搏动信号对人脐静脉内皮细胞中反映内皮细胞活性的内皮型一氧化氮合酶mRNA表达的影响。 方法：实验于2004-06／2005-03在湘雅二医院心胸外科生物材料研究室和上海生物工程有限公司进行。将取自剖宫产产妇自愿捐献的无菌脐带的人脐静脉内皮细胞培养、传代，传4代后分为两组：①搏动培养组：先静放6-8h待细胞贴壁后，用自行设计的细胞搏动培养装置，进行搏动培养。搏动参数：搏动频率150次／min，搏出量0．3mL／次，搏动产生的压力30／9mmHg（1mmHg=0．133kPa）。②静态培养组：不进行搏动，其余条件同搏动培养组。每组每个时间点5个样本。用反转录-聚合酶链反应方法，分别在第1，2，4，6，9，12，15，18天检测两组的人脐静脉内皮细胞的内皮型一氧化氮合酶mRNA的表达水平（相对吸光度值）。 结果：人脐静脉内皮细胞的内皮型一氧化氮合酶mRNA表达：①培养第1，4天，静态培养组明显高于搏动培养组（1．0&;#177;0．55比1．10&;#177;0．35；1．17&;#177;0．23比1．42&;#177;0．44，P〈0．05）。②培养第2天两组比较差异不显著（1．16&;#177;0．18比1．25&;#177;0．35，P〉0．05）。③培养第6，9，12，15，18天，搏动培养组明显高于静态培养组（1．52&;#177;0.14比1．27&;#177;0.30；1．60&;#177;0.19比1．16&;#177;0.33；1．68&;#177;0.44比0．99&;#177;0.31；1．7&;#177;0.24比1．1&;#177;0.94；1．7&;#177;0.16比1．0&;#177;0.28，P〈0．05）。 结论：搏动信号能提高人脐静脉内皮细胞的内皮型一氧化氮合酶的表达。提示搏动信号在维持细胞发挥正常的生理功能方面起到重要的作用，能增强细胞的生物活性。     

心脏直视手术后心脏骤停患者的抢救及护理

对18例心脏直视手术后心脏骤停的患者,立即予心肺复苏术,同时积极查明心脏骤停的原因,及时给予有效的抢救措施.结果经抢救复苏成功12例,无神经系统并发症 ;6例放弃治疗或死亡.提示快速判断心脏骤停的原因,采取重要脏器的保护等护理措施是提高复苏成功率的重要环节.     

零平衡超滤和改良超滤在低身体质量婴幼儿心脏手术中的联合应用

目的观察零平衡超滤(zero-balanced ultrafiltration,ZBUF)、改良超滤(modified ultrafiltration,MUF)技术联合应用和改良超滤单独应用于低身体质量(小于8 kg)婴幼儿体外循环(cardiopulmonary bypass,CPB)心脏手术的临床效果,总结两种方法联合应用的经验。方法 64例患先天性心脏病的低身体质量婴幼儿接受体外循环下心内直视手术,随机分为零平衡超滤+改良超滤(Z+M)组和改良超滤(MUF)组。观察两组患儿术中转流前、超滤前后的平均动脉压(MAP)、血气分析、血钾、红细胞压积(HCT)、血浆胶体渗透压(COP)的变化,以及术后的血管活性药物应用时间和呼吸机辅助时间。结果所有患者顺利停机,无任何超滤相关并发症,两组患儿的血气分析、血钾在超滤前后的差异无统计学意义;两组患儿的MAP、HCT和COP在超滤结束时明显升高,与超滤前比较差异有统计学意义(P<0.05),但两组之间比较差异无统计学意义(P>0.05);Z+M组的术后呼吸机辅助时间和血管活性药物应用时间均小于MUF组(P<0.05)。结论在低身体质量婴幼儿体外循环心脏手术中联合采用零平衡超滤和改良超滤可能在短时间内有效滤除体内多余水分,改善血液动力学,比改良超滤更有利于术后心肺功能的恢复。     

牛颈静脉经不同方法交联改性后的免疫原性

目的:研究牛颈静脉带瓣管道经不同方法交联后免疫原性的变化。方法：将牛颈静脉随机分为4组(n=10)：多聚环氧化合物(PC)交联组、染料介导光氧化(DMP)交联组、戊二醛(GA)交联组及新鲜牛颈静脉对照组。制备牛颈静脉匀浆，与完全福氏佐剂混合制成复合乳剂抗原，免疫新西兰大白兔。采用双向免疫扩散法测定兔血清抗体滴度。取新鲜牛颈静脉免疫的兔血清,采用免疫印迹法(Western blotting )体外检测交联后的牛颈静脉组织匀浆的抗原组分。结果：免疫印迹显示新鲜牛颈静脉组织有特异性重复出现的阳性条带，经PC，DMP交联处理的牛颈静脉均未出现明显阳性条带，经GA交联处理的牛颈静脉中1例出现阳性条带，但无特异性重复出现的条带 ，各交联处理组间免疫原性无明显差异。 结论： PC，DMP及GA交联处理的牛颈静脉可有效地灭活其免疫原性,适合临床应用要求。     

老年患者心脏手术的体外循环管理

目的总结分析老年患者心脏手术的体外循环管理经验。方法回顾性分析我院73例65岁以上老年患者实施体外循环心脏直视手术的临床资料,全部患者体外循环过程中采用中度血液稀释、浅低温、高流量灌注,低温氧合血进行心肌保护,常规应用超滤。结果体外循环时间31~209 min(平均78.4 min),阻断升主动脉时间21~103 min(平均45.7 min),心脏自动复跳57例(78%),术后1例患者死于低心排综合征。结论选择优质膜肺、适度稀释血液、采用高灌注流量、加强心肌保护、仔细做好术中监测、合理应用超滤,可为老年患者心脏手术成功提供重要保障。