川芎嗪对CCl4诱导的肝纤维化大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响

目的：观察川芎嗪对四氯化碳诱导的肝纤维化大鼠肝组织Nrf2/ARE信号通路的影响,探讨川芎嗪治疗肝纤维化的作用机制。方法四氯化碳皮下注射制备大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组、肝纤维化模型组和川芎嗪治疗组,川芎嗪治疗组在造模过程中每天给予盐酸川芎嗪注射液腹腔注射,6周后,乙醚麻醉,腹主动脉采血,产色基质偶氮法鲎试剂定量测定血浆内毒素;肝组织常规HE染色观察肝脏病变,天狼猩红胶原染色、肝组织羟脯氨酸含量测定评测肝纤维化程度;West-blotting法检测肝组织内Nrf2蛋白的表达, TBA法检测肝组织丙二醛（MDA）水平,酶显色定量分析法检测肝组织谷胱甘肽-S-转移酶（GST）含量。结果川芎嗪治疗组与肝纤维化模型组相比,肝损伤较轻,肝纤维化程度明显降低,血浆内毒素含量降低, Nrf2蛋白表达量增多,肝组织中MDA含量降低, GST的含量升高。结论川芎嗪的抗肝纤维化作用可能与其降低内毒素血症,激活肝内Nrf2/ARE抗氧化通路进而使得抗氧化酶GST等含量增加有关。     

奥利司他对大鼠非酒精性脂肪肝的保护作用及机制研究

目的:分析奥利司他对大鼠非酒精性脂肪肝的保护作用及机制.方法:选取30只SD雄性大鼠,随机分为对照组(喂食普通饲料)、模型组(喂食高脂饲料)和奥利司他组(在模型组饲养基础上灌胃60 mg·(kg·d)-1奥利司他),各10只.连续测定各组摄食期间每日摄食量,并在八周后测量增长的体质量、肝脏质量、观察肝脏组织病理变化、并测定甘油三酯(Triglyceride,TG)、谷丙转氨酶(Alanine aminotransferase,ALT)、谷氨酰转移酶(γ-Glutamyltransferase,GGT)、天门冬氨酸氨基转移酶(Aspartate aminotransferase,AST)及空腹血糖(Fiber brag grating,FBG)、空腹胰岛素(Fasting serum lisulin,FINS)、胰岛素敏感指数(ISI)、肝组织磷脂酰肌醇-3激酶(Phosphatidylinositol 3-kinase,PI3K)、蛋白激酶B(Protein kinase B,AKT)蛋白水平.结果:摄食期间三组摄食量、体质量无差异(P>0.05),模型组、奥利司他组肝脏质量高于对照组(P<0.05);奥利司他组肝细胞脂滴较模型组缩小且减少,染色变浅,但仍较对照组深;模型组TG、ALT、GGT、AST高于对照组,奥利司他组TG、ALT、GGT、AST低于模型组(P<0.05);模型组FBG、FINS高于对照组,ISI低于对照组,奥利司他组FBG、FINS低于模型组,ISI高于模型组(P<0.05);模型组肝组织PI3K、AKT蛋白表达水平低于对照组,奥利司他组PI3K、AKT蛋白水平高于模型组(P<0.05).结论:奥利司他可能通过PI3K/AKT信号通路对NAFLD模型大鼠发挥保护作用,改善其肝脏脂质含量、肝功能酶学指标、血糖水平.     

马齿苋总黄酮改善小鼠非酒精性脂肪肝的作用

为探讨马齿苋总黄酮(portulaca oleracea total flavones,POTF)对昆明小鼠的非酒精性脂肪肝(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)脂质代谢异常、氧化应激及炎症反应的影响,将小鼠随机分为5组:对照组、NAFLD组、POTF 2.5 mg/kg组、...     

内毒素对原代大鼠肝星状细胞表达结缔组织生长因子影响机制的研究

目的研究内毒素（LPS）与其刺激的Kupffer细胞（KCs）培养上清（KCCM）及NF—κB通路抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐（PDTC）对大鼠原代肝星状细胞（HSCs）表达结缔组织生长因子（CTGF）的影响,探讨LPS刺激HSCs表达CTGF的机制。方法分离培养原代大鼠HSCs、KCs。培养72h的KCs经1mg／LLPS刺激48h后收集上清标记为KCCM1。未经LPS刺激的上清标记为KCCM0。将培养72h的HSCs随机分为空白对照组、KC—CM0组、LPS组、KCCM1组、PDTC组、（PDTC＋LPS）组、（PDTC＋KCCM1）组。各组HSCs经相应的处理48h后,Westernblot检测各组HSCs表达CTGF水平,ELISA检测培养上清中I型胶原含量。结果各组HSCs中CTGF蛋白表达水平为：空白对照组（1．95-±0．67）、KCCM0组（2．15±1．10）、LPS组（4．56±4．16）、KCCM1组（5．21±3．23）、PDTC组（0．06±0．02）、（PDTC＋LPS）组（0．10±0．08）、（PDTC＋KCCM1）组（2．77±4．08）。LPS与KCCM1作用于HSCs后CTGF表达增加（P〈0．05）;PDTC几乎可以完全阻断正常及LPS刺激的HSCs表达CTGF（P〈0．01）,但只能降低KCCM1组CTGF的表达（P〈0．05）：KCCM1组HSCs上清中I型胶原的含量增加（P〈0．05）。结论LPS可直接通过HSCs内的NF—κB通路使其表达CTGF水平上调,LPS刺激的KCs还可能通过其他途经使HSCs表达CTGF水平上调。     

棓丙酯对大鼠肝纤维化防治作用的实验研究

目的观察棓丙酯对四氯化碳导致的肝纤维化大鼠的保护作用,为临床治疗肝纤维化提供实验依据。方法以四氯化碳皮下注射复制大鼠肝纤维化模型,设立正常对照组、肝纤维化模型组和棓丙酯组,棓丙酯组在造模的同时给予棓丙酯注射液皮下注射。6周后取肝组织常规HE染色观察肝脏病变,天狼猩红胶原染色、肝组织羟脯氨酸(HYP)含量测定观察肝纤维化程度;赖氏法测定血浆丙氨酸氨基转移酶(ALT);TBA法检测肝组织丙二醛(MDA)水平,产色基质偶氮法鲎试剂定量测定血浆内毒素。结果棓丙酯与肝纤维化模型组比较,①肝脏的损伤性改变较轻,肝组织HYP及肝纤维化指数(FI)明显降低。②血浆内毒素含量、ALT及肝组织MDA均有不同程度的降低。结论棓丙酯具有一定的抗肝纤维化的作用。     

马齿苋对非酒精性脂肪肝小鼠的肝脏保护作用及对脂代谢的影响

目的:分析马齿苋对非酒精性脂肪肝(Non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD)小鼠的肝脏保护作用及对脂代谢的影响.方法:选取健康雄性小鼠50只,按照体重随机分为对照组、模型组、马齿苋药物低、中、高剂量组五组,各10只,模型组及各剂量组以高脂饲料喂养16周造模;建模成功后,低、中、高剂量组分别给予马齿苋提取液0.18 g·kg-1、0.35 g·kg-1、0.70 g·kg-1灌胃,对照组及模型组给予等体积0.9％生理盐水灌胃,连续灌胃4周.采用全自动血液分析仪检测小鼠血清肝功能及脂代谢指标;取全肝,称肝湿重,制备病理切片,计算NAFLD活动度积分;利用荧光定量聚合链式反应检测肝组织Keap1-核因子E2相关因子2(Keap1-nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2)表达,采用酶联免疫分析法测定肝组织匀浆超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)水平.结果:造模成功.较模型组,各剂量组小鼠肝湿重、NAFLD活动度及血清ALT、AST、TC、TG、LDL-C、肝组织匀浆MDA水平均降低,其中高剂量组更为明显(P<0.05);较模型组,各剂量组小鼠肝组织Nrf2 mRNA相对表达量及肝组织匀浆SOD水平均升高,其中高剂量组更为明显(P<0.05).结论:马齿苋可能通过发挥抗氧化、降脂作用,使NAFLD小鼠肝损伤减轻,延缓NAFLD进展.     

内毒素对大鼠原代肝星状细胞ERK1/2信号转导通路的影响

目的研究内毒素对大鼠原代肝星状细胞(hepatic stellate cells,HSCs)增殖活化过程中ERK1/2信号转导通路的影响及机制。方法用链霉蛋白酶、Ⅳ型胶原酶以及密度梯度离心法分离培养大鼠原代HSCs,随机分为对照组、内毒素组和PDTC(Pyrrolidinedithiocarbamic acid,NF-κB抑制剂)组。在培养至第5d时,内毒素组和PDTC组加入终浓度为lμg/ml的内毒素刺激细胞,PDTC组同时加入终浓度为15μmol/L的PDTC,30min后收集各孔HSCs,提取细胞总蛋白,Western Blot检测P-ERK1/2水平。结果内毒素刺激原代培养HSCs后,与对照组相比P-ERK1/2水平明显上升(P<0.01),NF-κB抑制剂PDTC能显著降低该变化。结论内毒素可直接刺激大鼠原代HSCs引起胞内ERK1/2信号传导通路活化,NF-κB信号通路可能是内毒素刺激的原代HSCs所导致ERK1/2信号转导通路活化的重要途径之一。