对有效的抗肿瘤单抗药物的探索

文章综述了单抗药物用于临床肿瘤治疗的研究进展。开发一个成功的抗肿瘤单抗药物应从以下几方面考虑：(1)选择特异的肿瘤抗原；(2)制备人源化单抗以降低单抗药物的免疫原性；(3)利用抗体工程改造抗体结构以延长半衰期；(4)改进给药方式以提高抗体药物在肿瘤组织的局部浓度；(5)提高单抗药物的抗肿瘤活性；(6)进一步提高单抗药物的选择性。还简述了单抗药物抗肿瘤的可能机制及单抗药物的前景展望。     

人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)与绿色荧光蛋白(GFP)在转基因烟草中的融合表达

构建人组织型纤溶酶原激活剂(t-PA)与绿色荧光蛋白(GFP)融合表达的植物表达载体pCA1302NSF-tPA。将重组载体转入根瘤农杆菌GV3101中，通过叶圆盘法转化烟草。转化植株经PCR鉴定整合有t-PA基因，通过荧光显微镜可检测到绿色荧光蛋白(GFP)的表达。     

人内皮抑素部分序列——Es-2的生物活性研究

目的：检测人工合成多肽Es-2抑制血管生成活性及其对肿瘤生长的影响。方法：采用MTT法和鸡胚给药实验，观察Es-2对肿瘤细胞和鸡胚尿囊绒膜（CAM）上血管生成的抑制情况。建立C57BL／6黑色素瘤（B16F10）小鼠模型，以不同剂量皮下注射给药，测量各组小鼠皮下移植肿瘤体积变化和抑瘤率。结果：Es-2对肿瘤细胞无抑制现象；在CAM实验中，新生血管生长受到明显的抑制。C57BL／6小鼠给药10d后治疗组与对照组相比，Es-220mg／kg组对小鼠黑色素瘤生长有一定抑制作用，其效果相当于10mg／kg内皮抑素的治疗效果（P〈0．05）。结论：Es-2具有开发成抗肿瘤药物的前景。     

人肽脱甲酰基酶基因pdf与肿瘤细胞生长的相关性

目的：研究人肽脱甲酰基酶（HsPDF）基因pdf在不同肿瘤细胞系中的表达情况并探讨该基因与肿瘤细胞生长的相关性。方法：体外培养肿瘤细胞，采用半定量RT-PCR方法检测不同肿瘤细胞系中pdf mRNA的水平；用HsPDF抑制剂Actinonin处理细胞并通过细胞形态学、MTT法、RT-PCR及凝胶电泳等技术检测pdf基因与肿瘤细胞生长的相关性。结果：RT-PCR结果表明，该基因在13种不同来源的人肿瘤细胞系和正常组织中的表达具有显著差异。其中，在Hela、MDA-MB-231、K562等肿瘤细胞系中高表达，而在人正常肺组织中低表达（P〈0．001）。体外试验显示，Actinonin可显著地抑制肿瘤细胞的生长．使细胞中pdf基因表达量相应的下降，且呈明显的浓度依赖性；同时，光镜观察结果显示Actinonin对肿瘤细胞有诱导凋亡的作用。结论：pdf是一种广泛分布于不同组织的基因，它与肿瘤细胞的生长增殖间存在着显著的相关性。     

乌索酸通过抑制miR-21表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡的机制

探讨乌索酸通过调控miR-21表达从而诱导肝癌HepG2细胞凋亡的作用机制。采用MTT方法检测乌索酸对肝癌细胞增殖的抑制作用;qPCR检测肝癌细胞中miR-21的表达水平及乌索酸对HepG2细胞中miR-21表达的调控作用;转染miR-21 mimics进HepG2细胞中上调miR-21的表达后,MTT、流式细胞检测法、RT-PCR方法分别分析miR-21在乌索酸对细胞的增殖、凋亡以及对凋亡相关基因的调控过程中的作用。结果显示,与肝正常细胞L-02以及肝癌SMCC-7721、Bel-7402细胞相比较,乌索酸对肝癌HepG2细胞的增殖抑制效果最强,且HepG2细胞中miR-21的表达水平最高。乌索酸可下调HepG2细胞中miR-21的表达,且在24 h的下调作用最强。miR-21的表达上调可以部分抵消乌索酸对HepG2细胞的抑制增殖及促进凋亡,部分抵消下调凋亡抑制基因Bcl-2、survivin表达和上调促凋亡基因Bax表达的作用。结果提示,乌索酸通过抑制miR-21的表达诱导肝癌HepG2细胞凋亡。     

4-(苯并咪(噻)唑-2-)苯甲脒类化合物的合成及其一氧化氮合酶抑制活性

目的:寻找抑制一氧化氮合酶(NOS)并对相关疾病具有较好治疗作用的化合物.方法:以苯甲脒为基本母核,在苯环的对位引入2-苯并咪(噻)唑基,然后在脒基N上引入环状或非环状的取代基,并测定目标化合物的诱生型NOS(iNOS)抑制活性.结果和结论:合成了4-(苯并咪(噻)唑-2-)苯甲脒类化合物12个,其结构经IR、1HNMR、MS和元素分析确证.初步的药理试验表明目标化合物具有不同程度的iNOS抑制活性,神经型NOS(nNOS)抑制活性研究正在进行中.     

银杏叶提取物对糖尿病的药效学研究

观察了银杏叶提取物（ＥＧｂ）对糖尿病大鼠的治疗作用。结果表明ＥＧｂ能降低正常大鼠血糖,但无明显的量效关系;使四氧嘧啶糖尿病大鼠血糖下降,血清胰岛素升高。对糖尿病大鼠的血脂代谢有显著的改善作用,使ＨＣＬ升高而ＴＧ、ＴＣ、ＬＤＬ值显著降低（Ｐ〈０．０１）。ＥＧｂ也能显著降低血清和组织中的脂质过氧化产物丙二醛（ＭＤＡ）含量（Ｐ〈０．０１）。因此ＥＧｂ对糖尿病有一定的治疗作用,其作用可能与ＥＧｂ促进胰岛β     

海洋放线菌N331生物碱活性组分的研究

目的 对海洋放线菌N331发酵液中的抗菌活性成分进行研究.方法 采用大孔树脂吸附、硅胶柱层析分离纯化抗菌活性成分,并对其理化性质和生物活性进行初步研究.结果 从海洋放线菌N331的发酵液中分离到一种结晶状活性组分,鉴定为生物碱类物质,由几种极性相近的化合物组成;其对金黄色葡萄球菌敏感茼及其耐药菌的最小押菌浓度均为4μg·mL-1,对口腔上皮癌KB细胞和肺癌A549细胞的半数抑制浓度(IC50)分别为2.0,3.0μg·mL-1,与顺铂的抗肿瘤效价相当.结论 海洋放线菌N331能产生抗茸及细胞毒性较强的生物碱类活性物质.     

丹参酮ⅡA滴丸制备工艺的研究

研究新药丹参酮ⅡA滴丸的制备工艺,确立最佳工艺条件.设计正交实验考察滴丸制备工艺中各影响因素.以聚乙二醇4 000为基质,二甲基硅油为冷凝液,滴制工艺为滴制温度80℃,冷凝液5～25 ℃梯度冷却,滴距4 cm,滴速60滴/min.该工艺制得的滴丸成型性好,丸种差异小,崩解时限为17 min,符合药典规定.该工艺适合丹参酮ⅡA滴丸的制备,且适宜工业化生产.     

乙酰肝素酶稳定表达细胞株的建立

目的：在真核细胞中表达人乙酰肝素酶（HPA）并建立该酶的稳定表达细胞株。方法：构建包含人乙酰肝素酶全长编码序列的真核表达载体pcDNA-hpaFL，转染CHO-K1细胞，G418筛选稳定表达细胞株。通过RT-PCR，Western-blot分析与鉴定蛋白的表达；用荧光HPLC法检测蛋白的活性．结果：在CHO-K1细胞中成功地表达出有活性的人乙酰肝素酶，并获得该酶的稳定表达细胞株。结论：成功地建立了人乙酰肝素酶稳定表达细胞株，为其抑制剂的筛选及其功能的研究奠定了基础。