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目的:探讨星形胶质细胞形态学观察在高通量药物筛选水通道蛋白4(AQP4)抑制剂中的应用,为脑水肿和其他水转运障碍疾病的治疗提供理论依据.方法:应用药物库和原代培养的人星形胶质细胞,以AQP4 siRNA转染细胞后的形态学改变和阻抑蛋白表达作参照,观察药物对星形胶质细胞形态学改变的影响,Western blot方法检测能明显改变细胞形态的靶药物对AQP4蛋白表达的影响,并测定靶药物作用剂量下细胞ATP活性.结果:洛伐他汀、胍那苄和米安色林在12～24 h内能明显改变人星形胶质细胞形态,减低AQP4蛋白表达,与AQP4的siRNA转染细胞4 d后的形态改变和蛋白阻滞效果类似,靶药物作用剂量下对细胞ATP活性无影响.结论:星形胶质细胞的形态学观察可作为大规模药物筛选的初步指标,本研究筛选出的靶药物可能是潜在的AQP4抑制剂. 相似文献
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目的:观察共济失调-毛细血管扩张症致病基因(ATM基因)的RNA干扰对胶质瘤细胞放射敏感性的影响.方法:选择ATM基因不同区域的DNA序列合成并纯化寡核苷酸后转染人胚胎肾脏细胞HEK293,根据对ATM蛋白不同的阻断效应,筛选用于制备ATM发夹结构short hairpin structure(shRNA)基因的最佳序列.将有效序列克隆入pSilencer 1.0-U6载体中,构建出shRNA的表达质粒并转染恶性胶质瘤细胞系U87细胞.以U87细胞为对照,应用Western blot检测细胞中ATM基因的表达;以细胞存活分数(SF)来评估放射敏感性.结果:Western blot显示shRNA介导的ATM基因沉默能明显阻断U87细胞中的ATM蛋白;与U87细胞相比,U87 shRNA细胞SF明显降低,P＜0.05.结论:由ATM shRNA构建的表达质粒能明显抑制ATM表达,增加胶质瘤细胞的放射敏感性. 相似文献
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