3,4-二羟基苯甲醛作用星形胶质细胞减轻脑微血管内皮细胞和神经元氧糖剥夺/再灌注损伤

目的:从神经血管单元(NVU)细胞间相互联系的角度,探讨天麻活性成分3,4-二羟基苯甲醛(3,4-DD)作用星形胶质细胞(Ast)对脑微血管内皮细胞(BMEC)和神经元氧糖剥夺/再灌注(OGD/R)损伤的保护作用.方法:从乳鼠分离、培养BMEC和Ast.采用Transwell小室分别构建Ast与BMEC、Ast与PC1...     

基于网络药理学探讨银翘散治疗上呼吸道感染的作用机制*

目的运用网络药理学预测银翘散治疗上呼吸道感染（upper respiratory tract infection,URTI）的潜在靶点及作用机制。方法 通过中药系统药理学数据库与分析平台（TCMSP）筛选银翘散中的有效活性成分及相关靶点,采用OMIM数据库和GeneCards数据库检索URTI疾病相关靶点,继而获取银翘散和URTI的交集靶点,结合STRING数据库构建蛋白质相互作用（PPI）网络,应用Cytoscape软件实现“成分-疾病-靶点”网络的可视化,并通过DAVID数据库进行基因本体论（GO）富集分析与京都基因与基因组百科全书（KEGG）通路富集分析,预测其可能的作用机制。结果 银翘散共有150个活性成分和117个“药物-疾病”共同靶点,主要活性成分包括了连翘脂、木犀草素、槲皮素、山柰酚、连翘醇、豆甾醇等,关键靶点主要涉及IL-6、TP53、MAPK1、APP、VEGFA、TNF等基因。靶点富集分析结果表明,GO功能相关条目479个,主要涉及炎症、应激反应、免疫应答、信号传导等方面;KEGG相关通路121条,主要涉及Toll样受体信号通路、TNF信号通路、HIF-1信号通路和PI3K/Akt信号通路等。结论 银翘散主要作用于IL-6、TP53、MAPK1、TNF等核心靶点,通过抗炎、抗病毒和调节免疫等相关通路来发挥治疗上呼吸道感染的作用。     

天麻乙醇提取物促进小鼠下肢缺血模型血管新生的作用研究*

目的考察天麻80%乙醇提取物（以下简称“天麻醇提物”）对小鼠下肢缺血模型血管新生的作用并初步探讨其作用机制，为其用于治疗下肢缺血性疾病提供实验依据。方法 雄性昆明种小鼠72只，随机分为模型组、假手术组、天麻醇提物组不同处理时间组，采用阻断股动脉法复制小鼠下肢缺血模型，造模后连续给予天麻醇提物（0.94 g/kg），分别于给予受试物后第1、3、7、14天，采用激光散斑扫描仪检测血流量，观察血流恢复情况；qPCR法检测血管内皮生长因子A（Vascular Endothelial Growth Factor A，VEGF-A）、血管内皮生长因子受体2（Vascular Endothelial Growth Factor Receptor2，VEGFR-2）、血管生成素2（Angiopoietin 2，Angpt2）mRNA的表达；术后7、14 d采用免疫荧光三标法（Ki67/Tomato-Lectin/DAPI）标记腓肠肌组织新生血管。结果 与模型组比较，天麻醇提物组术后3、7 d，缺血侧血流增加（P<0.001）、Ki67阳性表达增多；术后1、3 d，缺血侧VEGF-A、Angpt2 mRNA的表达上调（P<0.01、P<0.05）；术后7 d，VEGFR-2和Angpt2 mRNA的表达上调（P<0.05）。结论 天麻醇提物能够促进小鼠下肢缺血模型的血管新生，其作用机制可能与促进促血管新生因子VEGF-A及其受体VEGFR-2、Angpt2的表达相关。     

天麻总酚抗大鼠脑缺血再灌注损伤的转录组学分析及实验验证

目的通过转录组测序技术(RNA sequencing,RNA-seq)分析天麻总酚(total polyphenols of Gastrodia elata,TPGE)抗大鼠脑缺血再灌注损伤(cerebral ischemic reperfusion injury,CIRI)的转录组学特征,并采用定量聚合酶链反应(quantitative polymerase chain reaction,q PCR)验证其分子作用机制。方法将动物分为假手术组、模型组及TPGE组(262.3 mg/kg),通过线栓法复制大鼠脑中动脉栓塞/再灌注损伤(middle cerebral artery embolization/reperfusion injury,MCAO/R)模型,连续ig给药14 d后,以神经行为学评分评价TPGE对MCAO/R大鼠的脑保护作用;采用RNA-seq技术对大鼠脑组织进行转录组测序分析,筛选出TPGE抗CIRI的相关差异基因,对其进行基因本体(gene ontology,GO)和京都基因与基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes,KEGG)分析;通过q PCR对筛选出的差异基因进行实验验证。结果神经行为学评分提示TPGE可明显改善MCAO/R大鼠的神经功能缺失症状;转录组学数据表明TPGE主要作用于Itgam、Tnfsf13b、Itgb2、Cd86、Cxcl16、Cxcl10、Irf7、Tlr4、Csf2rb、Csf3r等差异基因,GO分析主要富集在炎症反应、免疫应答和应激反应等生物学过程,KEGG分析主要富集在炎症、凋亡、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)和Toll样受体等信号通路;q PCR结果表明,与模型组比较,TPGE组大鼠脑组织中的MyD88、NF-κB、TNF-α、MCP-1、IL-1β、P62、LC-3、LC3-I/II、Baxm RNA表达水平显著降低,差异具有统计学意义(P<0.05、0.01、0.001)。结论TPGE具有抗大鼠CIRI的作用,转录组学特征提示其抗CIRI的关键差异基因主要与抑制炎症、减轻自噬和抗凋亡反应相关,可能通过干预MyD88/NF-κB/TNF-α信号通路发挥作用。     

天麻活性成分减轻大鼠神经元氧糖剥夺/复糖复氧损伤的作用机制

目的 研究天麻活性成分3,4-二羟基苯甲醛（3,4-DD）对大鼠脑微血管内皮细胞（BMECs）-大鼠肾上腺嗜铬细胞PC12共培养体系氧糖剥夺/复糖复氧（OGD/R）损伤的改善作用机制。方法 采用Transwell小室共培养BMECs与PC12细胞，然后分为对照组、模型组、丁苯酞组（阳性对照组，0.1 mmol/L）、3,4-DD组（0.1μmol/L），除对照组外，其余各组共培养体系均复制OGD/R损伤模型。同时，共培养体系以相应药物或培养基干预BMECs 24 h，然后检测体系跨膜电阻（TEER）以及PC12细胞中乳酸脱氢酶（LDH）活性、脑源性神经营养因子（BDNF）水平以及TrkB、Plc-γ、Map-2、GAP-43 mRNA表达水平。结果 与对照组比较，模型组共培养体系TEER以及PC12细胞中LDH活性、BDNF水平均显著降低（P<0.01）,PC12细胞中TrkB、Plc-γ、Map-2、GAP-43 mRNA表达水平均显著升高（P<0.01）；与模型组比较，3,4-DD组、丁苯酞组共培养体系TEER以及PC12细胞中LDH活性、BDNF水平和TrkB、Plc...