高效抗反转录病毒治疗HIV感染后心电图异常与CD4+T淋巴细胞计数的关联性研究

目的 探究人类免疫缺陷病毒(HIV)感染者以及获得性免疫缺陷综合征(AIDS)患者经高效抗反转录病毒治疗(HAART)后心电图异常表现及其与CD4+T淋巴细胞相关性.方法 前瞻性收集2018年1月-2020年12月在兰州市肺科医院接受HAART后的HIV感染/AIDS患者心电图资料,观察心电图异常结果,采用x2检验及L...     

大黄素对海人酸致痫小鼠海马神经细胞的保护作用

目的探讨大黄素对海人酸诱导的小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞的保护作用。方法 90只ICR雄性小鼠随机分为对照组、癫痫持续状态组、大黄素治疗组(分为100、200和400 mg/kg组),每组18只。采用海人酸建立小鼠癫痫持续状态模型。通过HE染色和TUNEL染色观察大黄素对癫痫鼠海马神经细胞的形态学变化和凋亡情况;比色法测定谷苷胱肽(GSH)和丙二醛(MDA)的含量以及超氧化物歧化酶(SOD)的活力; RT-PCR和Western blot检测海马组织中IL-1β、TNF-α、caspase-3 mRNA和蛋白的表达。结果大黄素(200和400 mg/kg组)可显著减轻癫痫所致的海马神经细胞的损伤和凋亡,提高GSH和SOD的活性,降低MDA的活性(P 0. 05);同时抑制海马中IL-1β、TNF-α及caspase-3mRNA和蛋白的表达量(P 0. 05)。结论大黄素对小鼠癫痫持续状态后海马神经细胞具有抗氧化、抗炎和抗凋亡等神经保护作用,其作用机制可能与提高GSH和SOD的活性,降低MDA的含量,并抑制IL-1β、TNF-α及caspase-3的表达有关。     

黄连素对衣霉素诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗的影响

目的 探讨黄连素对内质网应激(ERS)诱导剂衣霉素诱导的3T3-L1脂肪细胞胰岛素抵抗(IR)的影响及可能机制.方法 体外诱导分化成熟的3T3-L1细胞,分别用衣霉素和黄连素干预.采用MTT法检测细胞生存率,葡萄糖氧化酶法检测3T3-L1细胞的葡萄糖消耗量,Western blot法检测3T3-L1细胞不同干预条件下ERS信号标志蛋白蛋白激酶R样内质网激酶(PERK)、磷酸化PERK(p-PERK)、真核生物翻译起始因子2α亚基(eIF2α)和磷酸化eIF2α (p-eIF2α)的表达.结果 胰岛素刺激的3T3-L1细胞葡萄糖消耗量可因衣霉素5 mg/L作用5h后减少(P＜0.05);黄连素20 μmol/L预处理24 h可拮抗衣霉素诱导的3T3-L1细胞的IR(P＜0.05).衣霉素5 mg/L作用5h后,p-PERK和p-eIF2α蛋白表达增加(P＜0.05);而黄连素预处理24h可降低衣霉素诱导的p-PERK和p-eIF2α蛋白表达(P＜0.05).结论 黄连素可改善ERS引起的3T3-L1细胞IR,其机制可能与其抑制PERK/eIF2α通路的激活有关.     

牛黄熊脱氧胆酸抑制TNF-α刺激3T3-L1细胞脂肪分解

目的探讨牛黄熊脱氧胆酸(tauroursodeoxycholic acid,TUDCA)对TNF-α刺激3T3-L1细胞脂肪分解及其可能的机制。方法以3T3-L1前脂肪细胞经1-甲基-3-异丁基-黄嘌呤、地塞米松、胰岛素诱导分化成3T3-L1脂肪细胞,设:①对照组;②TNF-α(50 ng/ml)组;③TUDCA(1 mmol/L)+TNF-α(50 ng/ml)组;④TUDCA组(1 mmol/L)。通过油红O染色观察脂滴形态变化并测定培养基中甘油含量作为评价脂肪分解的指标,同时用Western blot检测脂滴包被蛋白perilipinA蛋白表达。结果 TNF-α可以显著刺激3T3-L1细胞脂肪分解,包括功能学显示甘油释放量显著增加[(2.784±0.104)mmol/L,P<0.01],形态学显示脂滴碎裂;TUDCA可以明显抑制TNF-α刺激的3T3-L1细胞脂肪分解,包括阻止脂滴形态的改变,逆转甘油的释放[(1.718±0.085)mmol/L,P<0.01]。通过Western blot检测结果显示TNF-α可以下调perilipin A蛋白表达[(0.227±0.004),P<0.01],而TUDCA可以阻断TNF-α对perilipin A蛋白表达的下调作用[(0.705±0.066),P<0.01]。结论 TUDCA可能通过阻止perilipin A蛋白下调而抑制TNF-α诱发脂肪分解,通过减少游离脂肪酸FFA,从而对胰岛素抵抗、糖尿病等具有一定的改善作用。     

氧化应激对3T3-L1脂肪细胞MCP-1、PAI-1、脂联素表达的影响

目的观察氧化物质第三丁基过氧化氢(t-BHP)对3T3-L1脂肪细胞表达单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、1型纤溶酶原激活物抑制物(PAI-1)、脂联素的影响初步探讨氧化应激引发脂肪细胞功能障碍的可能作用机制。方法培养3T3-L1脂肪细胞,将其诱导分化为成熟的脂肪细胞,不同浓度t-BHP(100,200,300,400,500μmol/L)作用10min后继续培养。MTT比色法检测24h时3T3-L1脂肪细胞的存活率;荧光定量PCR检测8h时MCP-1、PAI-1、脂联素的表达,Real-time PCR检测t-BHP(500μmol/L,10min)作用于3T3-L1脂肪细胞后不同时间点(2,4,8,12,24h)MCP-1、PAI-1、脂联素的表达。结果 (1)t-BHP对3T3-L1脂肪细胞的存活状态无明显影响;(2)t-BHP可剂量依赖性的降低脂联素而增加MCP-1、PAI-1mRNA的表达;(3)500μmol/L的t-BHP对脂联素、MCP-1、PAI-1的调节具有时间相关性。结论氧化损伤能够促进MCP-1、PAI-1的表达、抑制脂联素的表达,这是其介导脂肪细胞功能障碍的可能机制之一。     

Perilipin与肥胖及胰岛素抵抗

Perilipin是一种脂滴相关蛋白,包被于脂肪细胞和甾体生成细胞的脂滴表面.因其独特的组织分布和分子结构,Perilipin具有双向调控脂肪分解的功能.目前许多研究表明,Perilipin在肥胖和胰岛素抵抗中占有重要作用.Perilipin基因的缺失和基因多态性与肥胖、胰岛素抵抗的发生、发展及易感性密切相关.其可能成为治疗这些相关疾病的新靶点.     

大黄素对海人酸致痫小鼠海马神经细胞保护作用机制的研究

目的研究大黄素对小鼠癫痫持续状态后Toll样受体4(TLR4)-髓样分化因子88(My D88)-核因子κB(NF-κB)炎性信号通路表达的影响,探讨大黄素对海人酸致痫小鼠海马神经细胞保护作用的机制。方法 54只ICR雄性小鼠随机分为对照组、癫痫持续状态(SE)组、大黄素治疗组(200 mg/kg),每组18只。采用腹腔内注入海人酸建立小鼠癫痫持续状态模型。通过行为学观察小鼠癫痫发作后的行为学改变;尼氏染色观察小鼠海马组织神经细胞的坏死情况; RTPCR、Western blotting检测TLR4、My D88、NF-κB mRNA和蛋白的表达量。结果大黄素干预后小鼠癫痫的发作级别及发作次数降低;海马组织神经细胞的坏死减轻(P 0.05);同时海马组织中TLR4、My D88、NF-κB mRNA和蛋白的表达下调(P 0.05)。结论小鼠癫痫持续状态后可激活TLR4-My D88-NF-κB炎性信号通路,通过大黄素干预后,TLR4-My D88-NF-κB炎性信号通路的mRNA和蛋白表达下调。大黄素对海人酸致痫小鼠海马神经细胞保护作用的机制可能与其抑制TLR4-My D88-NF-κB炎性信号通路表达有关。