SARS-CoV-2易感实验动物研究进展

由SARS-CoV-2导致的COVID-19从2020年开始在全球蔓延,虽然各国采取了广泛措施以应对疫情,仍然造成了全球大流行,引发了严重的国际公共卫生问题.目前虽然SARS-CoV-2病毒的源头和中间宿主尚不清楚,但是在动物模型的基础上,我国的新冠疫苗研发处于世界领先地位,获得了多种有效疫苗.合适的实验动物对SARS...     

骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ转基因猪胚胎成纤维细胞克隆的构建与鉴定

目的：构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ真核表达载体,转染猪胚胎成纤维细胞并筛选整合有FSⅠ-Ⅰ基因的细胞克隆,为研究FSⅠ-Ⅰ对猪骨骼肌的影响奠定基础。方法：通过RT-PCR方法从猪骨骼肌中扩增FS A（包含FS N端和结构域FSⅠ）和结构域FSⅠ;利用PCR方法分别从鼠基因组、人血液基因组和pcDNA3.1（+）载体上扩增出MCK增强子、ACTA 1启动子和BGHpolyA。将上述4个片段分别连接到真核表达载体pGKneotpAlox2上,构建骨骼肌特异性表达FSⅠ-Ⅰ（包含FS N端和2个连续FSⅠ结构域）的载体pGK-MCK-ACTA 1-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA;用FuGENE
R　HD转染猪胚胎成纤维细胞,经药物G418筛选和PCR鉴定阳性克隆。 结果：成功构建骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的表达载体pGK-MCK-ACTA1 promoter-FSⅠ-Ⅰ-BGHpolyA,并成功整合到猪胚胎成纤维细胞的基因组中,获得了整合有目的基因FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆。结论：获得了骨骼肌特异性表达猪FSⅠ-Ⅰ的猪胚胎成纤维细胞克隆,为通过核移植方法获得表达FSⅠ-Ⅰ转基因猪提供了供体细胞。