PCR技术将在临床检验领域迎来新契机

1985年,Mullis发明的聚合酶链式反应(PCR)技术在医学界掀起了基因诊断技术的热潮,PCR技术凭借快速、简便、灵敏等优点以惊人的速度广泛应用于临床基因诊断等领域,成为现代医学发展的又一里程碑.但十多年的临床实践表明,PCR技术本身在工作流程标准化、PCR仪器标准化和PCR产品标准化等方面还存在着若干弊端,这导致检测结果上的差异,这已经成为当前困扰临床医师、实验室技术人员以及患者的普遍问题.     

宫颈癌血清中LncRNA H19和HOTAIR表达及其临床意义

目的:探讨长链非编码RNA H19和HOTAIR在宫颈癌血清中的表达及其临床意义.方法:收集52例宫颈癌术前血清标本,同时选取年龄配对的39例因妇科良性疾病入院宫颈癌筛查正常的患者血清标本作为对照组.其中10例宫颈癌患者行术前、术后对比.用实时定量RT-PCR(qRT-PCR)检测上述标本的Ln-cRNA H19和HOTAIR表达水平,并对宫颈癌患者术前、术后进行对比.分析宫颈癌患者血清LncRNA H19和HOTAIR与其临床病理参数的关系,采用受试者工作曲线(ROC)对血清LncRNA H19和HOTAIR诊断效能进行评价.结果:宫颈癌患者血清LncRNA H19和HOTAIR表达水平较对照组显著升高,且术后较术前表达显著下降,差异有统计学意义(P<0.05);宫颈癌患者血清中H19和HOTAIR的表达水平与患者年龄、病理类型、临床分期、SCC均无相关性(P<0.05);血清LncRNA H19单独诊断宫颈癌的ROC曲线下面积(AUC)、灵敏度和特异度分别为0.661、30.8%和94.9%;血清LncRNA HOTAIR单独诊断宫颈癌的AUC、灵敏度和特异度分别为0.707、69.2%和66.7%.结论:血清LncRNA H19和HOTAIR可以作为宫颈癌临床诊断和术后监测潜在的循环标记物.     

核转录因子κB家族蛋白及HPV E6/E7mRNA与早期宫颈癌复发的关系

目的 探讨核转录因子κB（NF-κB）家族蛋白表达及人乳头瘤病毒（HPV） E6/E7 mRNA水平与早期宫颈癌复发的关系。方法 收集2017年1月至2020年12月在开滦总医院妇产科接受宫颈癌根治术的163例早期宫颈癌患者的临床资料,设为宫颈癌组;另收集医院同期收治的101例非宫颈癌患者的临床资料,设为非宫颈癌组,根据病理结果分为3个亚组：对照组（子宫肌瘤患者,n=31）、低度鳞状上皮内瘤变（LSIL）组（n=26）、高度鳞状上皮内瘤变（HSIL）组（n=44）。比较宫颈癌组与非宫颈癌组及非宫颈癌3个亚组间宫颈组织中c-Rel、p65、p50核表达及HPV E6/E7 mRNA表达情况,分析c-Rel、p65、p50核表达及HPV E6/E7 mRNA在不同临床病理特征宫颈癌患者中的差异性表达,采用Kaplan-Meier法分析c-Rel、p65、p50及HPV E6/E7 mRNA表达与宫颈癌术后无复发生存的关系,Cox法分析宫颈癌术后复发的影响因素。结果 宫颈癌组c-Rel、p65、p50及HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组（P＜0.05）,HSIL组c-Rel、p50及HPV E6/E7 mRNA阳性率均高于对照组（P＜0.05）,LSIL组HPV E6/E7 mRNA阳性率高于对照组（P＜0.05）。c-Rel表达与脉管浸润程度有关,p65表达与FIGO分期、宫旁浸润及淋巴结转移有关,p50表达与间质浸润有关,HPV E6/E7mRNA表达与肿瘤直径、宫旁浸润及间质浸润有关（P＜0.05）。随访36（12~75）个月期间,163例宫颈癌患者复发率为19.63%（32/163）,Kaplan-Meier结果显示,c-Rel、p50阳性患者与阴性患者的无复发生存率差异无统计学意义（LogRankχ²=0.820、3.181,P=0.367、0.075）,p65、HPV E6/E7 mRNA阴性患者无复发生存率分别优于阳性患者（LogRankχ²=10.597、4.474,P=0.001、0.034）。多因素Cox回归分析显示,FIGO分期IIa期、淋巴结转移、p65阳性、HPV E6/E7 mRNA阳性可增加宫颈癌术后复发风险（HR=1.617、1.506、3.180、1.460,P＜0.05）。结论 转录因子NF-κB家族核表达、HPV E6/E7 mRNA表达在宫颈病变进展过程中存在差异,其表达水平与早期宫颈癌多种病理特征有关,且p65、HPV E6/E7 mRNA可影响宫颈癌术后复发,可作为评估早期宫颈癌术后复发的可靠参考指标。     

长链非编码RNAs在肿瘤外周血中的研究进展

长链非编码RNAs(long non-coding RNAs,LncRNAs)是一类长度超过200个核苷酸的RNA分子,由于其缺少开放阅读框架而不具有编码蛋白质潜能,所以最初被视作转录过程的“暗物质”而未受到重视.近年来因其以RNA的形式在肿瘤的表观遗传、转录以及转录后调控等方面调控基因的表达而被广泛关注.目前已有部分研究报道,一些LncRNAs在某些肿瘤组织及其血清或血浆中稳定表达,并可作为临床诊断、预后监测的新型生物标志物.本文简要概述LncRNAs,并对其在多种肿瘤组织及其外周血的研究进展进行综述.