mTOR信号通路在克唑替尼诱导的EML4-ALK融合基因阳性肺癌细胞株H2228凋亡中的作用

 目的：探讨以磷脂酰肌醇3-激酶相关激酶蛋白家族成员哺乳动物雷帕霉素靶蛋白 (mTOR)为中心的信号通路在克唑替尼（crizotinib）诱导的棘皮动物微管结合蛋白样蛋白4-间变性淋巴瘤激酶（EML4-ALK）融合基因阳性的非小细胞肺癌细胞株H2228凋亡中的作用。方法：根据不同的实验目的处理H2228细胞后,荧光定量PCR检测基因状态,MTT法检测细胞抑制率;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blotting检测细胞mTOR信号通路中关键蛋白的表达及活化水平。结果：Crizotinib对H2228细胞有促凋亡作用,呈时间和剂量依赖性,且能使H2228细胞阻滞在G1期。在使用crizotinib处理的凋亡细胞株中发现mTOR活化水平降低,mTOR上、下游关键蛋白的活化水平都呈下降趋势,肺癌细胞株H2228中特殊表达的融合蛋白EML4-ALK变异体3表达量未受影响,但其活化形式p-ALK明显受到抑制。结论：初步证实mTOR信号通路在crizotinib诱导含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞H2228凋亡中有一定作用,为crizotinib的作用机制提供了依据。     

HGF/c-Met信号通路在克唑替尼诱导不同肺癌细胞株凋亡中的作用

 目的: 观察克唑替尼(crizotinib)诱导不同肺癌细胞株凋亡中HGF/c-Met信号通路的变化并探讨其调控机制。方法: 采用噻唑蓝(MTT)法检测克唑替尼对H1993(c-Met扩增的肺腺癌细胞)、H2228(含有EML4-ALK融合基因的肺癌细胞)和A549细胞的活力抑制情况;采用流式细胞术检测3种细胞在克唑替尼作用后24 h、48 h和72 h的凋亡率;采用Western blot检测细胞在克唑替尼作用前后HGF/c-Met信号通路中MET蛋白及其磷酸化形式p-MET的水平,同时观察其下游通路关键蛋白AKT、ERK、p-AKT和p-ERK的变化情况。结果: MTT结果表明克唑替尼作用72 h后,H1993、H2228和A549细胞株的细胞活力抑制率均呈剂量依赖性升高。流式细胞术检测发现随着克唑替尼作用时间的延长,细胞凋亡率呈时间依赖性增加(P<0.05)。Western blot检测结果提示在H1993细胞株和H2228细胞株中,p-MET、p-AKT和p-ERK随着时间的延长蛋白水平呈现下降趋势。而在A549细胞株中p-AKT、p-ERK和p-MET在药物作用72 h后的变化趋势不明显。结论: 初步证实HGF/c-Met信号通路与克唑替尼诱导肺癌细胞株H1993和H2228凋亡相关。     

唑来膦酸治疗非小细胞肺癌骨转移疗效及安全性的临床研究

[目的]观察唑来膦酸治疗非小细胞肺癌骨转移的疗效及安全性。[方法]临床确诊的41例非小细胞肺癌骨转移患者,唑来膦酸4mg,溶于100ml生理盐水,静脉滴注15min,每3~5周重复。[结果]用药第7d骨转移疼痛缓解有效率为78.0%。骨不良事件发生率中,骨放疗为12.2%,椎体压缩、变形为7.3%,脊髓压迫为4.9%,无1例病理性骨折、骨手术及高钙血症的发生。不良反应有流感样症状、发热、肾功能降低及眼结膜炎。[结论]唑来膦酸可以有效控制非小细胞肺癌骨转移性癌痛,预防、减少和延缓骨不良事件的发生,临床应用安全性好,无严重不良反应。     

沙利度胺对肺癌患者治疗前后血清VEGF水平的影响及临床意义

目的 观察沙利度胺联合第三代化疗药含铂方案治疗晚期非小细胞肺癌(NSCLC)的临床疗效及治疗前后血清中VEGF水平的变化.方法 66例经病理或细胞学证实的初治ⅢB～Ⅳ期NSCLC患者随机分为两组,其中联合组35例,接受沙利度胺联合第三代含铂方案治疗;单化组31例,接受第三代含铂方案化疗.并用ELISA方法检测患者治疗前后血清VEGF的浓度.结果 联合组有效率(CR+PR)为45.7%,临床受益率(CR+PR+SD)为77.1%,中位疾病进展时 间(TTP)为114d;单化组有效率38.7%,临床受益率58.1%,中位TTP为89d,两组有效率差异无统计学意义(P＞0.05);两组临床受益率差异虽然无统计学意义(P=0.055),但联合组略高于单纯化疗组;两组治疗2周期后血清VEGF浓度均显著下降(P=0.000),两组PR、SD的病人治疗后VEGF浓度均下降明显,而PD的病人治疗前后VEGF浓度无明显变化.经沙利度胺干预后患者血清VEGF浓度的下降与单化组比较差异无统计学意义(P=0.513).结论 沙利度胺与第三代化疗药含铂方案联合应用,可提高非小细胞肺癌患者的临床受益率,但未观察到沙利度胺干预能使患者血清VEGF浓度明显下降.     

门脉高压性胃病发病机制的实验研究

目的　观察大鼠门脉高压性胃病胃粘膜血流量及血浆胰高糖素的变化。方法　SD大鼠随机分为门静脉高压组(PHT组 )和假手术组 (SO组 ) ,采用门静脉主干部分结扎复制门脉高压模型。于术后第 14天 ,采用激光多普勒血流仪测量门静脉压力、胃底及胃窦粘膜血流量 ,放射免疫分析法检测血浆胰高糖素含量。结果　PHT组门静脉压力 (2 6 5± 0 30kPa)和胃底粘膜血流量 (116 2 1± 13 4 0BPU)显著高于SO组 [(1 13± 0 11kPa) ,(79 0 1± 11 6 6BPU) ](P <0 0 1,P <0 0 5 )。而胃窦粘膜血流量在PHT组和SO组之间无显著性差异 (P >0 0 5 )。PHT组血浆胰高糖素含量 (2 6 1 2 9± 18 4 8pg/ml)显著高于SO组 (6 3 6 1±6 0 1pg/ml) (P <0 0 1)。 结论　门脉高压性胃病发生与胃粘膜高灌注状态有关 ,胰高糖素在胃粘膜高灌注状态形成中可能起一定作用。     

非小细胞肺癌患者血清中TGF-β1与VEGF的表达及临床意义

目的探讨NSCLC患者血清中转化生长因子β(1TGF-β1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其临床意义。方法用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测58例NSCLC患者术前血清和29例健康体检者血清中TGF-β1和VEGF的水平,比较两组血清TGF-β1和VEGF表达水平的差异以及与临床病理特征的关系。结果 58例NSCLC患者血清中TGF-β1和VEGF水平均显著高于健康者(P<0.01),血清TGF-β1和VEGF的表达水平与病理分化低、临床分期晚及淋巴结转移呈正相关关系(P<0.01),而与性别、年龄、病理类型等差异均无统计学意义(P>0.05);血清TGF-β1表达水平与VEGF水平呈正相关(P<0.01)。结论 TGF-β1和VEGF可能共同参与了NSCLC血管生成的作用,从而促进NSCLC的发生、发展和转移。     

MIF-173位点单核苷酸多态性与我国胃癌关系的研究

目的：研究巨噬细胞移动抑制因子(MIF)基因-173 G/C位点单核苷酸多态性在中国胃癌高发区和低发区普通人群和胃癌患者中的分布，并探讨其基因多态性与我国胃癌的关系。 方法： 用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR－RFLP)检测年龄和性别匹配的广东省104例普通人及104例胃癌患者和陕西省普通人和胃癌患者各102例的MIF-173位点单核苷酸多态性。 结果： 在胃癌高发区，胃癌患者携带MIF-173 C/C的频率明显高于普通人群(28.8% vs 15.4%, χ2=5.47, P<0.05, OR=2.23, 95% CI=1.13-4.41)，MIF-172 C/C 基因型增加Hp感染后胃癌发生的危险性(χ2=5.27, P<0.05, OR=8.0，95% CI=1.27-19.72)。在胃癌低发区，胃癌患者MIF-173 C/C基因型的频率与正常对照组无明显差异(31.4% vs 27.5%, χ2=0.38, P>0.05)。 结论： MIF-173 C等位基因可能与我国汉族人群胃癌发生有关。     

非小细胞肺癌患者肿瘤组织和血清表皮生长因子受体第19、21外显子的检测及其临床特征的分析

 目的： 检测非小细胞肺癌 (non-small-cell lung cancer, NSCLC)患者血清与肿瘤组织中表皮生长因子受体（epidermal growth factor receptor,EGFR）的突变状态,分析两者的一致率及其临床特征,比较2种方法的优劣,探索血清代替组织检测的可行性。方法： 收集中国人群NSCLC患者肿瘤组织和匹配的血清标本共90对,肿瘤组织和血清均用蝎型探针扩增阻滞突变系统(scorpions amplification refractory mutation system,SARMS)和直接测序2种方法检测EGFR基因中第19和21外显子的突变状态,应用2检验和Fisher精确检验分析19和21外显子EGFR突变与患者临床特征的关系,分析在血清和肿瘤组织标本中基因突变的一致性及2种检测方法的灵敏度和特异度。结果： SARMS法检测肿瘤组织和血清标本EGFR突变的检出率分别是46.7% (42/90)和18.9%(17/90),肿瘤组织和血清的突变阳性一致率为16.7%(15/90);而直接测序法检测肿瘤组织和血清标本EGFR突变的检出率分别是30%（27/90）和4.4%(4/90),两者的突变阳性一致率4.4%（4/90）。与测序法相比,SARMS法的灵敏度是35.8%。此外,肿瘤组织的EGFR突变与性别、吸烟史和病理类型有关（P<0.05）,血清EGFR突变与年龄、性别、病理类型和临床分期无明显相关（P>0.05）。结论： 血清的突变检出率仍较组织低,但SARMS法的灵敏度较直接测序法高,肿瘤组织仍为目前确定NSCLC患者EGFR基因突变状态的主要来源和依据。     

胸腔镜对早期非小细胞肺癌患者术后炎症反应及生存质量影响研究

目的探讨胸腔镜对早期非小细胞肺癌患者术后炎症反应及生存质量的影响。方法选取玉林市第二人民医院2010年1月至2012年1月间收治的早期非小细胞肺癌患者102例,随机分成两组。观察组51例,胸腔镜手术治疗;对照组51例,小切口开胸手术治疗。比较两组患者手术后的炎症反应及生存质量。结果观察组引流时间、切口愈合时间、术后住院时间均显著短于对照组(P<0.05);观察组术后第3、7天的血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、C反应蛋白(CRP)水平均显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);两组在躯体疼痛、精力2个方面的得分比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论胸腔镜手术创伤小、出血少、恢复快、术后疼痛轻,能有效降低术后炎症反应,提高患者生存质量。     

恩度联合化疗治疗非小细胞肺癌疗效及安全性探讨

目的:观察恩度联合含铂方案治疗非小细胞肺癌的疗效及安全性.方法:恩度联合NP和GP方案治疗非小细胞肺癌2～6个周期,治疗前及治疗后对目标病灶进行CT检查及病灶测量,达稳定(SD)以上的患者4周后再次复查评价疗效;化疗期间每周查血常规及心电图1次,化疗后查血常规、肝肾功能、心电图,并观察记录治疗引起的毒副反应.结果:初治...