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目的 探讨维生素E(VE)在不同低密度脂蛋白(LDL)氧化模型中抗氧化效率的差异,并揭示VE在体外抗氧化效率不高的可能原因。方法 分别建立LDL主动氧化模型和被动氧化模型,观察LDL与VE共刺激0、12 h以及脂多糖(LPS)与VE共刺激0、3 h后细胞内人α防御素(HNP-1)蛋白及其mRNA水平的表达变化,再通过检测羟基化蛋白(PCO)、丙二醛(MDA)来判断VE是否干扰模型的建立。再将两种氧化模型分别设立氧化模型建立前、后加入VE以及VE(-)组,最后检测不同时间点加入VE后MDA、PCO的变化以分析VE在不同模型中的抗氧化效率差异,并观察细胞内氧自由基水平的波动以判断差异产生的可能原因。 结果 (1)氧化模型中HNP-1mRNA及其蛋白水平的表达均升高,MDA和PCO的生成量也显著升高(P<0.05)。(2)主动氧化模型中不同时间点加入VE后PCO生成量无明显差异(P>0.05);被动氧化前加VE组氧化产物生成量明显低于被动氧化后加VE组(P<0.05)。不同氧化模型的MDA、PCO生成量在氧化前加VE组和氧化后加VE组降低,且被动氧化模型中下降幅度更加明显,而VE(-)组含量变化趋势相同。(3)不同氧化模型中加入VE,均能够显著提高超氧化物歧化酶(SOD)活性;能够降低自由基水平,且在被动氧化前加VE组自由基水平降低更明显(P>0.05)。 结论 VE的抗氧化效率在被动氧化模型中优于主动氧化模型,与VE的加入时间、胞内自由基水平相关。 相似文献
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【立论依据】 氧化修饰的低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein, Ox-LDL)在促进动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的发生和发展中起着关键性的作用。广泛存在于食品中的反式脂肪酸,能促进LDL的氧化修饰最终导致AS,有实验提示,反式脂肪酸是通过细胞膜上的脂质筏引起后续导致AS的各种反应,因此抗氧化治疗的维生素E等药物不能有效地阻止AS的发生。目前阻止体内LDL被氧化成为治疗AS的焦点,于是探究氧化LDL的分子机制变得至关重要。神经节苷脂(ganglioside,GM1)作为脂质筏的标志分子,已有研究显示其与LDL的氧化及分布密切相关,而其与LDL氧化的识别机制以及氧化环境的建立尚有待研究。 【设计思路】 本项目通过分析LDL诱导RAW264.7细胞前后,与神经节苷脂GM1特异结合的蛋白质向脂质筏的转位,从而找出介导LDL在微环境中进行氧化修饰的相关蛋白质因子。 【实验内容】 (1)细胞诱导和脂质筏分离:实验组,巨噬细胞RAW264.7与LDL共培养15 min;对照组,无LDL刺激;密度梯度离心分离脂质筏,非标记定量蛋白质组学鉴定产生的氧化应激相关蛋白。(2)细胞蛋白—GM1共沉淀:①收集巨噬细胞RAW264.7蛋白;②脂质体制备:实验组,制备原料加有GM1;对照组:原料不含GM1;③蛋白质-GM1结合:将收集的蛋白和制备的脂质体孵育结合,收集产物;④通过SDS-PAGE,质谱分析等找出与GM1特异结合的蛋白质分子。(3)蛋白质印迹法验证分析:分析步骤1和步骤2得到的共有蛋白,分别与LDL刺激细胞后分离的脂质筏成分以及与GM1特异结合的蛋白质进行蛋白质印迹法验证。 【材料】 RAW264.7细胞(武汉大学基础医学院);LDL( Pro Spec-Tany公司 );GM1(Sigma公司)。 【可行性】 预实验初步证实了LDL的氧化与脂质筏的形成有关;而且细胞膜“脂质筏”结构的主要组成成分糖鞘脂之一GM1参与了LDL的氧化,激光共聚焦显示GM1与LDL在RAW264.7细胞上的分布密切相关。 【创新性】 该项目首次证实了LDL与氧化微环境-脂质筏的形成有关,并寻找介导氧化的相关分子,从而进一步确认LDL氧化的具体机制。 相似文献
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目的观察苍耳子鼻炎滴丸联合正性激励治疗对青少年过敏性鼻炎疗效及其对CRP、过敏测试影响。方法选取本院2022年1-7月收治的60例过敏性鼻炎患者为研究对象,按照双色球随机分组法均分为两组,对照组采取苍耳子鼻炎滴丸治疗,观察组采取苍耳子鼻炎滴丸联合正性激励治疗,比较两组患者临床治疗效果。 结果观察组患者治疗24h后、治疗1周后视觉模拟评分(VAS)以及血清C反应蛋白(CRP)、不良反应发生率均低于对照组,观察组患者治疗后鼻腔通气面积、纤毛运动速率、鼻腔阻力等鼻腔生理功能均优于对照组,数据差异明显(P<0.05)。结论青少年过敏性鼻炎采取苍耳子鼻炎滴丸联合正性激励治疗可显著提升治疗效果。 相似文献
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原发性输卵管癌(PFTC)是恶性程度很高的妇科肿瘤,具有症状隐匿、发病率低、诊断符合率低等特点。文章总结了当前应用于PFTC术前诊断的影像学特征及分子标记物等方法,并探讨了 相似文献
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目的 观察减毒增效汤防治表皮生长因子受体-2(HER-2)阳性乳腺癌经分子靶向治疗后糖代谢异常的疗效。方法 将96例HER-2阳性乳腺癌患者随机分为2组,对照组给予曲妥珠单抗联合DC化疗方案,观察组在对照组基础上给予减毒增效汤治疗。记录2组化疗期间糖代谢异常发生率、血糖指标和胰岛素抵抗指标变化。并统计化疗疗效和生活质量改善情况。结果 观察组化疗期间糖代谢异常发生率为6.45%(4/62),显著低于对照组的17.74%(11/62)(P <0.05)。与化疗前比较,2组化疗第3周期、第6周期空腹血糖、餐后2 h血糖、空腹胰岛素(FINS)、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)水平均较高(P <0.05),且化疗第3周期、第6周期观察组以上指标均低于对照组(P <0.05)。与化疗前比较,2组化疗第3周期、第6周期血浆IL-6较高(P <0.05),且化疗第3周期、第6周期观察组以上指标均低于对照组(P <0.05)。观察组化疗临床有效率和控制率均显著高于对照组(P <0.05)。结论 减毒增效汤可显著降低HER-2阳性乳腺癌经分子靶向治疗后糖代谢异常发生率... 相似文献
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目的:探讨多层螺旋CT三维血管成像(MSCTA)对Stanford分型主动脉夹层(AD)的诊断效能及随访应用价值。方法:选取2020年1月至2021年6月我院收治的78例疑似Stanford分型AD患者为研究对象。所有患者均进行超声和MSCTA检查,以数字减影血管造影(DSA)或最终手术结果为金标准,分别计算超声、MSCTA诊断Stanford A型和Stanford B型AD的敏感度、特异度、准确度。比较不同Stanford分型AD患者的影像学特征,并以MSCTA随访6个月时间,观察患者预后情况。结果:经DSA或最终手术结果检查显示,入组的78例患者中有21例为Stanford A型AD,占比26.9%,有44例为Stanford B型AD,占比56.4%。超声和MSCTA对Stanford A型AD的诊断敏感度(95.2%vs 76.2%)、特异度(94.7%vs 89.5%)、准确度(94.9%85.9%)比较差异无统计学意义(P>0.05)。MSCTA对Stanford B型AD的诊断敏感度(95.5%vs 75.0%)、特异度(88.2%vs 64.7%)、准确度(92... 相似文献
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正脑梗死是我国心脑血管疾病中发病率和死亡率较高的一种疾病,脑梗死患者在急性期之后通常会存在神经功能方面的缺损,并且不同程度地影响生活质量。据调查显示,补阳还五汤可以显著提高脑梗死患者的生活质量,改善神经功能,且安全可靠~([1])。笔者探讨补阳还五汤对脑梗死恢复期患者神经功能与生活质量的影响,现报道如下。1临床资料1.1一般资料选择2015年1月至2017年1月漯河市第六人民医院收治的脑梗死恢复期患者70例,按照随 相似文献