中国回族人群CYP4F2和VKORC1的基因多态性

目的考察中国回族人群华法林治疗反应相关基因CYP4F2和VKORC1的基因多态性。方法从159名健康中国回族志愿者的外周血提取DNA,CYP4F2的13个外显子及VKORC1的3个外显子及其外显子-内含子交接处的碱基序列通过多聚酶链反应进行扩增,相应的扩增产物经Sanger测序法进行测序分析。所得基因变异体通过软件HAPLOVIEW进行单体型和连锁不平衡分析。错义突变对蛋白的影响通过3个在线软件Poly Phen-2,SIFT和MutationTaster-2进行预测。结果CYP4F2共有18个基因变异体被发现,内含子和外显子各9个,其中有3个变异体是首次报道,即第1内含子-14G>C,第4外显子5039C>T(p.Ala118Val)和第12外显子18227A>C(p.Glu452Ala)。VKORC1共有9个单核苷酸多态性被发现,其中3个位于外显子区。CYP4F2 Val433Met和VKORC1-1639 G>A的变异体等位基因频率分别是0.370和0.608,与千人基因组人群相比均有显著性差异(P<0.05)。CYP4F2和VKORC1所发现的基因变异体有显著的连锁不平衡。结论中国回族人群CYP4F2和VKORC1的群体遗传学模式具有不同的特征,在使用华法林等药物时应进行药物剂量的相应调整。     

FQ-PCR检测小鼠肝癌模型中Cyclin E mRNA方法的建立

目的:建立SYBR Green Ⅰ实时荧光PCR定量检测小鼠肝癌模型中细胞周期蛋白cyclin E mRNA的方法。方法:以cyclin E和β-actin的PCR产物为阳性模板,分别将二者cDNA产物进行10倍梯度稀释,建立双标准曲线,应用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR检测cyclin E和β-actin mRNA含量,对熔解曲线进行分析确定扩增产物的特异性。结果:建立的标准曲线线性关系良好,相关系数r均为-1.00,cyclin E和β-ac-tin扩增效率分别为0.91和0.93,熔解曲线分析显示均为单峰,特异扩增产物的Tm值分别为(81.84±0.28)℃和(89.15±0.26)℃。10-4Cyclin E和β-actin cDNA标本日间变异系数(CV)和批内CV分别为1.02%、1.45%和0.90%、1.48%。结论:SYBR Green I实时荧光PCR定量检测cyclin E mRNA是一种方便快捷、经济实惠、灵敏度高、特异性好的方法,为cyclin E的进一步研究奠定方法学基础。     

HBV cccDNA SYBR GreenⅠ荧光定量检测方法的建立及初步应用

目的 建立一种稳定、特异、敏感的乙型肝炎病毒(HBV)共价闭合环状DNA (cccDNA) SYBR Green Ⅰ荧光定量PCR检测方法.方法 根据乙肝病毒松弛环状DNA (HBVrcDNA)与cccDNA的结构差异,设计跨越双缺口的特殊引物,并利用一种ATP依赖不降解质粒的DNA酶(Plasmid-SafeTMATP dependent DNase,PSAD)提高反应的特异性;建立荧光定量PCR标准曲线,并进行特异性、敏感性和重复性检验.应用所建立的方法评价拉米夫定和阿德福韦酯对HBVcccDNA的抑制效果.结果 该方法能特异性检测到HBV cccDNA,在2.68×1082.68×103 copies/μl检测范围之间有良好的线性关系,相关系数为-1.00,扩增效率为102％;最低检测限为2.68×101 copies/μl.拉米夫定和阿德福韦酯对HBVcccDNA均有很好的抑制效果.结论 该实验所建立的方法稳定性强、特异性好、灵敏度高,可快速定量检测HBVcccDNA,用于抗HBV药物的评价.     

乙型肝炎病毒耐药细胞模型的研究进展

治疗乙型肝炎的核苷（酸）类似物容易导致HBV的变异,从而产生耐药。由于乙型肝炎病毒具有高度的种族特异性而缺少理想的动物模型,因此细胞模型的建立和应用已成为HBV感染防治研究的必要条件。本文重点介绍了HBV DNA转染细胞模型的建立和核苷（酸）类似物耐药细胞模型的建立与应用方法。     

PiWil2在甲状腺乳头状癌中的表达及其与侵袭转移的关系

目的 探讨piwil2在甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中的表达及其与PTC的关系.方法 采用免疫组化、原位杂交检测60例PTC患者肿瘤组织及其癌旁组织中Piwil2蛋白和piwil2 mRNA的表达情况.结果 Piwil2蛋白在肿瘤组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为8 8.3%(53/60)和10.0%(6/60),两者比较差异有统计学意义(x2=73.654,P＜0.01).piwil2 mRNA在肿瘤组织和癌旁组织中的阳性表达率分别为85.0%(51/60)和6.7%(4/60),两者比较差异有统计学意义(x2=74.148,P＜0.01).Piwil2蛋白及mRNA在PTC中的表达与患者的TNM分期及淋巴转移有关(P值均＜0.05).Piwil2蛋白及mRNA在PTC中的表达有相关性(x2=15.098,P＜0.01).结论 Piwil2参与了PTC的发生发展,与PTC的浸润和颈淋巴转移有关.

Abstract：

Objective To study the expressions of Piwil2 protein and mRNA in papillary thyroid carcinoma(PTC) and the relationship between Piwil2 and the invasion and metastasis of PTC. Methods Immunohistochemistry and in situ hybridization were used to detect the expression of Piwil2 protein and mRNA in 60 cases of PTC with the matched adjacent non-cancerous epithelium (NCE). Results The positive rates of Piwil2 protein expression in PTC and NCE were 88.3% (53/60) and 10.0% (6/60)respectively, with significant difference ( x2 = 73. 654,P ＜ 0.01 ). The positive rates of Piwil2 mRNA expression in PTC and NCE were 85.0% (51/60) and 6. 7% (4/60) respectively, also with significant difference (x2 =74. 148 ,P ＜0.01 ). Up-regulated expressions of Piwil2 protein and mRNA were related to the invasion and metastasis of PTC (P ＜ 0.05 ). Conclusion Piwil2 may play a role in the invasion and metastasis of PTC.     

右美托咪定对术后老龄小鼠海马组织caspase-3、Bax表达的影响

目的 探讨右美托咪定(dexmedetomidine,Dex)对手术创伤后老年小鼠caspase-3、Bax表达水平及术后认知功能障碍(postoperative cognitive decline,POCD)的影响. 方法 健康老龄昆明小鼠105只,13～15月龄,体重45～55 g.采用随机数字表法分为4组:空白对照组(C组,15只);麻醉药物组(A组,30只),实验动物接受异氟醚、氯胺酮药物达到相应手术麻醉深度,给药后第1天和第3天分别设为A1组、A3组;麻醉药物手术组(P组,30只),实验动物接受复合麻醉药物后实施剖腹探查脾切除手术,术后第1天和第3天分别设为P1组、P3组;Dex干预组(D组,30只),术前30 rmin各取15只小鼠分别给予Dex15、25 μg/kg腹腔内注射(D15组、D25组).术后第1天、第3天行Y迷宫试验观察神经行为学改变(Dex干预组术后第3天进行);Western blot和免疫组化检测各组海马组织caspase-3、Bax表达. 结果 Y迷宫试验中,与C组(27±8)比较,A组术后第1天[(50±10)次]、P组术后第1天[(70±15)次]和第3天[(65±16)次]训练次数增加,差异有统计学意义(P＜0.01,P＜0.05),D15组、D25组术后第3天与C组比较,差异无统计学意义(P＞0.05):与P组第3天[(65±16)次]比较,D25组[(29±6)次]训练次数差异有统计学意义(P＜0.05).与C组比较,A组、P组术后第1天、第3天caspase-3、Bax蛋白的表达量及阳性细胞数升高(P＜0.01,P＜0.05);D15、D25组第3天与C组caspaLse-3、Bax蛋白的表达量及阳性细胞数比较,差异无统计学意义(P＞O.05).与P组第3天比较,D15、D25组caspase-3、Bax蛋白表达量及阳性细胞数降低(P＜0.01,P＜0.05). 结论 Dex预处理能降低caspase-3、Bax蛋白的表达量及阳性细胞数,减弱海马神经细胞损伤,从而改善小鼠POCD.     

盐酸千金藤碱抗乙型肝炎病毒的体外实验研究

目的 探讨盐酸千金藤碱(CH)对乙型肝炎病毒的体外抑制作用.方法 MTT法检测CH对HepG2.2.15的细胞毒性;酶联免疫吸咐(ELISA)法检测不同浓度CH对细胞上清液中HBsAg和HBeAg的影响;荧光定量聚合酶链反应(FQ- PCR)法检测CH在用药后第9天对细胞内外HBV DNA拷贝数的影响.结果 CH对HepG2.2.15细胞的半数毒性浓度(TC50)为10.24 μmol/L;对HBsAg和HBeAg分泌的半数抑制浓度(IC50)分别为7.01,6.64 μmol·L-1,治疗指数(TI)分别为1.46,1.54;对细胞上清液中HBV DNA拷贝数的IC50为3.49 μmol·L-1,对细胞内HBV DNA拷贝数的IC50为4.25 μmol·L-1,TI值分别为2.93,2.41.结论 CH在体外对HBsAg和HBeAg的分泌和对细胞内外HBV DNA的复制均有明显的抑制作用.     

新形势下大型公立医院高质量发展实施战略与探讨——以郑州大学第一附属医院为案例分析

在后疫情时代及新医改背景下,大型公立医院坚持以人民健康为中心的核心理念,加快推进健康中国战略。本文以郑州大学第一附属医院高质量发展实施路径探索为案例分析,介绍医院从党建引领、创新驱动机制、人才培养和学科建设及注重医院文化建设等方面大型公立医院高质量发展的实施路径与管理策略,取得明显成效,建议基层医院可以借鉴应用。     

卡瑞利珠单抗致继发性肾上腺皮质功能减退症1例

<正>1 病例介绍患者，男，69岁，身高169 cm, 体质量78 kg。2021年5月14日因体检肺部CT提示发现右上肺后段结节样高密度影，大小约为12 mm×13 mm, 双肺局限性肺气肿，恶性待排除。此外，患者间断出现咳嗽、咯痰、胸闷等症状。患者选择于2021年6月17日全身麻醉下行“胸腔镜右上肺结节根治术”。