人骨髓间充质干细胞定向内皮分化前后 miRNA的表达差异分析

目的 探讨人骨髓间充质干细胞(human bone marrow mesenchymal stem cell, hBMSC)定向内皮分化前后miRNA的表达差异分析,为进一步研究其调控hBMSC内皮分化的分子机制奠定理论基础。方法 根据hBMSC定向血管内皮诱导分化培养方法培养细胞,应用电子显微镜观察细胞分化前后形态的变化,应用细胞免疫荧光法检测内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)的蛋白质表达情况,应用高通量测序分析检测细胞分化前后miRNA表达谱的改变,应用qRT-PCR 验证两组中表达差异明显的miRNA分子。结果 与未分化组hBMSC比较,分化后的细胞形态发生类内皮细胞样改变;eNOS 蛋白的表达明显增加;分化后hBMSC共筛选41个差异性表达的miRNA,其中表达上调的有27个,表达下调的有14个;分化组细胞miR-31-5p上调近21倍,miR-200a-3p下调近15倍。结论 hBMSC定向内皮分化前后miRNA表达发生差异性改变,其改变可能影响干细胞的分化程度,可为进一步研究干细胞在血管内皮功能异常所致的血管性疾病异常机制提供研究方向和理论支持。