基质金属蛋白-9抑制剂阻断视网膜色素上皮细胞表面CD73脱落防治实验性自身免疫性葡萄膜炎的初步研究

目的:初步探讨MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73脱落,防治实验性自身免疫葡萄膜炎(EAU)的机制。方法:体外培养分离自野生型C57BL/6小鼠及CD73基因敲除(CD73-/-)小鼠的RPE细胞,以脂多糖及TNF-α共同干预,诱导RPE表面CD73脱落。依据是否同时加入MMP-9抑制剂CTK8G1150(终浓度5.0μmol/L),将两种小鼠培养的RPE细胞分别设为MMP-9抑制剂干预组及无干预对照组。每组细胞给予溶媒、1μmol/L单磷酸腺苷(AMP)、1μmol/L AMP及3μmol/L 5'-α,β-亚甲基-二磷酸腺苷(APCP)(AMP+APCP)进行干预。氚化胸苷掺入法检测不同组别RPE细胞对CD4+T细胞增生的刺激作用。分别以野生型B6小鼠及CD73-/-小鼠为受体,过继免疫诱发EAU。受体小鼠分别随机分为MMP-9抑制剂干预组及未干预对照组,于过继免疫后4、7、10 d视网膜下腔分别注射CTK8G1150或溶媒。实时定量PCR(RT-PCR)、Western blot法检测受体小鼠RPE细胞中CD73 mRNA及蛋白表达。组间比较采用单因素方差分析。结果:刺激方式为AMP时,C57BL/6 MMP-9抑制剂干预组CD4+T细胞的增生能力较无干预组显著下降,差异有统计学意义(F=13.28,P<0.01);溶媒、AMP+APCP时,两组CD4+T细胞增生能力比较,差异无统计学意义(F=7.78、6.58,P>0.05)。CD73-/-MMP-9抑制剂干预组、无干预组不同刺激方式CD4+T细胞增生能力比较,差异均无统计学意义(F=5.24、6.12、7.04,P>0.05)。RT-PCR检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组、无干预对照组RPE细胞中CD73 mRNA相对表达量比较,差异无统计学意义(F=6.54,P>0.05)。Western blot检测结果显示,B6受体小鼠MMP-9抑制剂组RPE细胞中CD73蛋白表达较未干预对照组显著增加,差异有统计学意义(F=15.24,P<0.01)。结论:MMP-9抑制剂阻断RPE细胞表面CD73的脱落对EAU具有保护作用。     

急性心肌梗塞患者血小板计数及平均血小板体积的观察

目的：观察和分析急性心肌梗塞（ＡＭＩ）时血小板计数（ＢＰＣ）及平均血小板体积（ＭＰＶ）的变化。方法：用ＭＩＣＲＯ－ＯＴ－１８型全自动自细胞分析仪对５２例ＡＭＩ患者的ＢＰＣ和ＭＰＶ进行测定,并与５０例健康者体者的检测值做对照。结果：发现ＡＭＩ患者的ＢＰＣ比对照组显著减少（Ｐ〈０．０１）,ＭＰＶ比对照组显著增大（Ｐ〈０．０５）。结论：ＡＭＩ患者冠状动脉血栓的形成可能与ＭＰＶ增大有一定关系,而与血小板的     

微流控技术在精子优选及体外受精中的应用

由于传统辅助生殖技术(ART)成功率低,人们在不断追求探索新的技术。大量研究表明微流控技术具有革新传统体外受精(IVF)操作流程的潜能。与传统方法相比,微流控技术应用于精子优选及体外受精具有效率高、时间短、无离心损伤、实时观察筛选效果、微环境相似及自动化等显著优点,为ART提供了新平台。笔者综述了近年来微流控技术在精子活力评价与筛选、精子化学趋向性筛选、体外受精、精子浓度检测、精子分离富集等方面的应用。同时,本文简要讨论了微流控平台原理﹑结构设计及操作流程,聚焦各种方法的优缺点以及临床应用的可能性。可见微流控技术应用于ART仍有一些问题亟待解决,有理由相信其未来发展方向是通过制作高度集成化的平台即体外受精-芯片实验室(IVF-lab-on-a-chip)来实现。     

腺苷受体A1亚型对视网膜色素上皮细胞 免疫调节功能的影响

目的 研究视网膜色素上皮细胞（RPE）主要是通过何种亚型的腺苷受体（ARs）来结合腺苷,及其对 RPE 功能的影响。方法 体外培养人 ARPE-19 细胞系,定量 PCR 检测 4 种腺苷受体（ARA1、ARA2A、ARA2B、ARA3）基 因的表达;提取细胞膜蛋白,Western blot 检测 4 种腺苷受体在 RPE 细胞膜上的存在。体外培养 ARPE-19 细胞至 80% 融合后随机分为 A~E 组。其中,A 组为无干预对照组,B～E 组分别给予 ARA1 拮抗剂 DPCPX（50 nmol/L）、 ARA2A 拮抗剂 SCH58261（100 nmol/L）、ARA2B 拮抗剂 MRS1754（100 nmol/L）及 ARA3 拮抗剂 MRS1220（5 μmol/L） 干预。利用 H3-腺苷进行放射性配体结合实验,计算各组细胞对腺苷的最大结合容量（Bmax）。以肿瘤坏死因子 α （TNF-α）10 μg/L 及 γ 干扰素（IFN-γ）1 000 U/mL 联合干预体外培养的 ARPE-19 细胞,给予或不予 ARA1 激动剂 （CCPA）,酶联免疫吸附试验（ELISA）测定培养上清中白细胞介素（IL）-6、IL-10、转化生长因子 β（TGF-β）、单核细胞 趋化因子（MCP）-1、趋化因子 C-X-C 配体 10（CXCL10,IP-10）的含量。结果 在 ARPE-19 细胞中即可检测到 4 种 腺苷受体基因的表达,也可探测到其分子在细胞膜上的存在。A~E 组 ARPE-19 细胞结合腺苷的 Bmax （单位：fmol）分 别为 2.04±0.31、0.44±0.06、1.82±0.28、2.01±0.42 及 2.06±0.44,其中 B 组较其他各组 Bmax均降低（P＜0.01）。以 TNF- α 及 IFN-γ 激活 ARPE-19 细胞,与对照 RPE 组比较,CCPA 干预 RPE 组 IL-6、MCP-1 及 IP-10 的含量降低、IL-10 的含量增加（P＜0.01）。2 组 TGF-β 的含量差异无统计学意义。结论 ARA1 对 ARPE-19 细胞结合腺苷的能力具 有重要的调控作用,ARA1 受体介导的信号可抑制 ARPE-19 细胞分泌促炎因子及驱化因子,具有潜在的免疫抑制 作用。     

重组人胰岛素样生长因子-1对db/db小鼠应激性血糖升高的保护作用

目的:研究重组人胰岛素样生长因子(rhIGF)-1对2型糖尿病(T2DM)伴胰岛素抵抗(IR)小鼠应激性血糖升高的治疗作用。方法:以瘦素受体基因缺陷型db/db小鼠为动物模型,电脉冲刺激诱发应激性高血糖。给予高剂量胰岛素或rhIGF-1进行干预,观察血糖的变化情况。Real time-PCR及Western blot分别检测骨骼肌组织内GLUT4基因的表达水平及GLUT4蛋白含量。结果:在8周龄时瘦素受体基因缺陷的db/db小鼠表现出了明显的肥胖、高血糖及高胰岛素血症。应激后组间血糖水平的差异有统计学意义(F组间=48.915,P<0.05),组内不同时间点血糖水平差异无统计学意义(F时间=1.295,P>0.05),组间和时间无交互效应(F交互=1.046,P>0.05)。采取干预措施后,组间血糖水平差异有统计学意义(F组间=36.947,P<0.05),不同时间点血糖水平差异有统计学意义(F时间=13.880,P<0.05),且组间和时间存在交互效应(F交互=11.769,P<0.05)。IGF-1可显著增加db/db小鼠骨骼肌组织中GLUT4基因的表达及GLUT4蛋白在细胞膜中的含量。结论:rhIGF-1对T2DM小鼠被诱发的应激性高血糖具有较胰岛素更好的控制作用,此作用可能是因骨骼肌细胞中GLUT4的表达及转位增加所致。     

应用相差显微镜鉴别血尿来源的方法学及形态学探讨

近年来国内外陆续报道了应用相差显微镜鉴别血尿来源的方法，这对于初步鉴别血尿来源具有一定的临床价值。但由于目前各实验室的方法学尚不规范，对于肾小球性红细胞(肾内红细胞)和非肾小球性红细胞(肾外红细胞)的形态学认定标准不统一，从而出现了不同实验室检验结果的不一致性，贻误临床诊断。因此亟待规范实验方法，统一畸形红细胞的认定标准。     

数字化临床路径管理工具的设计

基于数字技术的临床路径有必要从管理工具入手。临床路径本质上是一个依时序和分工而进行计划的可执行任务体系,其要点就是时序与分工。采用数字技术实现任务安排和时序功能,使临床路径的新建和修改工作与医嘱安排一样方便,为医护人员提供一个快捷制作和自动应用的临床路径工作环境。同时展示了在学科结合部,如何深入进行系统分析,以获取别开生面的创新思路。     

城镇化进程中农村老年人的抑郁情绪及相关因素

目的:调查城镇化进程中,"城乡结合部"和"传统农村"两类农村老年人的抑郁情绪,并分析主要的相关因素。方法:在福建省福鼎市的山前街道和点头镇所辖行政村选取老年受访者1135人,采用CES-D的10题简版评估抑郁情绪(得分≥10分有抑郁情绪问题),自编问卷调查相关基本情况。结果:传统农村老年人中有抑郁情绪问题的比例高于城乡结合部老年人(49.6%vs.30.3%,P0.001)。Logistic回归分析的结果显示,在控制其他因素的影响后,传统农村老年人出现抑郁情绪问题的危险性是城乡结合部老年人的1.40倍;进一步的分析表明,与农村老年人抑郁情绪最重要的相关因素(P0.001),城乡结合部是健康自评差(OR=7.52)、经济紧张(OR=4.41)、负性生活事件(OR=2.91)、独居(OR=2.72),而传统农村地区则主要是经济紧张(OR=8.52)。结论:城乡结合部老年人中抑郁情绪问题相对更少;在城镇化过程中,建议从改善经济、保障医疗、提升社会支持等方面提升农村老年人的情绪幸福感。     

凝血三项在外科手术前常规检测中的应用

根据卫生部文件卫医发[2000]412号《关于出凝血实验检验方法操作规程的通知》中提出如下要求：停止使用出血时间测定项目的Duke法，停止使用凝血时间测定玻片法和毛细血管法，停止使用一般外科手术的常规出血时间测定，用部分凝血活酶时间（AFFr）凝血酶原时间（PT）和血小板计数（PLT）联合检测取代。我室根据卫生部要求和临床需要及病人承受能力开展了凝血三项，即：APTT、PT、FIB加PLT，因为PLT在血常规检测中已包括，我们将操作规程改变前后的3186例外科手术前患者的APTT、PT、FIB结果与旧的出凝血时间的结果进行汇总分析，现将结果报道如下供同道参考。