SUMO1T95R点突变小鼠模型的构建、表型及应用

目的 构建SUMO1T95R点突变小鼠模型,并鉴定小鼠肌球蛋白的SUMO化修饰位点。方法 采用同源重组方式在ES细胞中完成点突变,构建SUMO1 T95R点突变小鼠模型;采用小鼠基因鉴定技术鉴定T95R小鼠模型构建是否成功;检测T95R点突变小鼠与野生鼠的体重及血糖变化差异;采用肌球蛋白提取方案提取纯化肌球蛋白,并采用高分辨质谱技术鉴定SUMO化位点。结果 小鼠基因鉴定技术确定T95R小鼠模型构建成功;T95R点突变纯合小鼠与野生型小鼠体重及血糖变化趋势一致。在T95R纯合小鼠检测到肌球蛋白新的SUMO1修饰位点。结论 本实验室构建了一种特殊的SUMO1点突变小鼠模型,为鉴定SUMO化蛋白的修饰位点提供了简便可行的方法,新的SUMO化位点的发现有助于研究肌球蛋白的生理病理功能。     

蛋白质翻译后修饰的质谱鉴定方法和在精准医学研究中的应用

近年来,随着科学技术的发展,质谱法(MS)作为一种创新型分析技术应运而生。MS适用于大量样品的分析,其凭借高效、灵敏、准确、稳定以及便捷等特性,成为蛋白质组学应用的首要选择,在蛋白质分析领域中得到了广泛应用。蛋白质组学对于疾病的早期诊断、预后和监测疾病的发展至关重要,其中,蛋白质翻译后修饰(PTM)是蛋白质功能调控的重要方式,因此,关于PTM的检测在实验过程中非常重要。本文综述了泛素化、类泛素化、乙酰化、糖基化等PTM质谱检测以及本实验室建立的新型类泛素化质谱检测方法,并探讨了PTM质谱鉴定在精准医学研究领域的应用情况。