利用宏基因组高通量测序技术揭示血液病患者的感染谱

背景 感染是血液病患者常见的并发症和死亡原因,病原微生物的早期检测对于改善血液病患者的预后尤为重要。近年来出现的宏基因组高通量测序（mNGS）技术具有操作简单、所需样本量小、检测快、不易受污染、可检测出培养法不能检测的边缘微生物的优点。 目的 探讨mNGS技术检测所揭示的感染谱,以明确血液病患者的感染病因并指导治疗。 方法 标本来源于2018年8月至2020年12月广西医科大学第一附属医院血液科住院期间出现感染或疑似感染症状的53例血液病患者,对53例患者的58个样本（全血、脑脊液、胸腔积液、组织、腹腔引流液、关节液、痰液、右下肢穿刺液）进行mNGS技术检测。在进行mNGS技术检测的同时,52例患者（55个样本）采用培养法检测致病微生物、46例患者（50个样本）采用G/GM试验检测致病微生物、44例患者（48个样本）采用PCR检测致病微生物。 结果 mNGS所揭示的血液病患者的感染谱显示,革兰阳性菌中最常见为痤疮丙酸杆菌（42例次）、表皮葡萄球菌（33例次）、人葡萄球菌（32例次）,革兰阴性菌中最常见的为约翰逊不动杆菌（26例次）、越南伯克霍尔德菌（20例次）、乌汶克霍尔德菌（19例次）,真菌中最常见的为限制性马拉色菌（28例次）;病毒中最常见的为巨细胞病毒、EB病毒、细环病毒（分别为26、14、19例次）。1例重型地中海贫血造血干细胞移植后患者血液及脑脊液均检出刚地弓形虫。与培养法、G/GM试验、PCR相比,mNGS技术具有较高的阳性率（P<0.05）。本研究中根据mNGS技术检测结果调整用药的患者有6例,其中4例经治疗好转,2例治疗效果欠佳。 结论 本研究利用mNGS技术揭示了血液病患者感染的病原体谱,证实mNGS技术可有效帮助确定血液病患者感染病因和指导治疗,但其可能出现假阳性和假阴性,结合其他检测方法可降低错误诊断的机会。     

紫杉醇对FLT3-ITD突变阳性急性髓系白血病细胞株MOLM-13增殖与凋亡的影响

目的:探讨紫杉醇对FLT3-ITD突变阳性急性髓系白血病(AML)细胞株MOLM-13增殖与凋亡的影响及可能机制.方法:选用紫杉醇(0～20nmol/L)作用于MOLM-13细胞,CCK8法检测药物对细胞的增殖抑制作用,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测FLT3、PI3K、AKT、mTOR ...     

紫杉醇和奎扎替尼单药及其联用对AML细胞株MV4-11及其STAT5信号通路的作用

目的:探讨紫杉醇、奎扎替尼单药及二者联合对人白血病细胞株MV4-11(FLT3-ITD⁺)增殖、凋亡的影响,以及对FLT3/STAT5通路的作用。方法:分别用不同浓度紫杉醇、奎扎替尼单药作用于MV4-11细胞24、48、72 h,在48 h时间点两种药物分别选取两种浓度联合使用,比较细胞增殖抑制情况;选用一种药物浓度组合用流式细胞术检测细胞凋亡率,荧光定量PCR法测定FLT3、STAT5 mRNA表达水平,Western blot法测定FLT3、p-FLT3、STAT5、p-STAT5蛋白的表达水平。结果:不同的紫杉醇、奎扎替尼联合用药组均有协同抑制作用,联合用药组的细胞存活率明显低于单药组(P<0.05),联合用药组细胞的凋亡率均明显高于单药组(P<0.001)。联合用药组FLT3 mRNA的表达量均显著高于单药组(P<0.001);联合用药组STAT5 mRNA的表达量高于奎扎替尼单药组(P<0.01),但与紫杉醇单药组比较差异无统计学意义。联合用药组p-FLT3、p-STAT5蛋白的表达水平均显著低于单药组(P<0.05,P&l...