亚低温配合自由基清除剂治疗脑梗死的临床研究

目的探讨亚低温与自由基清除剂治疗脑梗死的方法和疗效。方法139例脑梗死患者随机分为3组,对照组47例常规治疗;治疗组1:46例采用亚低温治疗;治疗组2:46例给予亚低温配合自由基清除剂治疗。分别评定治疗前后的神经功能缺损评分(NDS)、重要脏器功能指标及预后。结果与对照组相比:亚低温治疗能提高患者治疗有效率(P<0.01),降低NDS(P<0.05)和血乳酸水平(P<0.01),亚低温配合自由基清除剂治疗能显著提高患者治疗有效率(P<0.01),降低NDS(P<0.01)和血乳酸水平(P<0.01),并能显著降低患者肝、肾功能不全和心律失常的发生率(P<0.01 VS对照组);结论亚低温配合自由基清除剂辅助脑梗死的综合治疗可明显改善患者预后、提高患者治疗有效率,降低并发症,值得临床推广。     

JNK通路可能介导MPTP诱导的黑质神经元凋亡

目的 探讨氧化应激激活的c-jun NH2-terminal kinase(JNK)细胞凋亡通路在1-甲基-4-苯基-1，2，3，6-四氢吡啶(MPTP)诱导帕金森病(PD)小鼠黑质神经元凋亡中的可能作用。方法 采用MPTP制备PD小鼠模型，应用生化技术检测黑质区域谷胱甘肽(GSH)浓度及超氧化物歧化酶(SOD)活力，尼氏体染色和酪氨酸羟化酶(TH)免疫组织化学染色观察黑质神经元的损害情况，原位缺口末端标记(TUNEL)染色和活化型Caspase 3免疫组织化学染色观察黑质神经元的凋亡情况，同时采用蛋白兔疫印迹法检测磷酸化JNK及磷酸化c-jun蛋白表达水平。结果 MPTP诱导的PD小鼠黑质区域GSH浓度明显降低，SOD活力明显升高，黑质致密带尼氏体阳性神经元和TH阳性神经元显著脱失，磷酸化JNK及磷酸化c-jun蛋白表达水平上升，同时活化型Caspase 3表达阳性细胞增多，黑质神经元TUNEL染色的阳性率增高。结论 MPTP可诱导小鼠黑质神经元凋亡，机制与增强氧化应激并激活JNK细胞凋亡通路有关。     

CDK4-pRB-E2F1通路是Aβ1-40诱导皮层神经元凋亡的可能途径

目的:探讨β淀粉样肽_1-40(beta-amyloidpeptide_1-40, Aβ_1-40)诱导大鼠皮层神经元凋亡的可能分子机制。方法:以40mg/L的Aβ_1-40诱导离体培养的大鼠皮层神经元凋亡, 流式细胞仪及免疫印迹方法检测细胞周期相关的周期依赖性激酶4(CDK4)、磷酸化的视网膜神经胶质瘤蛋白(pRB)水平;RT-PCR技术检测E2F1mRNA表达水平;荧光分光光度计检测半胱氨酸基天冬氨酸特异性蛋白酶3(caspase-3)活力;观察在Aβ_1-40诱导凋亡过程中是否伴随上述指标的变化。结果:①CDK4、磷酸化pRB水平在Aβ_1-40作用后2-4h显著升高;②Aβ_1-40孵育3h后皮层神经元E2F1基因表达上调;③Aβ_1-40作用12-24h后caspase-3活力明显升高。结论:CDK4-pRB-E2F1信号转导通路可能在Aβ_1-40诱导的大鼠皮层神经元凋亡中起主要作用。     

一氧化氮可能参与多巴胺对PC12细胞凋亡的诱导作用

目的：探讨多巴胺（DA）诱导的PC12细胞凋亡是否与内源性一氧化氮（NO）生成有关。方法：酶还原法测定NO浓度，RT－PCR法检测诱导型一氧化氮合酶（iNOS)和caspase-3 mRNA表达水平，免疫细胞化学方法和蛋白印迹法分别检测活化型caspase-3蛋白和iNOS蛋白水平。结果：在多巴胺诱导PC12细胞凋亡过程中，iNOS mRNA和蛋白表达明显增加，内源性NO生成增多，caspawse-3mRNA和活化型caspase-3蛋白的表达也明显增加，结论：内源性NO可能参与多巴胺对PC12细胞凋亡的诱导作用。     

人参皂甙Rg1保护多巴胺能神经元的实验研究

帕金森病(PD)是中老年人常见的一种中枢神经系统变性疾病,其特征性病理变化是中脑黑质多巴胺能神经元变性坏死。近年来许多证据显示氧化应激反应增强是导致帕金森病黑质多巴胺能神经元凋亡的主要因素。传统的帕金森病治疗包括多巴胺替代疗法、抗胆碱能药物等,近年神经元保护治疗也逐步成为新的治疗热点。人参皂甙是从祖国传统中药人参中提取的有效成分之一,已有的研究提示,人参皂甙Rg1可保护大鼠大脑皮质神经细胞,防止细胞凋亡的发生。但是,人参皂甙 Rg1对多巴胺能神经元是否也有保护作用,     

β淀粉样肽1-40通过激活caspase-3诱导大鼠皮层神经元凋亡

目的　探讨半胱氨酸蛋白酶caspase 3在 β淀粉样肽1 4 0 (β AP1 4 0 )诱导大鼠皮层神经元凋亡中的可能作用。　方法　用 β AP1 4 0 诱导神经元凋亡 ,同时检测caspase 3活力和caspase 3活性片段及caspase 3mRNA的表达水平。　结果　 4 0mg·L- 1 的凝聚态 β AP1 4 0 诱导大鼠皮层神经元凋亡过程中 ,caspase 3活力和caspase 3mRNA的表达水平均有明显增高 (P <0 0 1) ;特异性的caspase 3抑制剂Ac DEVD CHO对caspase 3的激活和皮层神经元细胞凋亡均有明显的阻断作用。　结论　caspase 3可能是 β AP1 4 0 诱导大鼠皮层神经元凋亡的效应因子     

人参皂甙Rg1对帕金森病小鼠黑质JNK细胞凋亡通路的影响

目的 探讨人参皂甙Rg1(ginsenoside Rg1)抗帕金森病(PD)小鼠黑质神经元凋亡的可能机制。方法 采用MPTP制备帕金森病(PD)小鼠模型，经人参皂甙Rgl预处理后，用尼氏染色、TH和活化型caspase-3组织化学染色及TUNEL染色法观察黑质神经元的损害情况，并计算神经元的凋亡率，同时应用蛋白免疫印迹法检测黑质神经元磷酸化．JNK(c—Jun氨基末端激酶)及磷酸化c—Jun蛋白表达水平。结果 人参皂甙Rg1预处理可减轻PD小鼠黑质致密带Niss1阳性神经元和TH阳性神经元的丢失现象，同时减少磷酸化．INK及磷酸化C-Jun蛋白表达水平，活化型caspase-3表达减少，降低黑质神经元的凋亡率。结论人参皂甙Rg1能减少MPTP诱导的小鼠黑质神经元凋亡，其机制与阻断．JNK细胞凋亡通路激活有关。     

JNK的激活在MPP诱导SHSY5Y细胞凋亡的信号转导中的作用

目的:探讨MPP⁺诱导SHSY5Y细胞凋亡的可能信号转导途径。方法:用吖啶橙-溴化乙锭染色观察SHSY5Y细胞凋亡率,Westernblot法检测JNK激酶的活性,用JNK反义寡核苷酸转染SHSY5Y细胞抑制JNK激酶的活性。结果:MPP⁺可诱导SHSY5Y细胞凋亡,在凋亡过程中JNK激酶活性增强,用NAC预处理或用JNK反义寡核苷酸转染后MPP⁺诱导的SHSY5Y细胞凋亡减少,同时JNK激酶活性增强可被抑制,裂解的caspase3阳性细胞数减少。结论:MPP⁺诱导SHSY5Y细胞凋亡,其可能的信号转导途径是通过JNK激酶的激活从而激活caspase3。     

人参皂苷Rg1可能通过丝裂素活化蛋白激酶途径抑制细胞凋亡人参皂苷Rg1可能通过丝裂素活化蛋白激酶途径抑制细胞凋亡

目的探讨人参皂苷Rg1对MPP⁺诱导细胞凋亡保护作用的可能信号传导途径。方法用吖啶橙-溴化乙锭染色观察SHSY5Y细胞凋亡率,流式细胞仪检测细胞内活性氧ROS水平,Western Blotting法检测JNK(c-jun NH₂-terminal kinase)激酶活性,免疫细胞化学染色法检测裂解的Caspase-3阳性细胞的表达率。结果经10 μmol·L^-1 Rg1或2.5 mmol·L^-1 N-乙酰半胱氨酸预处理后,MPP⁺诱导的SHSY5Y细胞凋亡受到明显抑制,同时细胞内ROS下降,JNK激酶的活性减弱,裂解的Caspase-3阳性细胞表达率下降。结论Rg1可抑制MPP⁺诱导的SHSY5Y细胞凋亡,其作用机制可能是通过清除ROS、减弱JNK激酶的活性,从而减少Caspase-3的激活     

文拉法辛对血管性痴呆模型大鼠学习记忆功能的影响

目的 研究文拉法辛对血管性痴呆(VD)模型大鼠学习记忆功能的影响及机制. 方法 将Wistar大鼠随机分为假手术组、模型组和治疗组,各30只.模型组和治疗组采用改良Pulsinellis四血管阻断法建立血管性痴呆大鼠模型.造模后第3天开始假手术组及模型组予蒸馏水灌胃,治疗组予文拉法辛灌胃,剂量15 mg/kg,共28 d.采用单程逃避实验测试各组大鼠的主动学习记忆能力,并观察各组大鼠海马及前额叶皮质5羟色胺(5-HT)、去甲肾上腺素(NE)含量及认脑源性神经营养因子(BDNF)含量变化. 结果 造模后30 d与假手术组大鼠单程逃避实验完成逃避的百分比数(92.3±5.6)相比,模型组完成逃避的百分比数(50.3±6.2)明显减少(P＜0.01),模型组大鼠海马及前额叶皮质5-HT、NE含量明显下降,分别为(226±34) pg/g和(340±40) pg/g,(601±66)pg/g和(657±43) pg/g(P＜0.01),BDNF含量升高,海马和前额叶皮质中吸光度分别为(0.50±0.04)和(0.49±0.04) (P＜0.05).与模型组相比,治疗组大鼠单程逃避实验完成逃避的百分比数明显增加至(62.2±4.6)(P＜0.05),大鼠海马及前额叶皮质5-HT、NE含量升高,分别为(264±45)pg/g和(379±42)pg/g,(798±51)pg/g和(798±51) pg/g(P＜0.05),BDNF含量进一步升高,海马和前额叶皮质中吸光度分别为(0.58±0.04)和(0.58±0.06) (P＜0.05). 结论 VD大鼠海马及前额叶皮质5 HT、NE含量减少.文拉法辛能提高VD大鼠海马及前额叶皮质5-HT、NE含量,并进一步提高脑组织BDNF含量,改善大鼠学习记忆功能.