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【目的】 探讨白藜芦醇(Res)对大鼠原代脂肪细胞凋亡的影响及其机制?【方法】 培养大鼠原代脂肪细胞,添加不同剂量的Res干预,用Hoechst 33258染色,在荧光显微镜下观察细胞核形态;用DNA Ladder实验观察DNA断裂的条带;检测各组培养基和细胞内的乳酸脱氢酶(LDH)含量,计算LDH漏出率;用流式细胞仪测定细胞凋亡率;Western blot检测相关位点,包括沉默信息调节因子1(Sirt1)?细胞色素C(Cytochrome C)?半胱天冬氨酸酶家族(Caspase 9和Caspase 3)的蛋白质表达?【结果】 经过Res干预后,细胞核染色质高度凝集,电泳后出现180 ~ 200 bp整数倍的寡核苷酸片段?细胞LDH漏出率升高,呈剂量-反应关系(P < 0.05或P < 0.01)?Res作用后细胞凋亡率明显上升,呈剂量-反应关系(P < 0.01)?Sirt1?Cytochrome C?活化的Caspase 9及Caspase 3表达水平上升,胞浆Cytochrome C释放也增加?【结论】 Res促进原代脂肪细胞凋亡,其机制可能是通过增加Sirt1表达,经由线粒体凋亡途径,作用于Caspase 9和Caspase 3 相似文献
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