Study on the Mechanism of the Annexin I -Mediated Co-Assembly of t-PA and Plasminogen

In order to further investigate the effect of annexin Ⅱ (Ann- Ⅱ ) on tissue plasminogen activator (t-PA)-dependent plasminogen (PLG) activation and its interactive mechanism, recombinant native Ann- Ⅱ bound t-PA, PLG and plasmin with high affinity was examined. The flow cytometric assay showed that the ann- Ⅱ expression rate was higher in the human umbilical vein endothelial cell (HUVEC) (87. 65 %) than in the HL-60 cells as controls (35. 79 %). Two irrelevant proteins,bovine serum albumin (BSA) and equine IgG (EIG) had no effect on the production of plasmin.Ann- Ⅱ -mediated enhancement of t-PA-dependent PLG activation was inhibited by ε-aminocaproic acid or by pretreatment of Ann- Ⅱ with carboxypeptidase B with the inhibitive rate being 77.8 % and 77. 0 %, respectively. It was revealed that the effect of Ann- Ⅱ on PLG activation was specific for tPA. Urokinase didn‘t bind to Ann- Ⅱ , demonstrating the role of receptor-related lysine residues on activation of PLG, showing that the Ann- Ⅱ -PLG interaction was dependent upon carboxyl-terminal lysine residues. These findings suggest that annexin Ⅱ -mediated co-assembly of t-PA and PLG may promote plasmin generation and play a key role in modulating fibrinolysis on the endothelial surface.     

双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统的构建及体外效应研究

目的：构建高靶向性基因转移及表达系统，并研究其介导HSVtk/GCV自杀基因系统对肝癌细胞的体外杀伤作用。方法： 通过重组技术分别构建antiTfR ScFvGAL4融合蛋白表达载体ScFvGAL4pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列（GAL4rec）的HSVtk真核表达载体pEBAF/tkGAL4rec。IPTG诱导后，利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tkGAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肿瘤细胞株HepG2，SMMC7721及A549。潮霉素筛选后，MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。结果：双酶切鉴定、SDSPAGE电泳及测序分别证明antiTfR ScFvGAL4融合蛋白及重组pEBAF/tkGAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中，高分泌AFP(845 ng/ml) 的HepG2/tk细胞对GCV很敏感，且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关；而低分泌AFP(2 ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感；不分泌AFP 的A549/tk细胞则不敏感。结论：双靶向组织特异性HSVtk/GCV抗瘤系统构建成功，并显示出很好的靶向性。     

雾化吸入痰热清针剂对呼吸机相关性支气管炎的影响

目的针对无基础肺部感染的呼吸机相关性支气管炎(VAT)患者,观察雾化吸入痰热清针剂的治疗效果。方法将无基础肺部感染的VAT患者随机分配到治疗组和对照组,治疗组采用痰热清进行雾化,2 ml/次,每日3次;对照组采用等量生理盐水雾化,每日3次。治疗期7天,观察期3个月;比较两组患者呼吸机相关性肺炎(VAP)发生率、有创机械通气时间、入住ICU时长、死亡率等情况。结果治疗组的VAP发生率及死亡率显著低于对照组;治疗组和对照组在ICU住院日、有创呼吸机辅助通气时间等方面比较差异均无统计学意义(p>0.05)。结论对于发生VAT的无基础肺部感染患者,雾化吸入痰热清针剂能降低VAP发生率及死亡率。     

双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建及体外效应研究

目的 构建高靶向性基因转移及基因表达系统,并研究其介导HSV-tk/GCV自杀基因系统对人肝癌细胞的体外杀伤作用。 方法 通过重组DNA技术分别构建anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白表达载体ScFv-GAL4-pET28a及含AFP启动子、GAL4特异性识别序列(GAL4rec)的HSV-tk真核表达载体pEBAF/tk-GAL4rec。前者经IPTG诱导表达获取anti-TfR ScFv-GAL4融合蛋白作为非病毒转运载体,利用受体介导内吞作用介导pEBAF/tk-GAL4rec质粒转染表面均高表达TfR的人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721及人肺癌细胞株A549,潮霉素筛选阳性细胞,扩大培养,分别命名为HepG2/tk、SMMC7721/tk及A549/tk,然后通过MTT法检测GCV对它们的杀伤作用。 结果 双酶切鉴定及SDS-PAGE电泳证明非病毒转移载体anti-TfR ScFv-GALA融合蛋白及重组pEBAF/tk-GAL4rec真核表达质粒构建成功。体外杀伤实验中,表面TfR阳性且高分泌AFP(845 ng/ml)的HepG2/tk细胞对GCV很敏感,且抑制率与GCV浓度及作用时间呈正相关;而低分泌AFP(2ng/ml)的SMMC7721/tk细胞对GCV低度敏感;表面TfR阳性但不分泌AFP的A549/tk细胞则对前药不敏感。 结论 双靶向组织特异性HSV-tk/GCV抗瘤系统构建成功,并显示出很好的靶向性。     

谷氨酸转运体-1与脑缺血

谷氨酸转运体-1（glutamate transporter-1,GLT-1）是脑组织内的一种重要谷氨酸转运体,可将胞外谷氨酸转运至星形胶质细胞内.在谷氨酰胺合成酶的作用下,谷氨酸转化为可被神经元利用的谷氨酰胺.脑缺血时,细胞外谷氨酸浓度急剧升高,从而对神经元产生兴奋性毒性作用.头孢曲松、亚致死性缺血、低压低氧等预处理均可通过调节GLT-1的表达和改善其功能而起神经保护作用.     

牛膝中皂苷和甾酮类物质基础及药理活性研究进展

中药牛膝分为怀牛膝、川牛膝和土牛膝,其化学成分和药理作用复杂且存在差异。皂苷和甾酮类化合物是牛膝的主要成分,其研究得到了广泛关注。对牛膝的皂苷类及甾酮类化合物进行了归属,并对相关药理活性及含量测定的研究进行综述,以期为牛膝的进一步研发提供参考。     

姜黄素对慢性颞叶内侧癫痫大鼠脑脊液和血浆中MMP-9水平及血脑屏障通透性的影响

目的探究姜黄素对慢性颞叶内侧癫痫大鼠脑脊液和血浆中基质金属蛋白酶(MMP)-9水平及血脑屏障通透性的影响。方法本研究于2021年2月至2023年2月在广州医科大学附属脑科医院开展。32只大鼠(6～8周, 雌性, 体质量160～180 g)中成功构建颞叶内侧癫痫模型大鼠17只, 将17只成功建模的慢性颞叶内侧癫痫大鼠随机分到姜黄素组(9只)和生理盐水组(8只)。姜黄素组大鼠予以腹腔注射姜黄素(100 mg/kg)干预, 生理盐水组大鼠予以腹腔注射生理盐水。分别检测两组大鼠干预前后脑脊液和血浆中白蛋白及MMP-9水平。采用t检验、单因素方差分析、事后多重比较。结果姜黄素组大鼠白蛋白商(脑脊液白蛋白/血浆白蛋白比值)从干预前的(14.443±1.700)下降至干预后的(12.822±1.450)(P<0.05), 脑脊液MMP-9水平从干预前的(43.753±3.787)μg/L下降至干预后的(39.507±4.015)μg/L(P<0.05);而生理盐水组脑脊液和血浆中白蛋白水平、白蛋白商及MMP-9水平干预前后均无显著变化(均P>0.05)。结论姜黄素可能通过改变脑脊液...     

西沙必利联合泮托拉唑治疗胃食管反流病90例疗效分析

目的 探讨西沙必利联合泮托拉唑治疗胃食管反流病临床疗效.方法 90例胃镜检查为胃食管反流病患者随机分为2组,联合组用泮托拉唑30mg,口服,每日1次;西沙必利5mg,口服,每日3次;对照组用泮托拉唑30mg,口服,每日1次.疗程均为6周.结果 两组患者治疗6周后临床症状与内镜检查均有疗效,但西沙必利联合泮托拉唑治疗性胃食管反流病的疗效更加明显.结论 西沙必利联合泮托拉唑治疗效果优于单纯应用泮托拉唑治疗.     

Effect of Antisense Oligonucleotide to AnnexinⅡon the t-PA-mediated Plasmi nogen Activation in vitro

Annexin ,a calcium- regulated,phospho-lipid- binding protein on endothelial cells,macrophages and some tumor cells,is a cell- sur-face co- receptor for both plasminogen( PL G) andits activator,tissue plasminogen activator ( t-PA ) [1] .Annexin contains three distinct func-tional regions:N- terminal region,C- terminal re-gion,and core region.The core region of annexin contains the Ca2 +- and phospholipid- bindingsites[2 ] .The C- terminal region contains the plas-minogen- binding domain a…     

Study on the Mechanism of the Annexin -Mediated Co-Assembly of t-PA and Plasminogen

Annexin ,a calcium- dependent phospholipidbinding protein with molecular weight of3 6 k D,isa member of annexin family consisting of1 3 mem-bers in mammalians.This phospholipid- bindingprotein is distinct from the urokinase receptor andfrom other known cellular binding sites for plas-minogen (PLG) and tissue plasminogen activator(t- PA) .Endothelial cells express abundant bind-ing sites for the fibrinolytic zymogen and t- PA.Binding of PLG to endothelial cells enhances thecatalytic efficie…