眼球壁小梁网主要由平滑肌纤维构成且不存在内皮细胞

目的 证明小梁网(TM)主要由平滑肌纤维而非胶原纤维构成,且不存在内皮细胞.方法 选用家兔、SD大鼠、小鼠各3只,新鲜眼球共18只,沿矢状面对半切开眼球,石蜡包埋,常规组织切片,每个标本选取5片,分别采用HE染色、VG染色、Masson染色、α-SMA及CD31免疫组化法染色,显微镜下观察,并扫描成数字切片.将TM与巩膜胶原纤维、睫状肌(平滑肌)细胞、血管内皮细胞进行对比观察.结果 HE染色:3种动物TM呈紫红色粗丝状结构,交织成网,与睫状肌纤维胞质染色高度一致;TM表面附着的"细胞"界限不清,核扁,细长,呈深紫色,其"胞质"与TM无明显界限;睫状肌为典型的平滑肌,按不同方向成束排列,纵切的细胞呈扁平状,胞质紫红色,核扁,细长;巩膜内胶原纤维呈红色,深染;成纤维细胞少,依附于胶原纤维,其长轴与胶原纤维长轴一致,轮廓不清,核细长呈线样,深紫蓝色;血管内皮细胞胞质呈淡紫色,核深染,由于切面原因而呈不同的形状,突于腔内.VG染色:TM呈淡红色细丝状,胶原纤维呈亮红色粗条状.Masson染色:TM呈红绿相间网格状结构,其中以红色结构为主;巩膜胶原纤维呈绿色波浪状;血管内皮细胞呈绿色扁平状;睫状体的平滑肌纤维呈紫红色.α-SMA免疫组化:TM部分呈强阳性反应,胞质呈棕黄色颗粒;巩膜内胶原纤维及血管内皮细胞呈阴性;睫状体内的平滑肌纤维呈强阳性.CD31免疫组化:三种动物染色结果虽略有差异,但均为阴性.结论 TM主要由平滑肌纤维构成,外周包绕微量胶原纤维(肌内膜),不存在内皮细胞.     

Toll样受体与类风湿性关节炎的相关性及靶向防治的研究进展

类风湿性关节炎(RA)是一种常见的慢性自身免疫性疾病,可导致关节肿胀、疼痛、活动障碍等。阐明RA的发病原因及发病机制,对于RA的诊治尤为重要。研究表明,Toll样受体在RA患者关节周围的免疫细胞及滑膜细胞中的表达均有所改变,参与了RA的发生和发展,在RA的发病进程中扮演着重要作用。本文就Toll样受体的表达模式、识别配体及其与RA的相关性,以及Toll样受体靶向药物在RA中的应用作一综述,为进一步了解RA的发病机制提供参考。     

人胚胎干细胞RNA的细胞质和细胞核内的定位

目的探讨人胚胎干细胞(hESCs)中RNA细胞核和细胞质内分布信息。方法分离hESCs细胞质与细胞核后提取RNA并测序,生物信息学分析核和质中RNA定位特点,并使用RT-qPCR实验技术验证RNA的定位。结果 hESCs细胞质中RNA种类及其特异定位的RNA均多于细胞核,其中特异性定位在细胞质中的RNA有2 952个,细胞核中634个。结论描绘hESCs中RNA细胞核和细胞质定位图谱,鉴定了多个特异定位在细胞核与细胞质的RNA。     

长沙县地区门诊儿童常见上呼吸道感染病原体共感染特征

目的 分析长沙县上呼吸道感染病原谱特点,探讨该地区常见呼吸道病原体的共感染分布特征,为该地区呼吸道感染疾病的早期诊断和治疗提供可靠依据。方法 回顾性分析湖南省长沙市长沙县妇幼保健院门急诊于2022年1—6月收治的17 456例上呼吸道感染患儿(年龄<14岁)的临床资料,患儿均采集咽拭子标本,采用多重聚合酶链反应检测6种常见病原体：甲型流感病毒(Flu.A)、乙型流感病毒(Flu.B)、呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、鼻病毒(HRV)、肺炎支原体(MP),分析不同性别、年龄患儿病原体检出情况,以及单一感染率与混合感染率等感染分布特征。结果 17456例患儿病原体检出率为52.93%,主要感染病原体依次为Flu.B(24.00%)、HRV(11.41%)、Flu.A(8.41%)、RSV(6.54%)、ADV(5.20%)和MP(1.45%),混合感染率为4.02%。男童中MP与Flu.B或ADV混合感染率高于女童,差异有统计学意义(P<0.05)。随着年龄增长,Flu.B及MP检出率明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。MP、ADV感染患儿更易发生混合...     

树鼩成纤维样滑膜细胞分离鉴定及TLR8通路相关分子检测方法的建立北大核心

背景:成纤维样滑膜细胞在类风湿关节炎病变过程中发挥着重要的作用,当炎症性关节炎发生时滑膜衬里层成纤维样滑膜细胞会大量增殖,释放炎症因子能引起关节炎症和软骨的损伤。目的:建立树鼩膝关节成纤维样滑膜细胞体外分离、培养纯化及鉴定的方法,并探讨其生物学特性;建立树鼩成纤维样滑膜细胞TLR8通路相关分子的检测方法,初探TLR8通路在细胞中的活化情况。方法:利用组织块贴壁法和连续传代法分离、纯化树鼩成纤维样滑膜细胞,采用CCK-8法检测细胞增殖能力,苏木精-伊红染色观察细胞形态,免疫细胞化学染色法检测成纤维样滑膜细胞的标志性蛋白(波形蛋白)的表达。经人TLR8配体R848刺激前后,采用Western blot方法检测树鼩成纤维样滑膜细胞与人成纤维样滑膜细胞中TLR8及其信号通路蛋白的表达,采用RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳检测树鼩成纤维样滑膜细胞中TLR8通路及其下游基因mRNA的表达。结果与结论:①倒置显微镜下可见,经过3代的传代培养后,树鼩成纤维样滑膜细胞多为梭形,大小相近,纯度高,在体外生长增殖状况良好;苏木精-伊红染色显示细胞形态多呈梭形,大小相近;免疫细胞化学染色显示,成纤维样滑膜细胞胞浆波形蛋白表达阳性;CCK-8实验结果显示,树鼩成纤维样滑膜细胞生长曲线为“S”型;②Western blot检测显示,经R848刺激48 h后,树鼩成纤维样滑膜细胞中的核因子κB蛋白表达升高(P<0.05),p-P38蛋白表达降低(P<0.05),TLR8、MyD88、P38、p-Erk1/2、和RANKL蛋白表达无明显变化(P>0.05);人成纤维样滑膜细胞中的p-P38蛋白表达降低(P<0.05),TLR7、TLR8、MyD88、核因子kB、P38、p-Erk1/2和RANKL蛋白表达无明显变化(P>0.05);③RT-PCR和琼脂糖凝胶电泳检测显示,经R848刺激48 h后,树鼩成纤维样滑膜细胞中肿瘤坏死因子ɑ、白细胞介素6、干扰素β、TLR9-2、TLR9-1、TLR8-2、TLR8-1、TLR7-2、TLR7-1 mRNA表达无明显变化(P>0.05);④结果表明,采用组织贴壁法可分离树鼩成纤维样滑膜细胞,利用人来源抗体可建立树鼩成纤维样滑膜细胞TLR8通路相关分子检测方法。