显微共聚焦拉曼技术在细菌分类鉴定中的应用

拉曼光谱可以用于识别和描述微生物的特征,作为当今微生物分类鉴定研究的热点.相比于传统的微生物分离培养技术和分子生物学鉴定技术,拉曼技术具有免培养、快速和高效等优点.随着光学领域拉曼技术和分子生物学的结合发展,使得微生物的鉴定变得更加高效快捷.拉曼显微光谱结合稳定同位素探针、荧光原位杂交和光镊技术,为研究生态系统中不可培...     

雌激素受体α在动脉粥样硬化兔体内的表达

目的通过定量分析雌激素受体在动脉粥样硬化兔心脏和肝脏内的相对基因表达,研究雌激素受体基因mRNA的表达水平与动脉粥样硬化(AS)发生的关系。方法手术法去势新西兰雌兔,高胆固醇饮食法复制AS模型,以管家基因-βactin作为内源性校准基因,用SYBR Green I作为荧光染料,采用实时荧光定量逆转录聚合酶链式反应(real-time RT-PCR)对ERαmRNA的表达进行了分析。结果对照组(N)、模型组(C)和假手术组(SC)主动脉硬化斑块面积分别为0、(0.75±0.24)和(0.56±0.27),饮食法复制AS模型成功;ER在对照组兔心脏和肝脏内的相对基因拷贝数分别为0.46、0.49,在模型组的去势雌兔心脏和肝脏内的相对基因拷贝数分别为0.29、0.32,在假手术组兔心脏和肝脏内的相对表达量分别为0.53、0.51。结论兔心脏、肝脏内都有雌激素受体α分布;去势AS雌兔组织内雌激素受体表达量的减少可能与动脉硬化的形成有关。     

B型肉毒梭菌致婴儿肉毒中毒三例临床分析及实验室诊断

目的总结B型肉毒梭菌致婴儿肉毒中毒的临床特点和实验室诊断结果。方法对首都儿科研究所附属儿童医院于2018年5至11月收治的3例B型肉毒梭菌致肉毒中毒婴儿临床资料进行回顾性分析,检测患儿的粪便样品或粪便增菌液的肉毒毒素,同时从粪便样本中培养、分离肉毒梭菌。结果 3例患儿中男2例、女1例,发病年龄分别为3、3、8月龄。5月份发病2例,11月份发病1例。混合喂养2例,母乳喂养1例。家属从事肉制品加工1例。3例患儿既往均健康,均表现为急性弛缓性麻痹、颅神经受累、排粪困难等表现,2例继发泌尿系统感染,2例患儿肌电图提示运动神经动作电位波幅较同龄儿低。经过静脉注射人免疫球蛋白、呼吸道管理、排粪和(或)导尿、鼻饲等处理,3例患儿于发病2～4个月后痊愈。1例患儿的粪便稀释液以及3例患儿粪便的TPGYT增菌液和庖肉增菌培养基样品中均检测到B型肉毒毒素,培养、分离纯化后鉴定为B型肉毒梭菌。结论结合典型临床表现(急性弛缓性麻痹、颅神经受累表现、排便困难)可临床拟诊婴儿肉毒中毒,其中粪便肉毒毒素检测和肉毒梭菌的培养及分离则有助于确诊。     

一例婴儿B型肉毒中毒的实验室诊断

目的对2019年2月来自北京儿童医院1例疑似肉毒中毒的婴儿粪便样品进行实验室诊断，判定是否为肉毒毒素中毒。方法按照GB 4789.12 — 2016稀释处理样品，利用动物实验鉴定肉毒毒素、接种增菌培养基观察变化、采用卵黄培养基进行分离纯化，扩增测序16S rRNA基因并进行序列比对，采用荧光定量PCR方法进行毒素基因分型。结果粪便样本稀释后对小鼠进行腹腔注射，小鼠出现呼吸急促、腹式呼吸，并在4～6 h内死亡，呈现肉毒中毒典型症状。 在卵黄培养基平板上分离到典型肉毒梭菌，镜检观察到芽孢形态，测得的16S rRNA基因序列与GenBank中公开的肉毒梭菌16S rRNA基因序列进行比对，相似率>99%，荧光定量PCR检测显示B型毒素基因阳性，判定该婴儿为B型肉毒中毒。结论此次实验按照国家标准和本实验室建立的荧光定量PCR方法进行鉴定，检测结果和诊断方案为我国婴儿B型肉毒中毒诊断提供参考，也为分析肉毒中毒地域性提供证据，为临床鉴定婴儿B型肉毒中毒提供参考案例。