盐酸氨基乙酰丙酸介导的635/670nm联合波长下光动力学治疗的抗肿瘤效应

目的通过实时测定单态氧(singlet oxygen,1 O2)评估635nm和(或)670nm激光照射下盐酸氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)介导的光动力学治疗(photodynamic therapy,PDT)抗肿瘤效果。方法以5-ALA为光敏剂,在单波长(635nm或670nm)及联合波长(635nm+670nm)下进行激光照射,利用新型高灵敏的检测系统测定PpIX溶液、肿瘤细胞(9L神经胶质肉瘤细胞和HeLa细胞)及HeLa负瘤裸鼠中的1 O2强度,H-E染色法检测肿瘤组织坏死深度。结果接受单一的635nm或670nm波长激光照射时,PpIX溶液1 O2强度在两者中无明显区别。635nm与670nm激光联合照射下,9L细胞的1 O2强度高于HeLa细胞;在两种细胞中670nm激光诱发1 O2强度均远远低于635nm激光。在HeLa细胞裸鼠皮下移植瘤中,两种波长激光联合照射产生一定的肿瘤坏死深度,但低于635nm单波长照射。结论在5-ALA介导的PDT中,670nm波长激光显示了一定的PDT疗效。     

咽拭子检测潜伏膜蛋白1在鼻咽癌诊断中的应用

目的：验证咽拭子法检测EB病毒（EBV）潜伏膜蛋白1（LMP1）在鼻咽癌诊断中应用的可行性;检测LMP1野生型及30bp缺失变异型在鼻咽癌中的分布情况。方法：用咽拭子法收集鼻咽癌组及对照组鼻咽部脱落细胞,微量提取DNA,经PCR扩增人β珠蛋白基因序列验证咽拭子法的可行性,用特异性引物扩增出特异的LMP1序列,验证其在鼻咽癌诊断中的意义。测序分析LMP1变异情况。结果：咽拭子合格率为96．4％,LMP1基因作为鼻咽癌的检测指标,灵敏度为91．7％,特异性为95．6％,其中变异型LMP1在鼻咽癌中的表达频率为80．6％,野生型为11．1％。结论：咽拭子法可作为一种基因检测手段,LMP1基因的检测可以协同EB病毒壳抗原（EBVCA）-IgA作为鼻咽癌诊断的辅助指标,在LMP1（＋）的鼻咽癌患者中LMP1—30bp缺失突变普遍存在。     

自制鼻窦盥洗针头在鼻内镜鼻窦术后随访的应用

目的探讨自制鼻腔-鼻窦冲洗器械在鼻内镜鼻窦手术后的应用。方法 146例慢性鼻窦炎患者,完成鼻内镜鼻窦手术以后,应用自制鼻腔-鼻窦冲洗器械经开放的鼻窦开口进行鼻窦盥洗,盥洗后鼻内镜检查术腔情况,术腔喷鼻用皮质激素,经6个月以上系统随访。观察患者术腔及术后预后情况。结果鼻窦术腔上皮化时间约1个月。预后情况:治愈123例,好转19例,有效率97.3%。结论自制鼻腔-鼻窦冲洗器械可以及时准确去除鼻内分泌物及痂皮,促进鼻窦术腔上皮化,患者预后良好。     

鼻咽癌病人血清抗重组EB病毒Zta抗原IgG抗体检测

目的:用免疫印迹法检测鼻咽癌病人血清中抗EB病毒Zta-IgG抗体.方法:利用含EB病毒BZLFl基因完整开放读框的pGEX2TK-ZcDNA质粒转染大肠杆菌,诱导产生并提纯重组基因产物GST-Zta,以GST-Zta作为抗原,用免疫印迹法检测24例鼻咽癌病人血清中Zta-IgG抗体,28例正常人血清作为对照.结果:鼻咽癌组血清中91.7%Zta-IgG阳性,对照组中10.7%Zta-IgG阳性,两组差异有统计学意义(P=0.000).结论:免疫印迹法检测鼻咽癌病人血清中Zta-IgG抗体有较高的敏感性和特异性,可能可以作为鼻咽癌病人诊断筛选的指标.     

鼻咽癌病人外周血树突状细胞的表型及功能检测

目的:观察鼻咽癌病人树突状细胞(DC)经体外分离诱导分化后表型变化和呈递功能的情况.方法:在体外分离并诱导成熟HLA-A2基因型鼻咽癌病人自身的DC,运用流式细胞仪检测DC的表型变化,然后分别负载EB病毒抗原LMP-2的HLA-A2限制型两个表位肽段CLGGLLTMV(CLG)和LTAGFIFL(LTA),诱导自身的CD8 T细胞.培养两周后,运用酶联免疫斑点法(ELISPOT)检测经DC诱导后CD8 T细胞的免疫应答情况.结果:分离鼻咽癌患者外周血DC,培养7 d后用流式细胞仪检测DC的各项表型:CD80、CD86、CD83、HLA-DR等,呈现分化成熟的表型特征.上述各种表型的细胞百分率分别为(33.92±21.42)%、(90.20±12.10)%、(32.89±23.47)%、(90.37±12.82)%, 并且与正常人的DC的表达无明显差异.培养成熟的DC呈递肽段CLG及LTA给自身CD8 T细胞,T细胞识别肽段并能应答的细胞数增加,呈递前分别为(2.67±1.97)2×104CD8 T细胞和(5.33±1.86)2×104CD8 T细胞,呈递后为(42.67±33.79)2×104CD8 T细胞和(25.67±18.25)2×104 CD8 T细胞,呈递前、后比较差异有统计学意义(P＜0.05).同时与正常T细胞的应答能力无明显差别.结论:鼻咽癌病人外周血DC可经外周血分离培养,诱导扩增后能分化成熟并能有效呈递肿瘤抗原肽段,产生特异性CTL,对鼻咽癌病人的免疫治疗具有潜在的应用价值.     

5-ALA-PDT对鼻咽癌CNE2细胞的杀伤性研究

目的：探讨光动力学疗法在鼻咽癌治疗中的可行性，摸索5-氨基酮戊酸（5-ALA）-PDT对鼻咽癌CNE2细胞系杀伤的最适作用条件，为今后的临床应用奠定基础。     

Foley管在鼻内镜手术中的应用

鼻内镜手术过程中术野清晰和出血量少是鼻内镜手术成功的重要环节[1-5]。柳州市人民医院耳鼻咽喉科2004年6月～2010年12月应用Foley管对146例慢性鼻窦炎患者实施鼻内镜手术,发现该技术对于保持术野清晰及减少术中出血有较好帮助,