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目的 双向筛选抗单纯疱疹病毒1型(HSV-1)或促进HSV-1在肿瘤细胞内复制的小分子活性药物,为抗病毒药物研发或溶瘤病毒联合疗法奠定研究基础。方法 通过PCR扩增、产物测序对供试病毒HSV-1 F株进行鉴定;采用TCID50法测定HSV-1滴度;建立病毒核酸实时荧光定量PCR检测体系;通过细胞增殖抑制实验和实时荧光定量PCR检测体系筛选具有促进HSV-1在LN229细胞内复制活性的化合物;通过流式细胞术和病毒空斑减数实验筛选具有抗HSV-1的化合物。结果 PCR扩增、产物测序结果确定供试病毒为HSV-1 F株;成功建立病毒核酸实时荧光定量PCR检测体系,灵敏度高;化合物佛司可林(FOR)可协同HSV-1抑制LN229细胞的增殖,并促进HSV-1复制相关基因ICP4、UL12和Us6的表达;化合物盐酸石蒜碱(LYC)可抑制HSV-1诱导的细胞凋亡,并减少HSV-1病毒形成空斑数、缩小空斑大小。结论 FOR具有促进HSV-1复制相关基因在肿瘤细胞中表达的活性,有望成为HSV-1溶瘤联合治疗的候选药物;LYC可降低HSV-1诱导的细胞凋亡率,减少病毒空斑数,具有潜在的... 相似文献
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目的 利用网络药理学联合分子对接的方法探讨异莲心碱治疗人Burkitt淋巴瘤的潜在分子机制。方法 将PharmMapper与Swiss TargetPrediction数据库用于预测异莲心碱的药物作用靶点,通过人类基因数据库GeneCards和在线人类孟德尔遗传数据库（OMIM）查询人Burkitt淋巴瘤的疾病靶点,整合两组数据绘制韦恩图、获得异莲心碱治疗人Burkitt淋巴瘤的靶标蛋白;利用蛋白相互作用数据库（STRING）及Cytoscape3.9.0软件构建靶标蛋白的蛋白相互作用网络（PPI）;运用注释、可视化和集成发现的数据库（DAVID）进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）富集分析;采用AutoDock Vina软件将异莲心碱与预测的靶标蛋白进行分子对接验证,并利用Pymol软件进行可视化处理。结果 筛选获得异莲心碱作用于Burkitt淋巴瘤有49个预测靶点,PPI网络分析显示其核心靶点包括SRC、EGFR、MDM2、MTOR、PIK3CA、XIAP、RAF1、MAPK8/14等,GO富集分析显示其作用主要涉及细胞信号转导、凋亡调控、蛋白结合、蛋白激酶活... 相似文献
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目的:探讨α-苦瓜素(α-MMC)对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞的增殖抑制作用及通过激活细胞信号传导通路调控细胞凋亡的分子机制。方法:通过CCK-8法检测α-MMC对HSC-3细胞的增殖抑制作用;利用PI、Annexin V-FITC/PI、JC-1染色及流式细胞术测定α-MMC对HSC-3细胞周期、凋亡、线粒体膜电位的影响;通过蛋白免疫印迹技术判断α-MMC作用后,HSC-3细胞凋亡相关蛋白及信号通路蛋白的表达情况。结果:CCK-8分析结果显示,α-MMC以药物浓度和时间梯度依赖的方式抑制HSC-3细胞增殖,其24 h和48 h的IC50值分别为50.38μg/mL和20.17μg/mL;流式细胞术检测发现,α-MMC阻滞HSC-3细胞周期于G2/M期,降低细胞线粒体膜电位,诱导细胞凋亡;蛋白免疫印迹结果显示,α-MMC上调促凋亡蛋白Bim表达,下调抗凋亡蛋白Mcl-1的表达;激活JNK信号通路,即上调p-MKK4、p-JNK、p-c-Jun的表达水平。结论:α-MMC对口腔鳞状细胞癌HSC-3细胞具有增殖抑制作用,其机制可能是α-MMC激活JNK信号通路触发细胞周期阻滞,并通过线粒... 相似文献
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