兔血清高密度脂蛋白载脂蛋白A-I的制备

免血清先经硫酸右旋醣酐沉淀、浓缩HDL,然后再超速离心分离HDL,经脱脂后再进行大柱床体积Sepha-dex G-150凝胶柱层析,较大批量地分离apoA-I,一次可获碍纯品数百毫克,经鉴定为apoA-I.可满足实验室或临床对apoA-I大量使用的需要。     

肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体的克隆、表达及重新折叠

目的 :人的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TNF relatedapoptosisinducingligand ,TRAIL)基因经扩增后 ,克隆在大肠杆菌中表达并重新折叠并获得有活性的TRAIL蛋白。方法 :用PCR的方法从人胎盘cDNA文库中扩增TRAIL基因 ,经序列分析鉴定 ,再克隆到原核表达载体 pET11a ,经E .coliBL2 1(DE3)表达 ,电泳鉴定后 ,柱层析纯化 ,重新折叠 ,流式细胞术等方法检测其促凋亡活性。结果 :得到了TRAIL基因 ,并构建了可在大肠杆菌中表达的载体 pET11 TRAIL1(含TRAILcDNA序列 418 933)及可在真核细胞中表达的载体pLNCX TRAIL2 (含TRAILcDNA序列 88 933)。取前者在E .coliBL2 1(DE3)中表达 ,经纯化 ,重新折叠得到了复性的TRAIL蛋白。检测其对人白血病细胞株Jurkat有诱导凋亡的作用。结论 :从人胎盘cDNA文库中扩增TRAIL基因 ,在大肠杆菌中表达、重新折叠、纯化后 ,经检测得到了有活性的TRAIL蛋白     

高密度脂蛋白及载脂蛋白A_1防止实验性动脉粥样硬化斑块形成

根据临床流行病学调查和实验研究,已明确高密度脂蛋白(HDL)和缺血性心脏病(动脉粥样硬化)的发病率呈负相关。动脉粥样硬化的发生和血清HDL-胆固醇的量降低有密切关系,HDL是一保护因子,可防止动脉粥样斑块形成。HDL是一种脂质和蛋白的复合体,组成它的主要载脂蛋白有apoA_1, A_2,A_4,apoB,apoC和apoE等,其中以apoA_1所占的比例最大,约为65％。体外细胞实验表明,HDL抑制低密度脂蛋白(动脉粥样硬化的主要致病因子)穿过动脉内膜,并抑制内皮细胞和LDL结合