lncRNA DNM3OS在喉鳞状细胞癌组织和细胞中的表达及其临床和生 物学意义

目的：检测lncRNA DNM3OS在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织和LSCC细胞株中的表达及其临床意义,探讨其对LSCC TU177细胞体外增殖、迁移及侵袭的影响,并分析DNM3OS与EMT的关系。方法：从河北医科大学第四医院生物标本库选取2014年3月至2018年12月收治的68例LSCC患者手术切除的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测DNM3OS在LSCC组织和细胞株中的表达水平。采用siRNA敲低TU177细胞中DNM3OS的表达,应用MTS、克隆形成及Transwell小室等方法分别检测敲低DNM3OS表达对TU177细胞增殖、迁移和侵袭等生物学行为的影响。应用qPCR和WB法检测转染si-DNM3OS后对EMT标志物上皮钙黏素（E-cadherin）、神经钙黏素（N-cadherin）、波形蛋白（vimentin）、扭曲蛋白（twist）、锌指转录因子2（SNAI2）mRNA和蛋白的变化。结果：LSCC组织中DNM3OS表达水平明显高于癌旁组织（P<0.01）,并与患者的TNM分期、淋巴结转移及生存期有关联（P<0.05 或 P<0.01）。DNM3OS在LSCC细胞株（Hep-2、AMC-HN-8、TU177、TU212及TU686）中均呈现不同程度的高表达（P<0.05 或 P<0.01）,转染si-DNM3OS后TU177细胞中DNM3OS的表达显著降低（P<0.01）。与对照组相比,DNM3OS表达敲低可抑制TU177细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力（P<0.05 或 P<0.01）,可上调 TU177 细胞中E-cadherin的表达而下调 N-cadherin、vimentin、twist和SNAI2的表达（均P<0.01）。结论：DNM3OS高表达与LSCC的恶性进展有关,其可能为预测LSCC患者预后的潜在指标;DNM3OS可能通过影响EMT进程促进LSCC细胞的侵袭和转移。     

Mohs外科技术联合皮瓣修复技术治疗头颈颌面部皮肤恶性肿瘤的近期疗效观察

目的:分析Mohs外科技术与皮瓣修复技术联合用于头颈颌面部皮肤恶性肿瘤治疗的价值。方法:选择2014年7月至2018年7月收治的头颈颌面部皮肤恶性肿瘤200例患者作为研究对象,随机将其分为对照组、研究组,各100例。全部患者修复方式均采用皮瓣修复技术,对照组外科切除采用传统切除方式,研究组患者则采用Mohs外科技术,手术结束后随访时间为1年。比较两组患者手术切除情况,包括病理复检切缘残留肿瘤率、随访结束时复发率;记录并比较两组患者创面最长径、创面愈合时间;记录并比较两组术后短期切口裂开、继发畸形、皮瓣坏死等并发症发生情况;设计外观满意度调查问卷,调查并比较两组患者对术后颌面部外观满意度。结果:研究组患者病理检查切缘残留肿瘤率、随访结束时复发率均低于对照组,差异有统计学意义（P＜0.05）;研究组创面最长径小于对照组（P＜0.05）,创面愈合时间与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;研究组术后切口裂开与对照组比较无统计学差异（P＞0.05）,继发畸形发生率比对照组低,差异有统计学意义（P＜0.05）;组间皮瓣坏死发生率比较差异无统计学意义（P＞0.05）;研究组患者术后外观满意率（82.00%）高于对照组（60.00%）,差异有统计学意义（P＜0.05）。结论:Mohs外科技术与皮瓣修复术联合治疗头颈颌面部皮肤恶性肿瘤,较传统切除术患者术后创面小、切缘残留肿瘤情况少,复发率大大降低,继发畸形少,患者对外观满意度高,治疗效果及安全性均理想,值得推广应用。     

后纵隔甲状腺肿物经颈部切口切除及手术适应证的探讨

目的:探讨经颈部切口切除后纵隔甲状腺肿物的可能性。方法:根据甲状腺肿物坠入后纵隔的形成机制以及甲状腺和纵隔的手术解剖,设计手术原则:①自上而下的手术原则;②自喉返神经入喉处寻找并解剖喉返神经,找到喉返神经后,尽量长的解剖喉返神经保护之,避免术中损伤,同时可沿喉返神经寻找甲状腺血管;③为避免手术中出现不可控制的大出血,在手术进入胸腔以前,必须处理结扎甲状腺在颈部所有正常或变异的血管,避免对胸部大血管的牵拉;④在外科被膜下,钝性分离胸部肿物,大多可避免损伤重要结构;⑤当胸部肿物与周围结构粘连不易分离时,请胸外科医师协助解决困难。结果:2例手术成功实施,效果满意,对患者创伤小,恢复快,医疗费用低。结论:经颈部切除后纵隔甲状腺肿物是一理想的手术方法,但有其适应证:①影像学资料提示后纵隔肿物与周围结构无粘连;②不伴有上腔静脉压迫体征;③巨大后纵隔甲状腺肿物,可采取取出肿物部分中央组织(对中央组织液化者尤其适用),缩小肿物,然后自颈部取出,如若困难不能取出,则请胸外科医师开胸帮助解决。     

SNORA73B高表达对喉鳞癌干细胞样特征的影响

目的:以小核仁RNA73B(small nucleolar RNA 73B,SNORA73B)在喉鳞癌(laryngeal squamous cell carcinoma, LSCC)中高表达及其临床意义为切入点,探讨SNORA73B可能通过维持干细胞特征,从而促进LSCC细胞的增殖、迁移和侵袭。方法:qPCR检测LSCC组织和细胞中SNORA73B的表达情况;体外培养细胞,MTS、划痕愈合、Transwell实验分别检测SNORA73B敲低或过表达对细胞增殖、迁移和侵袭的影响;肿瘤细胞球形成实验,检测SNORA73B对LSCC细胞干性样特征的影响。结果:qPCR检测结果显示,SNORA73B在LSCC组织和细胞中表达显著高于相应癌旁组织和细胞对照组(均P<0.05),且与患者病理分级、淋巴结转移和不良预后有关(P<0.05)。过表达SNORA73B的Tu177细胞增殖、划痕愈合、迁移和侵袭能力明显增强(均P<0.05);而干扰SNORA73B后细胞增殖、划痕愈合、迁移和侵袭能力明显降低(均P<0.05)。在诱导LSCC干细胞样特性的喉癌球细胞形成后,肿瘤干细胞...     

喉鳞状细胞癌中hMLH1和hMSH2的表达及与细胞凋亡的相关性

目的检测人类错配修复基因hMLH1（human mutl homolog 1）和hMSH2（human muts homolog 2）蛋白在喉鳞状细胞癌（简称喉癌）组织中的表达及与细胞凋亡的相关性,从而探讨其与喉癌发生发展的关系。方法应用免疫组织化学方法检测40例喉癌组织、19例癌旁组织和12例非癌喉黏膜组织（声带息肉、乳头状瘤患者喉黏膜）中hMLH1和hMSH2的表达情况。应用流式细胞术的方法定量检测40例喉癌组织、40例癌旁组织和15例非癌喉黏膜组织中hMLH1和hMSH2的含量并检测其凋亡率。结果 hMLH1和hMSH2蛋白在喉癌组织中的定量及定性表达均明显低于癌旁组织及非癌喉黏膜组织,两者在喉癌组织中的表达与淋巴结转移、临床分期、病理分级有相关性,喉癌组织细胞凋亡率与hMLH1和hMSH2蛋白表达均呈直线正相关。结论 hMLH1和hMSH2蛋白可能与喉癌的发生、发展及转移有关,可能通过促进细胞凋亡而与抑制肿瘤发生发展有关。     

前哨淋巴结活检在甲状腺乳头状癌中研究现状

甲状腺乳头状癌(Papillary Thyroid Carcinoma,PTC)作为甲状腺癌最常见的类型,已跃居我国女性恶性肿瘤发病率第3名.其具有恶性度低,易转移的特性.通过手术治疗,大多数PTC患者可以有较好的预后效果.但是对于术前临床检查淋巴结转移阴性(Cn0)的PTC患者,是否常规行颈部淋巴结清扫仍存在较大争议...     

转录因子FOXP4在喉鳞状细胞癌组织中的表达及其对喉鳞癌TU177细 胞生物学特性的影响

目的：检测转录因子FOXP4（Forkhead box P4）在喉鳞状细胞癌（laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC）组织和细 胞系中的表达,及其对LSCC细胞TU177体外增殖、迁移、侵袭、细胞周期及凋亡的影响,并探讨其与上皮-间质转化（epithelialmesenchymal transition,EMT）进程间的关系。方法：从河北医科大学第四医院生物标本库选取2013年6月至2015年12月收治 的40例LSCC手术患者的癌及癌旁组织标本,应用qPCR法检测FOXP4在LSCC与相应癌旁组织中的表达水平,应用qPCR法和 Western blotting检测FOXP4在人 LSCC 细胞系（AMC-HN-8、TU177、TU686 及 TU212）中的表达水平。采用小干扰 RNA 敲 低 TU177 细胞中 FOXP4 的表达,MTS 实验、克隆形成实验、Transwell 实验及流式细胞术分别检测 FOXP4 敲低对 TU177 细胞增殖、迁移、侵袭、周期及凋亡的影响。应用qPCR法检测si-FOXP4转染TU177细胞后EMT标志物 N-钙黏蛋白（N-cadherin）、 β-连环蛋白（β-catenin）、波形蛋白（Vimentin）、扭曲蛋白（Twist）、转录因子Snail及锌指E盒结合蛋白1（zine finger E box binding homeobox 1,ZEB1）mRNA的变化情况,应用Western blotting测定FOXP4敲低后N-cadherin、 β-catenin、Vimentin及Twist 蛋白水平的改变。结果： 在LSCC组织中FOXP4的表达水平明显高于癌旁组织（P<0.05）,且与肿瘤的TNM分期及淋巴结转移 相关（均P<0.05）。FOXP4在LSCC细胞中的表达亦高于癌旁组织（P<0.05或P<0.01）。转染si-FOXP4的 TU177 细胞中 FOXP4 的表达显著低于对照组（P<0.01）。与对照组相比,敲低FOXP4可抑制TU177细胞的体外增殖、迁移和侵袭能力（均 P<0.01）, 敲低 FOXP4 可使细胞周期阻滞于G0/G1期（P<0.01）,减少S期的复制（P<0.01）,促进细胞凋亡（P<0.01）,敲低FOXP4可降低 TU177细胞中N-cadherin、 β-catenin、Vimentin、Twist、Snail、ZEB1 的 mRNA水平（P<0.05或P<0.01）以及N-cadherin、 β-catenin、 Vimentin、Twist的蛋白水平。结论：FOXP4的高表达可能与LSCC的发生和发展相关,FOXP4敲低可以抑制LSCC细胞的体外 增殖、迁移与侵袭能力,使细胞G0/G1期阻滞及促进凋亡,且可能参与EMT进程。     

影像学评估结合纳米碳在甲状腺癌淋巴结处理中的作用

目的：探讨术前影像学评估结合术中应用纳米碳在甲状腺癌淋巴结处理中的作用。方法：收集81例初治的甲状腺癌患者的临床资料,分为实验组（42例）和对照组（39例）。根据术前彩超结合增强CT评估及病理检查结果,分别行中央区清扫及择区性Ⅲ、Ⅳ区清扫或侧颈区清扫。实验组在甲状腺注入纳米碳,分别计数3种清扫方式的淋巴结总数、转移数、黑染数及黑染转移数,对照组分别计数3种清扫方式的淋巴结总数、转移数;检查2组甲状腺及中央区清扫标本中有无甲状旁腺。结果：实验组中央区及Ⅲ、Ⅳ区和侧颈区清扫标本淋巴结黑染率分别为80.0%、54.9%及39.1%。在中央区清扫标本中,对照组、实验组平均每侧检出的淋巴结数为（3.03±2.07）枚、（4.72±2.97）枚,差异有统计学意义（P〈0.01）;在Ⅲ、Ⅳ区清扫标本中,对照组、实验组平均每侧检出的淋巴结数为（5.53±3.78）枚、（10.29±3.36）枚,差异有统计学意义（P〈0.01）;在侧颈区清扫标本中,对照组、实验组平均每侧检出的淋巴结数为（13.40±9.67）枚、（14.56±6.28）枚,差异无统计学意义（P〉0.05）。3种清扫方式平均每侧检出的转移淋巴结数实验组和对照组比较均差异无统计学意义（均P〉0.05）。实验组68侧甲状腺或中央区清扫标本中有3侧检出甲状旁腺,对照组60侧甲状腺或中央区清扫标本中有9侧检出甲状旁腺,2组比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论：纳米碳在中央区清扫及侧颈区cN0者行择区性Ⅲ、Ⅳ区清扫时可以较好地标记淋巴结,提高了淋巴结检出率;侧颈区cN＋者,纳米碳没有提高淋巴结的检出率。纳米碳在甲状腺腺叶切除及中央区清扫时可以有效区别和保护甲状旁腺。     

喉上神经外侧支的解剖及临床应用

喉上神经发自迷走神经的结状神经节,并分为内、外两支。喉上神经外侧支损伤是甲状腺外科手术中常见的并发症之一,目前对于手术时如何保护喉上神经外侧支尚存争议。本文对近些年文献关于喉上神经外侧支的基础解剖和术中保护喉上神经的技术方法进行综述,以期加深对喉上神经外侧支解剖和保护的认识。     

彩超结合CT分区评估甲状腺乳头状癌淋巴结转移的探讨＊

目的：探讨术前彩超结合增强CT分区评估甲状腺乳头状癌淋巴结转移的价值。方法：收集术前行颈部彩超同时行颈部、纵隔薄层增强CT检查的115例（141侧）甲状腺乳头状癌的临床资料,分为彩超组、CT组及彩超结合CT组分析比较三组在评估不同区域甲状腺乳头状癌淋巴结转移中的作用。结果：评估颈中央区淋巴结转移,彩超、CT及彩超结合CT三组的准确率分别是61．0％,48．9％,62．4％;评估颈侧区淋巴结转移,彩超、CT及彩超结合CT三组的准确率分别是87．9％,78．7％,85．8％。彩超在颈中央区（P〈0．05）及颈侧区（P〈0．05）评估淋巴结转移的准确率均高于CT。彩超结合CT检查在颈中央区的准确率高于CT（P〈0．05）,而在颈侧区的准确率与CT比较差异无统计学意义（P〉O．05）。无论在颈中央区（P〉0．05）或在颈侧区（P〉0．05）,彩超与两者联合检查的准确率比较无统计学差异。术前CT考虑6例纵隔转移及1例咽旁间隙转移,术后病理证实均为淋巴结转移。纵隔增强CT扫描发现5例患者肺部转移。结论：彩超结合CT或单一彩超评估颈中央区及颈侧区甲状腺乳头状癌淋巴结转移的准确性要高于CT。CT可以评估纵隔等彩超探及不到的区域淋巴结转移,同时对肺部转移进行评估。彩超结合增强CT应用于甲状腺乳头状癌淋巴结的评估,较单一检查更加精确、全面。