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目的从蛋白激酶C(PKC)信号通路角度,探讨游离脂肪酸(FFA)引起肝脏胰岛素抵抗(IR)的可能机制。方法培养HepG2细胞,同时设立对照组、软脂酸(PA)组、高胰岛素组。软脂酸组、高胰岛素组分别用250μmol/L PA、5×10-7mol/L胰岛素处理24h。然后对照组、软脂酸组再根据胰岛素刺激前加( )与不加(-)PKC抑制剂白屈菜红碱盐酸盐(chelerythrine chloride,CC)5μmol/L预处理1h,随机分为两亚组:对照组(-)、对照组( )、PA组(-)、PA组( )。葡萄糖氧化酶法测定胰岛素刺激后12h葡萄糖消耗量,蒽酮法测定胰岛素刺激后3h点细胞内糖原含量,Western blotting技术检测15min点细胞内P-Ser473PKB、P-Ser21/9GSK-3α/β水平。结果PA组(-)与高胰岛素组葡萄糖消耗量无统计学差异(P=0.523)。葡萄糖消耗量、细胞内糖原含量、P-Ser473PKB、P-Ser21GSK-3α、P-Ser9GSK-3β水平均显示,PA组(-)与对照组(-)比较显著降低(P值依次为0.000,0.000,0.004,0.004,0.028),对照组( )与对照组(-)比较略有升高但无显著性差异;PA组( )与PA组(-)比较显著升高(P值依次为0.000,0.014,0.043,0.041,0.035)。结论PA(250μmol/L)体外成功诱导了HepG2细胞产生IR,PKC信号通路在FFA引起肝脏IR中起着重要作用。 相似文献
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用Eco RⅠ和HindⅢ双酶切PWR590-1,所得湖北株HPV16E7片段克隆入真核表达载体pcd3.1^-,构建了湖北株HPV16E7基因疫苗,皮下注射BALB/c近交系小鼠,体外应用酶联免疫吸附实验(Elisa)法和MTT法分别检测了湖北株HPV16E7基因疫苗在体内产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。 相似文献
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槲皮素对胃癌MGC-803细胞生长及凋亡作用的研究 总被引:2,自引:0,他引:2
目的研究槲皮素对人胃癌MGC-803细胞增殖的影响及诱导凋亡作用。方法用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法检测不同浓度槲皮素对MGC-803细胞的增殖活性的效应;原位末端核苷标记(TUNEL)法检测槲皮素诱导细胞凋亡的凋亡指数(AI)。结果槲皮素浓度为40~100μmol/L时对MGC-803细胞增殖有显著的抑制效应,且呈剂量依赖性;细胞加入槲皮素诱导48h后AI明显高于未加入组(P<0.05)。结论槲皮素在一定浓度范围内能显著抑制MGC-803细胞的增殖并能诱导其凋亡,其作用呈浓度依赖性。 相似文献
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人脑胶质瘤金属硫蛋白表达及其意义 总被引:1,自引:0,他引:1
目的 为研究金属硫蛋白(MT)在人脑各级胶质瘤中表达及生物学意义。方法 利用免疫组化方法检测46例胶质瘤手术标本中金属硫蛋白及Ki-67的表达水平,比较MT的表达与胶质瘤级别、患者预后的关系及其与Ki-67相关性。结果 随着胶质瘤级别的增高,MT和Ki-67的表达率逐渐升高。MT在脑胶质瘤中的表达率分别为Ⅰ级33.3%,Ⅱ级42.9%,Ⅲ级66.7%,Ⅳ级81.8%,低恶性度组(Ⅰ~Ⅱ)与高恶性度组(Ⅲ~Ⅳ)胶质瘤中MT的表达有显著性差异(P<0.05)。胶质瘤中的MT LI与Ki-67 LI呈正相关性(r=0.832.)。结论 MT在胶质瘤的生长中扮演重要角色,其在胶质瘤中的不同表达对判断胶质瘤的病理分级、患者预后及显示胶质瘤的恶性演进具有一定的意义。 相似文献
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目的 探讨花生四烯酸(AA)对软脂酸(PA)引起HepG2细胞胰岛素抵抗的预防作用及其可能机制.方法 培养HepG2细胞,设立对照组(control组)、软脂酸组(PA组)、软脂酸+花生四烯酸组(PA+AA组)、高胰岛素组(HI组).PA组、PA+AA组、HI组分别用250μM PA、250μM PA加20μM AA,5×10-7 M胰岛素孵育24 h.然后葡萄糖氧化酶法测定各组胰岛素刺激后12 h点葡萄糖消耗量,蒽酮法测定胰岛素刺激后3 h点细胞内糖原含量,Western-blotting技术检测15 min点胞内P-Ser473 PKB、P-Ser21/9 GSK-3α/β水平.结果 葡萄糖消耗量PA组与HI组比较差异无统计学意义(P=0.594).葡萄糖消耗量、细胞内糖原含量、P-Ser473 PKB、P-Ser21GSK-3α、P-Ser9 GSK-3β水平均显示,PA组与control组比较显著降低(P<0.05),PA+AA组与PA组比较显著升高(P<0.05).结论 AA(20μM)能显著预防PA引起的HepG2细胞胰岛素抵抗,能在PKB、GSK-3水平上显著维持250μM软脂酸孵育HepG2细胞的胰岛素信号传递. 相似文献
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黄连素,传统的治疗肠道感染药物,近年来又发现其有明显的抗肿瘤活性,本文即综述其抗肿瘤作用的研究进展。 相似文献
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用 Eco R 和 Hind 双酶切 PWR5 90 -1,所得湖北株 HPV1 6 E7片段克隆入真核表达载体 pcd3.1- ,构建了湖北株HPV1 6 E7基因疫苗 ,皮下注射 BALB/c近交系小鼠 ,体外应用酶联免疫吸附实验 ( Elisa)法和 MTT法分别检测了湖北株 HPV1 6 E7基因疫苗在体内产生特异性体液免疫和细胞免疫的能力。 相似文献
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目的观察人脑胶质瘤U251细胞系中hMLHl、hMSH2基因启动子区的甲基化状态及其在肿瘤发生中的作用。方法采用甲基化特异性聚合酶链反应(MSP)法对人脑胶质瘤U251细胞系的hMLHl、hMSH2基因启动子CpG岛甲基化进行检测;培养人脑胶质瘤U251细胞系,MSP法检测加入5-aza-2’-deoxycytidine前后hMSH2基因在人脑胶质瘤U251细胞中的甲基化状态改变;逆转录.聚合酶链反应(RT-PCR)法检测加入5-aga-2’-deoxycytidine前后hMSH2在人脑胶质瘤U251细胞中的mRNA表达改变。结果人脑胶质瘤U251细胞中未发生hMLHl启动子甲基化,而发生了hMSH2启动子甲基化;5-aza-2’-deoxycytidine处理细胞株后,可逆转hMSH2启动子甲基化,细胞株的mRNA表达增加,加药前后的平均灰度比值分别为(0.40±0.18;0.85±0.32,P〈0.01),差异有统计学意义。结论人脑胶质瘤U251细胞系中hMSH2基因启动子CpG岛高甲基化,5-aza.2’-deoxycytidine能完全逆转hMSH2基因高甲基化状态,可为临床诊断人脑胶质瘤提供新的检测指标和治疗靶点。 相似文献
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人乳头瘤病毒(human papillomavims,HPV)是一种小DNA病毒,多种恶性肿瘤的发生与HPV感染有关,尤其是宫颈癌。目前通过分子生物学方法获得的HPV疫苗依其作用效果可分为三大类:以体液免疫为主的预防性疫苗、以细胞免疫为主的治疗性疫苗及兼具体液免疫和细胞免疫的预防性兼治疗性疫苗。 相似文献