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1.
目的:构建一种可以在哺乳动物细胞中蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的受控型转基因载体,为制备受控型蜕皮激素诱导表达截短型MGF-Ⅰ的转基因小鼠奠定基础。方法:利用分子克隆技术构建受控型蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的转基因载体;将其电转至AM1菌中,利用其中的Cre重组酶将载体上两个同向LoxP序更锚定的新霉素(neomycin)基因删除,解除其对蜕皮激素诱导表达系统的阻断作用,利用PCR、酶切和测序鉴定删除情况;将重组后的载体转染至COS7细胞中进行瞬间表达,蜕皮激素诱导后回收培养上清和细胞裂解物进行Western印迹分析,检测hIGF-Ⅰ的表达情况。结果和结论:成功构建大小为13.6kb的转基因载体pOE-IGF-Ⅰ;转化至AM1中后,PCR、酶切和测序的结果都证明其中的Cre酶能够将载体上neomycin基因删除;重组后的载体转染至COS7细胞中进行诱导表达,Western印迹实验证明截短型MGF-Ⅰ能够在COS7细胞中顺利表达。上述结果证明该蜕皮激素诱导表达截短型hIGF-Ⅰ的受控型转基因载体能够用于转基因小鼠的制备。 相似文献
2.
3.
秦星坡 《中国公共卫生管理》1986,(4)
<正> 年度工作总结,对于各级卫生防疫站来说,都是一项必不可少的重要工作。唯通过总结,才能系统衡量与评价一年工作的全面情况,了解与掌握各项业务工作完成的质量、进程以及自身建设的发展水平,找出差距,发现问题,产生反馈性的信息,并依此确定新的目标与措施,纳入下一年度工作循 相似文献
4.
5.
目的:观察辛伐他汀对骨髓源性平滑肌祖细胞(SPC )分化及增殖的影响,筛选新一代包被洗脱支架药物。方法:采用密度梯度离心法从大鼠骨髓获取单个核细胞,接种于纤维连接素包被的培养板,培养8d后,以平滑肌肌动蛋白(α-SM A )免疫荧光染色鉴定骨髓源性SPC ,并在倒置荧光显微镜下计数。收集培养8d单个核细胞、贴壁细胞,分别加入不同浓度辛伐他汀(0.01-10μmol/L )培养8d、24h。分别采用氚标记胸苷(3 H-TdR)摄入法、改良的Boyden小室和黏附能力测定实验观察SPC的分化、增殖、迁移和黏附能力。结果:与对照组(无辛伐他汀干预)相比,0.01μmol/L辛伐他汀显著抑制骨髓单个核细胞向SPC分化[(85±4)个比(79±5)个]、增殖[(4070±184)个比(3833±126)个]、迁移[(44±3)个比(39±3)个]和黏附[(59±5)个比(52±4)个], P均<0.05,且随辛伐他汀浓度增加S PC数量显著减少( P<0.01)。结论:辛伐他汀可抑制骨髓源性平滑肌祖细胞分化、增殖、迁移及黏附能力。 相似文献
6.
7.
8.
目的:探讨三七总皂苷(Panax notoginseng saponins, PNS)通过调控巨噬细胞对乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭迁移的影响。方法:培养MDA-MB-231和Raw264.7细胞,给予不同浓度PNS,采用MTT与流式细胞术(Flow Cytometry, FCM)分别检测不同浓度PNS对MDA-MB-231与巨噬细胞Raw264.7增殖与凋亡的影响;划痕实验检测不同浓度PNS处理的Raw264.7细胞的条件培养基对乳腺癌细胞MDA-MB-231迁移的影响;Transwell实验检测不同浓度PNS与巨噬细胞共同作用对乳腺癌细胞MDA-MB-231侵袭的影响;ELISA与流式细胞术检测不同浓度PNS对巨噬细胞相关细胞因子分泌及蛋白表达的影响。结果:PNS可以剂量依赖性地抑制MDA-MB-231与Raw264.7细胞的增殖,高浓度PNS溶液可以显著增加细胞凋亡;低浓度(20,50μg·mL-1)PNS巨噬细胞条件培养基可以抑制MDA-MB-231的迁移;低浓度(20,50μg·mL-1)PNS与巨噬细胞共培养可以明显抑制MD... 相似文献
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10.
[摘要]目的探讨胸腺素α1对支气管肺癌化疗患者免疫功能的影响。方法支气管肺癌患者31例,随机分为治疗组16例和对照组15例。治疗组在化疗同时给予胸腺素α1 1.6 mg,每周3次,皮下注射;对照组仅化疗。两组化疗方案相同,在化疗前及第3次化疗前分别抽血检测CD+3、CD+4、CD+8和自然杀伤(NK)细胞。结果治疗组CD+3、CD+4、CD+8和NK值均有所升高,其中CD+4升高明显(P<0.05);对照组CD+4、CD+4 /CD+8和NK均降低,CD+8升高,其中CD+3下降明显(P<0.05)。结论胸腺素α1可提高恶性肿瘤患者的免疫功能。 相似文献