甘草不定根培养的研究

[目的]考察甘草不同外植体与外源性激素诱导不定根能力,为甘草不定根培养做基础研究。[方法]切取乌拉尔甘草无菌实生苗的根、叶、带芽茎段接种到含有不同外源性激素的不定根诱导培养基中,考察不同外植体诱导生根的能力,并在此基础上进行不定根增殖尝试。[结果]不同外植体以及不同类型和浓度的外源性生长素对不定根诱导能力不同。根和叶诱导不定根效果好于带芽茎段;萘乙酸(NAA)较吲哚丁酸(IBA)更有利于不定根的诱导,6-苄氨基嘌呤(BA)则抑制不定根的诱导;不同类型的外植体诱导生根的生长素(NAA)适宜浓度存在差异,其中根段在0.2~1 mg/L,真叶在3~5 mg/L,带芽茎段在1~3 mg/L诱导效果较好。[结论]甘草不同外植体在含有外源性生长素的培养基中均可以诱导生根,但细胞分裂素强烈的抑制生根;根段和真叶作为外植体是甘草不定根诱导较为理想的材料。     

甘草不定根培养的研究

[目的]考察甘草不同外植体与外源性激素诱导不定根能力,为甘草不定根培养做基础研究。[方法]切取乌拉尔甘草无菌实生苗的根、叶、带芽茎段接种到含有不同外源性激素的不定根诱导培养基中,考察不同外植体诱导生根的能力,并在此基础上进行不定根增殖尝试。[结果]不同外植体以及不同类型和浓度的外源性生长素对不定根诱导能力不同。根和叶诱导不定根效果好于带芽茎段;萘乙酸(NAA)较吲哚丁酸(IBA)更有利于不定根的诱导,6-苄氨基嘌呤(BA)则抑制不定根的诱导;不同类型的外植体诱导生根的生长素(NAA)适宜浓度存在差异,其中根段在0.2~1 mg/L,真叶在3~5 mg/L,带芽茎段在1~3 mg/L诱导效果较好。[结论]甘草不同外植体在含有外源性生长素的培养基中均可以诱导生根,但细胞分裂素强烈的抑制生根;根段和真叶作为外植体是甘草不定根诱导较为理想的材料。     

甘草悬浮细胞补料培养中营养物质动态消耗的研究

目的研究5L气升式反应器中甘草悬浮细胞培养,在不同补料体积时营养物质的动态消耗情况。方法在甘草悬浮细胞培养的第10天,分别向培养体系中补充0,0.25,0.75,1.25L MS+30 g/L蔗糖的培养基,对培养基中糖、铵态氮、硝态氮、磷源的动态消耗进行分析,考察了细胞生物量的变化。结果补料0.75 L细胞在培养的第20天达到最大干重18.1 g/L,高出对照组5.8 g/L,细胞生长周期延长3～4 d,更有利于细胞生物量的积累;补料0.25 L与对照组差异较小,而补料1.25 L由于补料体积的不断增加,细胞的呼吸会因供氧的相对减少而受到抑制,效果略差于补料0.75 L。结论通过补料培养,为甘草悬浮细胞培养提供了充足的碳源、氮源和磷源,确定了最佳的补料体积为0.75 L。     

甘草悬浮细胞总黄酮含量的测定方法

目的 建立一种快速准确且完善的测定甘草悬浮细胞中总黄酮含量的方法.方法 以甘草苷为对照品,在400nm处测定样品中黄酮含量,通过换算因子的校正,得到样品中总黄酮含量.结果 标准曲线线性关系良好(r=0.9991),重复性强,加样回收率为99.18%(RSD=1.55%),测定结果在60 min内稳定;甘草总黄酮的换算因子为(1.98±0.03),测得甘草悬浮细胞中总黄酮含量为2.30%.结论 该方法操作简便、方法完善,可准确测定甘草悬浮细胞中总黄酮含量.