乳腺癌细胞原代培养方法的研究

化疗药物敏感试验对指导临床实施乳腺癌个体化化疗具有重要意义 ,然而 ,其前提是将肿瘤细胞培养成活。为得到较高的成活率 ,取手术切除新鲜乳腺癌标本的瘤细胞进行体外短期培养 ,探索不同病理类型乳腺癌细胞的原代培养的条件和方法。结果表明 :乳腺癌病理类型与细胞成活率有一定关系 ,培养过程中避免污染和处理好消化过程非常重要     

可调控的胰岛素基因表达载体的构建及其体外表达研究

目的构建四环素调控的胰岛素基因表达载体 ,并研究其体外转移后的表达情况。方法通过基因重组技术构建胰岛素基因的四环素调控表达系统 ,用脂质体转移法导入成肌细胞 ,以不同浓度的强力霉素诱导 ,检测诱导后胰岛素原mRNA表达及胰岛素 /胰岛素原水平。结果RT PCR显示此基因能在真核细胞内表达。细胞培养液中胰岛素水平在加药 2 4h后开始增加 ,至第 7天仍在增加 ,撤药后迅速下降 ,至撤药后第 5天下降到基础水平。不同诱导药物浓度诱导的胰岛素产量明显不同 (P <0 .0 5 ) ,而细胞内和培养基中的胰岛素浓度无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论单一四环素调控的胰岛素原表达系统能在真核细胞内表达 ,并呈现强力霉素浓度依赖性     

姜黄素对胰腺癌细胞株生长的抑制作用及可能机制

目的研究姜黄素对胰腺癌细胞增殖的体外抑制作用．探讨其抗癌作用的分子生物学机制。方法MTT法、Annexln V-FITC／PI双染法、细胞周期分析法、透射电镜等方法检测姜黄素对Pan02细胞生长和凋亡的影响．RT—PCR检测姜黄素对Pan02细胞Bax，Bcl-2，COX2，Bak．Survfvin mRNA的表达。结果(1)姜黄素抑制Pan02细胞生长呈量效关系；(2)姜黄素处理组细胞周期发生改变．G2／M期细胞比例增多、S期细胞比例减少；(3)姜黄素处理组细胞发生凋亡．表现为凋亡细胞比例增多，形态上出现明显细胞凋亡：(4)姜黄素处理组Pan02细胞Bcl-2和Bak mRNA表达水平显著下降．COX-2．Bax mRNA表达水平显著升高，Survivin mRNA的表达水平没有变化。结论姜黄素能够抑制Pan02细胞增殖，它可改变细胞周期、诱导细胞凋亡．Bcl-2家族而不是IAP家族(至少不是Survivin)参与了Pan02细胞的凋亡过程。     

早期应用20 mg阿托伐他汀治疗急性冠脉综合征的可行性研究

[目的]探讨应用20mg阿托伐他汀治疗急性冠状动脉综合征（ACS）的有效性和安全性。[方法]将107例ACS患者随机为两组：54例患者口服阿托伐他汀20mg／d（20mg组）;53例例患者口服阿托伐他汀10mg／d（10mg组）。随访6个月,观察两组患者调脂疗效、药物不良反应及住院期和出院后心脑血管事件发生情况。[结果]治疗6周后,20mg组和10mg组调脂幅度分别为：血清总胆固醇（TC）降低34．3％与24．7％,甘油三脂（TG）降低30．9％与23．2％,低密度脂蛋白胆固醇（LDL—C）降低32．4％与25．3％,高密度脂蛋白胆固醇（HDL—C）升高9．7％与5．4％,两组差异显著（P均〈0．05）;总达标率55．6％与41．9％,TC达标率64．7％与49．6％,LDL—C达标率66．1％与48．1％,两组差异显著（P均〈0．05）治疗6个月后两组调脂幅度分别为：TC降低37．9％与30．6％,TG降低38．5％与25．1％,LDL—C降低49．1％与29．9％,HDL—C升高16．8％与10．7％,两组差异显著（P均〈0．05）;总达标率62．1％与44．1％,TC达标率72．5％与52．2％,LDL—C达标率71．2％与51．1％,两组差异显著（P均〈0．05）。20mg组住院期复发性心绞痛（AP）、心力衰竭、心律失常发生率明显低于10mg组（P〈0．05）;出院后复发性（AP）、非致死性心肌梗死（MI）、心力衰竭、需做经皮腔内冠状动脉成形术／冠脉旁路移植术（PTCA／CABG）,因缺血发作需再住院和心律失常发生率20mg组明显低于10mg组（P〈0．05）。两组间不良反应无显著差异（P〉0．05）。[结论]ACS早期应用阿托伐他汀20mg／d治疗,能有效调降脂、提高达标率,减少住院期和随访期心脑血管事件发生,且安全可行.     

阿托伐他汀钙对糖尿病骨质疏松大鼠骨代谢的影响

目的　观察糖尿病大鼠应用他汀类药物阿托伐他汀钙（商品名立普妥Lipitor）治疗后骨组织形态学改变以及血中I型胶原氨基端肽（PINP）水平变化，为骨质疏松的防治提供依据。方法 3月龄雄性SD大鼠30只，单纯随机分为糖尿病（D）、立普妥治疗组（L），空白对照组（C），每组10只。D组和L组大鼠经鼠尾静脉注射链尿佐菌素造成糖尿病大鼠模型，C组大鼠流向生理盐水。L组大鼠予立普妥灌胃。9周及14周分别处死大鼠，取骨与血行骨组织形态计量法分析及应用放免方法检测PINP水平。结果 9周末，D组和L组光镜下见骨质疏松表现，PINP水平：C组（63&;#177;7）μg/L，D组（67&;#177;3)μg/L，L组（100&;#177;11)μg/L,D组和C组无差异，L组明显增高（P&;lt;0.05）。14周末D组仍见骨质疏松征象，而L组微观结构较9周末明显改善；PINP水平：C组（60&;#177;11）μg/L，D组（62&;#177;8）μg/L，L组（92&;#177;6)μg/L,D组与C组无差异，L组显著增高（P&;lt;0.01）。结论 立普妥可以促进糖尿病大鼠骨质的形成，抑制糖尿病大鼠骨质疏松的发生发展。     

胃癌中hMLH1、hMSH2、PTEN和PCNA表达的相关性及意义

近年来,研究发现除了一些癌基因基因以外,错配修复(m ism atch repair,MMR)基因也与胃癌的发生与演进密切相关。研究证实,MMR基因能够纠正DNA复制过程中的碱基错配,避免癌相关基因的突变,保护基因的完整性与稳定性,从而抑制癌的发生。在已经发现的MMR基因中,hMLH1和hMSH2与胃癌     

梗阻性黄疸大鼠肾细胞凋亡及bcl-2表达的作用

目的探讨梗阻性黄疸引起肾损伤过程中细胞凋亡的意义。方法32只雄性SD大鼠随机均分为2组，假手术组（SO组）只暴露腹腔但不结扎胆管，胆总管结扎组（BDL组）以双重结扎胆管中间离断方法制成梗阻性黄疸大鼠模型。于术后行光镜下肾脏病理学检查，琼脂糖凝胶电泳检测肾细胞DNA的断裂形式，测定血清中D-Bil、TBA、GOT、GPT、Cr和BUN的含量，检测尿β2-微球蛋白，流式细胞术检测肾脏细胞凋亡率，免疫组化法检测肾组织凋亡抑制基因bcl-2蛋白的表达。结果BDL组大鼠肾脏细胞凋亡率明显高于SO组（P〈0．05），出现细胞凋亡特征性DNA梯状带；其肾脏细胞bcl-2蛋白的表达阳性细胞率明显高于SO组（P〈0．01），并于术后7d达高峰，14d时bcl-2表达阳性细胞率开始下降。结论梗阻性黄疸大鼠肾功能损害过程中存在肾脏细胞凋亡，梗阻性黄疸可反馈性启动肾小管上皮细胞凋亡抑制基因bcl-2的表达。     

胃癌中hMSH2、p53和PCNA表达的相关性及意义

目的:探讨胃癌中hMSH2、p53和PCNA表达的相关性及意义.方法:采用免疫组织化学SP法,检测胃癌、癌旁和胃炎粘膜中hMSH2、p53和PCNA表达情况.结果:1)3种基因产物在胃癌中的阳性率均显著高于非癌组织,其中,p53和PCNA在低分化癌中的阳性率显著高于高分化癌,有淋巴结转移者显著高于无转移者(P＜0.05).2)胃癌中hMSH2/PCNA及p53/PCNA表达均呈正相关(P＜0.05).结论:hMSH2、p53和.PCNA的异常表达及hMSH2与PCNA之间的相互调节可能与胃癌的发生发展密切相关.     

人参皂甙Rg3在小鼠肝癌淋巴结转移模型中诱导细胞凋亡的作用

目的 :观察人参皂甙Rg3对小鼠肝癌淋巴结转移模型中肿瘤细胞凋亡的诱导作用,探讨人参皂甙Rg3抗肿瘤淋巴结转移的机制。 方法 :建立小鼠肝癌淋巴结转移模型;光镜和透射电镜下观察各组(Rg3预防组、Rg3治疗组、Rg3与顺铂联合治疗组、顺铂治疗组及对照组)中原发瘤及转移瘤组织的形态学结构改变,并通过流式细胞仪分析肿瘤细胞的凋亡。 结果 :Rg3预防组及治疗组电镜下(5份样品)可见较多细胞凋亡小体的形成(5/5,4/5);顺铂治疗组的形态改变以细胞破坏为主,凋亡的细胞较少;联合治疗组细胞的凋亡和坏死程度相当。流式细胞学检测分析结果为:Rg3预防组、治疗组及联合治疗组均见细胞凋亡的特征峰(5/5),而顺铂治疗组为1/5,对照组未见凋亡峰(0/5)。 结论 :人参皂甙Rg3抗肿瘤细胞淋巴结转移的作用与诱导细胞凋亡有关。