CD133阳性和阴性胶质瘤U87细胞基因组学分析

目的 分析胶质瘤U87中的CD133阳性(CD133+)和阴性(CD133-)细胞,建立差异性基因文库.方法 通过磁珠选择分离U87细胞中的CD133+和CD133-细胞,利用Agilent Human 1A oligo芯片检测2种细胞总体基因,分析结果,建立差异性基因文库.结果 基因组学研究中,CD133+和CD133-U87细胞比较,差异性基因数为840个;其中,上调基因759个,下调基因81个.在各基因功能分组中,与翻译调控功能相关的基因,差异性基因所占比率最大,为14.9％;各功能组之间差异性基因比率均有统计学意义(P＜0.01).结论 通过基因组学研究,建立了CD133+和CD133-U87细胞差异性基因文库,为进一步研究脑肿瘤干细胞提供了线索.     

胶质瘤中CD133、Nestin和ABCG2阳性细胞及其壁龛分布

目的探讨胶质瘤干细胞生存微环境—壁龛的结构和分布特征。方法采用免疫组化法检测26例胶质瘤标本中CD133、Nestin、ABCG2阳性细胞及壁龛的表达,计算其阳性细胞及壁龛数,并分级,分析其与病理分级的相关性。结果低级别(Ⅱ级)12例,高级别14例(Ⅲ级10例、Ⅳ级4例)。CD133、Nestin、ABCG2阳性细胞及其壁龛多半分布于血管周围以及血管相对富集的肿瘤边缘,三者均与病理分级呈正相关(P<0.05或P<0.01)。结论 CD133、Nestin、ABCG2阳性细胞及壁龛均以血管周围分布为主,与病理分级呈正相关关系;胶质瘤干细胞壁龛在胶质瘤发生、发展和浸润扩散中起着重要作用。     

急性自发性硬脊膜外血肿漏诊1例

<正>患者,女,41岁,2016年9月18日凌晨2点左右出现颈后酸胀、疼痛不适,睡眠中痛醒,至我院急诊科就诊。考虑颈椎疾病,行颈椎X线检查未见明显异常;建议患者行颈椎MRI检查并留院观察,因患者及家属拒绝,故予颈托外固定、镇痛治疗,患者好转后自行回家。当日上午9点30分,患者感颈后仍疼痛难忍,再次至骨科门诊就诊。查体:神志清,精神一般,痛苦面貌,颈后叩痛、压痛,颈椎屈伸、旋转功能受限,双手霍夫曼征阴性,四肢肌力、肌张力、感觉均正     

模拟C-臂机引导下经皮穿刺球囊压迫术治疗三叉神经痛穿刺路径的应用解剖

目的：对经皮穿刺球囊压迫术（ PBC）治疗三叉神经痛穿刺路径的重要组织结构进行解剖学研究,为提高 手术过程中穿刺的成功率,降低穿刺相关并发症提供解剖学依据。方法：取3 例福尔马林固定的完整男性头颅标本。 上方去除脑组织,显露卵圆孔。模拟Hartel 前入路,从标本唇联合外侧2 cm处进针,另2 个参考点为患者瞳孔下方 1 cm处及颧弓水平外耳道前3 cm处,直视卵圆孔调整穿刺针位置,将穿刺针放置卵圆孔,根据穿刺针穿刺路径逐 层分离组织,记录穿刺路径周围组织结构。结果：穿刺路径上经过的肌肉结构有颊肌、咬肌、翼内肌、翼外肌;血 管结构有面动静脉、面横动静脉、上颌动脉及其分支如咬肌支、颊肌支;主要神经为面神经的分支颊神经;以及皮肤、 腮腺、副腮腺、腮腺管、颊脂体等结构。结论：使用穿刺针进行穿刺时难免对神经、肌肉、血管等结构有所损伤, 但单次穿刺对上述解剖结构的损伤多症状轻微,严重的损伤多来自于锐性针尖的直接切割以及反复多次的穿刺造成 的医源性损伤。使用内含针芯的钝缘穿刺针以及不完全退针可显著减少相关并发症的发生,同时三维CT、立体定 向技术、神经导航技术的运用可大幅提升穿刺成功率,减少穿刺相关损伤。     

转位分子蛋白对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的 利用相对分子质量为18000的转位分子蛋白(TSPO)的特异性配体1-(2-氯苯基)-N-(1-甲基丙基)-异喹啉-3-氨甲酰(pk11195)研究TSPO对人脑胶质瘤U251增殖的影响及机制,为人脑胶质瘤的治疗寻找新的靶点. 方法 体外常规培养U251细胞,应用100、50、25、12.5、6.25 μmol/L pk11195作用2h后MTT比色法检测细胞的增殖活性,同时设对照组(加入等量溶剂);台盼蓝染色法检测对照组和50、6.25 μmol/L pk11195组细胞死亡率的变化;Hoechst33342染色法和流式细胞仪检测细胞凋亡;Western blotting和免疫荧光法检测细胞TSPO的表达;2’,7’-二氢二氯荧光黄双乙酸钠(DCFH-DA)探针法和GSH试剂盒分别检测细胞内活性氧(ROS)和GSH的水平;曲氟胸苷(JC-1)染色法检测线粒体膜电位;荧光素酶法检测细胞内ATP含量. 结果 MTT检测显示50、25μmol/L pk11195组细胞存活率高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05);台盼蓝染色显示50 μmol/L pk11195组细胞死亡率、GSH水平低于对照组和6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05);6.25、50 μmol/L pk11195组细胞凋亡率、TSPO的表达量较对照组降低,且50μmol/L pk11195组低于6.25 μmol/Lpk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05);6.25、50 μmol/Lpk11195组ATP的含量高于对照组,且50 μmol/Lpk11195组高于6.25 μmol/L pk11195组,差异有统计学意义(P＜0.05).pk11195组ROS水平较对照组降低,而细胞膜电位增高. 结论 TSPO具有促进U251细胞凋亡、抑制其增殖、类似于抑癌基因的作用.     

氯丙咪嗪对人脑胶质瘤U251细胞增殖的影响

目的探讨氯丙咪嗪对人脑胶质瘤U251细胞体外增殖的影响。方法用甲基噻唑基四唑(MTT)比色法检测不同浓度的氯丙咪嗪对U251细胞增殖活性的影响。根据结果,选取二个不同浓度组检测细胞形态学的变化、台盼兰染色细胞死亡计数、细胞凋亡染色、流式细胞术检测等。结果依据MTT实验结果,选取氯丙咪嗪57μmol/L和28.5μmol/L两个浓度进行台盼兰染色、细胞形态学、细胞凋亡染色和流式细胞术检验。结果证实,氯丙咪嗪对U251细胞有明显的抑制作用。结论氯丙咪嗪具有明显的抑制胶质瘤U251细胞增殖的功能,促进其凋亡,可作为胶质瘤化疗的备选药物。     

胶质瘤U251细胞中CD133表达及干细胞特性分析

目的： 探讨CD133⁺细胞的生物学特性,分析CD133作为胶质瘤干细胞标记的可行性。方法： 利用免疫荧光染色检测U251细胞中CD133、巢蛋白（nestin）、神经元特异性烯醇化酶( NSE )、神经胶质细胞纤维酸性蛋白(GFAP)等蛋白表达,分析CD133⁺细胞与CD133^－细胞中巢蛋白、NSE、GFAP阳性细胞存在的差异。结果： U251中CD133⁺细胞比例为0.060±0.003,在CD133⁺细胞中,巢蛋白阳性细胞,NSE和GFAP阴性细胞比CD133^－中明显增多;在CD133^－细胞中,也存在巢蛋白阳性细胞,数目较CD133⁺中明显减少,相反巢蛋白阴性细胞,NSE和GFAP阳性细胞明显增多。结论： 胶质瘤U251细胞存在CD133⁺细胞,在CD133阳性和阴性细胞中,均存在干细胞样细胞,但是在CD133⁺细胞中此类细胞更多。     

颅脑手术后迟发性脑水肿的临床分析

目的 探讨颅脑术后迟发性脑水肿的临床、影像学特征及治疗与效果。方法 回顾性分析中国人民解放军联勤保障部队第904医院神经外科2015年1月—2017年12月期间收治的8例颅脑手术后发生迟发性脑水肿患者的临床资料。其中颅脑创伤4例,高血压脑出血4例。分析患者的临床表现、影像学特征、手术及术后治疗、病情转归。结果 4例颅脑创伤及3例脑出血患者术后发生迟发性脑水肿后,经减少甘露醇使用、改善微循环及糖皮质激素等综合治疗,均完全治愈。1例高血压脑出血患者术后1. 5个月诊断为脑脓肿,给予脓肿腔置管引流及抗炎治疗,恢复良好。结论 颅脑术后迟发性脑水肿CT表现为“指状水肿”,持续时间长达2周以上。其原因可能与长期使用甘露醇、术区炎性反应等因素有关;采用综合治疗的效果满意。     

骨髓间充质干细胞对胶质瘤C6细胞增殖的影响

目的探讨大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)对胶质瘤C6细胞体外增殖的影响。方法从大鼠骨髓中分离MSCs,体外培养和鉴定。取MSCs培养上清液,按照1/5,2/5,3/5的比例加入到C6培养基中,用MTT实验和BrdU标记指数(BrdU LI)评估C6细胞增殖。将MSCs与C6按照1∶1,1∶2,2∶1比例共培养。结果大鼠MSCs贴壁生长,有较强的增殖能力。经硫代甘油和巯基乙醇诱导分化后,分化为神经元或胶质细胞样细胞。C6培养基中加入MSCs培养上清液后,活性受到明显抑制,BrdU LI明显减低(P<0.05)。C6与MSCs共培养后,生长明显受到抑制,BrdU LI明显降低,尤其在MSCs周围,表现更加明显。结论大鼠MSCs在体外有明显的抑制胶质瘤C6增殖作用。