正丙醇、铜离子、烟酰胺对红霉素合成的作用

在摇瓶培养过程中，发酵初期加入正丙醇可使红霉素的效价提高49．31％，正丙醇提高了丙酸激酶的比活力，表现出对该酶诱导作用，而对丙酰CoA合成酶比活力无影响。加入铜离子和烟酰胺可使红霉素效价分别提高24％和179／5。用HPLC测定发酵液中有机酸含量，分析测定结果认为发酵过程可分为3个阶段：积累期、转折期和生产期。     

异亮氨酸对他克莫司发酵的影响

研究了前体氨基酸对发酵合成他克莫司的影响,结果显示:在发酵初期添加2.5 g/L的异亮氨酸(Ile),他克莫司产量提高约59%。有机酸分析和丙酰CoA合成酶与丙酰激酶活性测定的结果显示:异亮氨酸的加入显著增加了丙酸(Pro)的浓度,在产物合成期丙酰CoA合成酶的最大酶活提高到600 U/g。由此表明该前体氨基酸促进他克莫司发酵合成的原因可能是其促进了丙酰CoA等前体物质的合成,从而增进了内酯环的形成。     

添加Triton-X100及氯化胆碱对红霉素组分的影响

以红霉素生产菌红色链霉菌HD为研究对象,根据红霉素生物合成机理,以促进羟基化和甲基化为主要手段,在利用摇瓶生产红霉素的过程中,96h添加Triton-X100,可使最终发酵液的EM B组分百分含量降低7.1%.但EM C与对照相比增加.120h添加甲基化试剂氯化胆碱0.8g/l,可使最终发酵液的EM C组分百分含量降低6.4%,但EM B有所积累.继而添加Triton-X100的同时加入甲基化试剂氯化胆碱,发现EM B、EM C分别降低6.4%、8.9%,红霉素有效组分EM A比对照提高13.2%     

螺旋霉素产生菌抗噬菌体菌株的选育

用Ｃｏ＾６０处理螺旋霉素产生菌ＰＳ，获得了一株抗噬菌体且摇瓶发酵单位比原菌株稍高的突变株Ｒ１０，继而对Ｒ１０进行理性化筛选，在加有２－脱氧葡萄糖的分离培养基上分离到一株抗噬菌体稳定、摇瓶发酵单位又比Ｒ１０高２０％的新突变株，且其摇瓶发酵周期缩短１２ｈ、能耐受更高浓度的自身代谢产物－螺旋霉素。     

丙酸盐引起麦白霉素生产菌株生长与代谢的改变

通过在培养基中添加一定质量浓度的丙酸盐,研究其对麦白霉素合成的影响。在发酵培养基中添加质量浓度为6×10-4 g/mL的丙酸盐,不但能使麦白霉素的生物效价提高35.2%,而且能提高其组分中麦迪霉素A1的含量,但是添加丙酸盐对菌体的生长不利。发酵12 h添加丙酸盐,产物的合成受到相当大的抑制,且出现二次生长现象,最终菌浓比对照高出40%。发酵12 h添加丙酸盐对麦白霉素生产菌的影响可能是提高了生长代谢的通量,从而使代谢的产物合成通量降低。     

Arthrobacter globiformis酯酶基因的克隆、表达和酶活性测定

采用聚合酶链反应(PCR)的方法扩增了A rthrobacter g lobiform is中酯酶编码基因,与载体质粒连接后在大肠杆菌BL 21(DE 3)中进行表达。以包涵体形式表达的蛋白在8 m o l/L尿素作用下溶解,经过透析复性后获得了具有活性的粗蛋白。产物活性实验表明,酯酶表现出较高的催化活性,为菊酯作为杀虫剂的应用奠定了基础。     

旁路代谢酶抑制剂对林可霉素发酵的影响

目的 研究林可链霉菌的发酵工艺,提高林可霉素的产量.方法 在林可链霉菌发酵产林可霉素的过程中,在一定时间添加一定量的旁路代谢酶抑制剂丙氨酸和三甲胺,用生物效价法测定发酵液中林可霉素的产量.结果 在发酵开始时添加0.01％的丙氨酸,同时在24h时添加0.02％的三甲胺,使林可霉素的产量提高26％.实验发现该种添加方法抑制了糖酵解途径中的丙酮酸激酶和莽草酸途径中的邻氨基苯甲酸合成酶的酶活,使菌体内积累高浓度的林可霉素的前体酪氨酸及L-多巴,进而提高了林可霉素的产量.结论 该种发酵工艺使林可霉素产量得到显著提高.     

去甲金霉素发酵培养基的优化及机制分析

以金色链霉菌发酵制备去甲金霉素(1),优化其培养基组成.通过Minitab软件设计Plackett-Burman试验筛选出玉米淀粉、黄豆粉和碳酸钙这3个对1发酵效价影响较大的因素,继而通过最陡爬坡试验和响应面优化确定3个因素的最佳水平:玉米淀粉110 g/L、黄豆粉43 g/L、碳酸钙7 g/L.培养基优化后,1的发酵效价提高了25％～31％.比较优化前后培养基的碳氮比并进行氨基酸添加试验,结果提示1效价的提高可能是多种因素协同作用所致.分析了优化前后发酵过程中相关有机酸和CoA羧基转移酶比活力的变化趋势,结果显示培养基优化后,在发酵中期胞外积累了大量的草酰乙酸和丙二酸,后期进入细胞以合成产物,酶比活力的变化趋势与丙二酸及1效价的变化趋势吻合.     

林肯链霉菌原生质体形成、再生和融合的研究

林肯链霉菌生长在0.5%甘氨酸的S培养基中,能较好地被溶菌酶破壁形成原生质体。原生质体能在RB培养基上再生,但不能在R_2培养基上再生,这和已报道过的其他链霉菌不同。78-11菌株的再生频率约为25.7%,S-3菌株的再生频率约为20.5%。PEG(聚乙二醇)1000对诱导融合的效果较好,重组频率最高可达10~(-2)。重组子和亲本在培养特性、孢子形态方面无特殊差异,但经C_O~(60)诱变后重组子的正变率超过亲本。