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1.
重组结核分支杆菌16000蛋白抗原(rPA16)的免疫原性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
目的:研究结核分枝杆菌重组16000蛋白(rPA16)诱发家兔产生抗体的能力并评价其血清学诊断的价值。方法:家兔按注射的抗原及佐剂的不同分组,皮下多点注射分别进行免疫,6次免疫后采血,双向琼脂扩散试验和酶联免疫吸附试验(ELISA)跟踪兔血清抗体效价的时间效应并检测兔血清与所试各类分支杆菌PPD有无交叉反应;同时检测rPA16与各分支杆菌PPD的免疫羊血清的反应,并用rPA16抗原检测人血标本,分析该抗原的临床检测的敏感性和特异性。结果:兔血清抗体效价结果显示:5个月后,加佐剂的抗原组的兔免疫血清仍能检测到抗体,不加佐剂组2个月后血清抗体检测即为阴性,ELISA检测兔免疫血清比双向琼脂扩散方法要更敏感,rPA16抗原加佐剂引起的兔血清抗体滴度最高可达1:6400,不加佐剂组的血清抗体滴度仅为1:400,ELISA法分析抗rPA16的兔血清的特异性表明其特异笥较好,仅与牛、人型结核分支杆菌的PPD呈阳性反应,与其他所试分支杆菌PPD反应均为阴性,同时又分析了rPA16抗原的特异性,与人型PPD相比,该抗原只与所试各类分支杆菌,BCG、牛分支杆菌免疫的血清呈阳性反应,而人型PPD则基本上与结核分支杆菌免疫的血清均呈阳性反应,ELISA检测血清标本结果:肺结核病组中rPA16和PPD检测敏感性分别为64.8%和75.2%;健康组,卡介苗接种阳转健康组,rPA16和PPD检测特异性分别为96.2%,88.5%和94.3%,66.7%。结论:rPA16具有较强的免疫原性和一定的特异性,可能成为结核病血清学诊断试剂之一。 相似文献
2.
目的: 对抗结核中药牛贝消核提取物进行血清药物化学初步研究,通过分析入血成分,探讨牛贝消核发挥药效的物质基础。方法: 2018年4月至2019年6月在中国人民解放军总医院第八医学中心全军结核病研究所制备桔梗、白及、鱼腥草和牛蒡子标准品溶液及牛贝消核供试品;55只小鼠随机分为11组,每组5只:1~5组为牛贝消核提取物组,每只小鼠每天给予 1.25mg/g牛贝消核提取物灌胃;6~10组为牛蒡苷组,每只小鼠每天给予 0.3mg/g牛蒡苷灌胃;11组为空白对照组,给予蒸馏水灌胃;连续灌胃7d。于末次给药后0.5、1、2、4、6h小鼠眼眶后静脉丛取血,制备血清供试品溶液。采用高效液相色谱法(high-performance liquid chromatography, HPLC)分析各中药标准品、牛贝消核提取物供试品及各组小鼠给药后血清供试品溶液,分析色谱图中各物质保留时间;然后参照对照品初步鉴定牛贝消核提取物的入血成分。结果: 通过牛贝消核提取物和各药材标准品重叠色谱图中可以看出,牛贝消核提取物保留时间为7.1min处的色谱峰所对应的物质来源于桔梗,保留时间为13.5min、15.5min、21.2min处的色谱峰所对应的物质来源于白及,保留时间为16.3min的色谱峰所对应的物质来源于牛蒡子,并进一步鉴定为牛蒡苷化合物。牛贝消核提取物和牛蒡苷给药后血清样本与空白血清比较,均在17.5~22.5min发现有吸收峰。结论: HPLC分析可作为牛贝消核中桔梗、白及、鱼腥草和牛蒡子提取的质量控制方法,检出的牛贝消核提取物血中移行成分可能是牛蒡苷代谢产物,其余药效成分入血微量未检出。 相似文献
3.
目的 了解结核分支杆菌重组抗原ESAT6 (E)、MPT64 (M)、Ag85A(A)及两两混合物诱发豚鼠产生迟发型超敏 (DTH)反应的能力。方法 常规皮肤实验法 :灭活H37Rv全菌体致敏豚鼠,皮肤试验以生理盐水为阴性对照,5UPPD标准品为阳性对照,0.8μgE、0.8μgM、0.8μgA、0.4μgA+0.4μgM、0.4μgA+0.4μgE、0.4μgE+0.4μgM分别于背部皮内注射,注射后24、48、72h分别测量硬结反应横、纵直径 (mm),取二者的平均值。皮肤试验轮圈法 :生理盐水、5UPPD及0.8μgE、0.8μgM、0.8μgA、0.4μgA+0.4μgM、0.4μgA+0.4μgE、0.4μgE+0.4μgM,以轮圈法注射于同一只豚鼠背部两侧,每批6只,共3批。注射后24、48、72h分别测量硬结反应横、纵直径 (mm),取二者的平均值。结果 常规皮肤试验0.8μgM、A、M+E及E+A诱发豚鼠DTH的平均直径与PPD相比无显著性差异 (P>0.05),而0.8μgE抗原及M+A诱发豚鼠DTH的平均直径与PPD相比有显著性差异(P<0.05)。时间效应 :重组抗原及其混合物诱发豚鼠DTH的平均直径24h平均直径显著高于48h平均直径 (P<0.05),24h测量效果较好。轮圈法皮肤试验排除个体差异后,结果与常规皮肤试验结果一致。结论 从试验结果看,重组ESAT6抗原及MTP64与Ag85A混合物诱发豚鼠DTH反应强于PPD。 相似文献
4.
5.
6.
目的 研究达那唑海藻酸钠微球(DKMG)用于子宫肌瘤动脉栓塞术后细胞凋亡的特点.方法 2005年6月至11月于北京协和医院实验动物中心,对24只豚鼠采用雌孕激素负荷法建立子宫肌瘤模型,雌孕激素负荷16周后,随机分为3组:即DKMG栓塞组(DKMG组,8只)、海藻酸钠微球(KMG)栓塞组(KMG组,8只)和未进行子宫动脉栓塞组(对照组,8只).豚鼠双侧子宫动脉栓塞术在麻醉下开腹直视下进行.于子宫动脉栓塞术4周后,用TUNEL法检测肌瘤细胞凋亡情况,同时用免疫组织化学方法检测肌瘤组织中Bcl-2蛋白的表达.结果 DKMG组、KMG组和对照组TUNEL法凋亡细胞比率分别为:(44.6±11.9)%,(33.7±7.3)%和(22.8±9.7)%.DK-MG和KMG组间凋亡细胞比率比较,差异有统计学意义(P<0.05),DKMG组、KMG组和对照组Bcl-2免疫组化染色H评分值分别为:2.7±0.7,2.1±0.3和1.3±0.6.3组间H评分值比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 达那唑海藻酸钠微球用于子宫肌瘤动脉栓塞术可造成细胞凋亡增加,其机制为微球中达那唑药物的局部释放,增加了子宫平滑肌细胞的凋亡比率. 相似文献
7.
重组结核分支杆菌38000蛋白的理化特征与细胞免疫功能 总被引:1,自引:1,他引:0
目的:探讨重组38000蛋白在结核病流行病调查和亚单位疫苗研制中的应用前景。方法:等电点测定,肽图分析和圆二色光谱分析研究重组38000蛋白的理化性质;豚鼠皮试,MTT法测外周血单核细胞增殖和巨噬细胞吞噬探讨重组38000蛋白在细胞免疫中所起的作用。结果:重组38000蛋白是酸性蛋白,其等电点为4.67,肽图分析表明其碱性氨基酸的数量与理论一致;重组38000蛋白的二级结构由α-螺旋(32.6%),β-转角(31.6%)和无规则卷曲(35.8%)组成,它能诱发致敏豚鼠产生DTH反应;增强小鼠巨噬细胞吞噬功能;刺激30.8%健康者和25%所试结核病人的外周血单核细胞增殖。结论:重组38000蛋白可能在结核病流调中具有应用前景,并可作为亚单位疫苗候选者之一。 相似文献
8.
目的 研究结核分枝杆菌Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗及其与抗痨药物联合治疗小鼠结核病的效果.方法 用结核分枝杆菌临床分离的利福平和异烟肼敏感株HB240-1尾静脉注射17~19g的6~8周龄雌性BALB/c小鼠后,将小鼠随机均匀地分为5组,感染后第3d开始,分别用pVAX1空载体(A组)、利福平和异烟肼(B组)、利福平、异烟肼和Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(C组)、Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗(D组)、HSP65基因DNA疫苗(E组)治疗40d,每组10只小鼠.治疗结束后2w,分别取肺、肝和脾观察病理改变、称取重量、做菌落计数.结果 小鼠感染5w后,肺内菌量可达到1.8×106 CFU,脾内菌量达到1.7×106CFU.治疗结束后2w,B组和C组肺、脾脏器重量指数显著低于D组和E组,D组和E组脾脏器重量指数低于A组,但差别不显著.A组肺脏病变程度最重,病变范围80%~100%,干酪样坏死灶为弥漫性;D组和E组肺脏病变范围50%,干酪样坏死灶为片状;B组和C组肺脏病变程度较轻,病变范围较小,干酪样坏死灶为点状.A组脾脏9只重度肿大;B组和C组脾脏未见明显病变;D组和E组脾脏各有4只重度肿大.与A组相比,E组、D组、B组和C组肺脏菌落数分别减少了45%、50%、98.9%、99%;脾脏菌落数依次减少了50%、55%、99.2%、98.4%.与pVAX1空载体治疗组相比,各治疗组均有不同程度的疗效,Ag85A/ESAT-6嵌合基因疫苗组与HSP65基因疫苗组疗效相当.结论 Ag85A/ESAT-6嵌合基因DNA疫苗组联合化疗的疗效明显强于Ag85A/ESAT6嵌合基因DNA疫苗单独应用. 相似文献
9.
抗结核药物凝胶介质肺内应用安全性评价 总被引:5,自引:2,他引:3
目的 对卡波姆凝胶和阿胶经支气管镜介入兔肺部后的安全性进行评价,为含抗结核药物凝胶肺内应用提供依据.方法 45只日本长耳兔随机分成对照组、卡波姆组和阿胶组,每组15只,实验周期4周.检测体温、体质量、血常规、T细胞亚群及病理.结果 各组间体温、体质量、血常规及外周血T细胞亚群比较差异均无统计学意义.卡波姆组和阿胶组凝胶介入前与介入后CD3+、CD4+、CD8+百分比比较差异亦无统计学意义.卡波姆组实验动物左肺底细支气管无凝胶成分残留.肺大体及光镜病理观察与对照组相比均未产生明显变化.阿胶组实验动物左肺底细支气管有少量阿胶存留,其中1只实验动物出现花斑肺,光镜病理观察可见肺泡间隔内淋巴细胞浸润.其余14只实验动物肺大体及光镜病理观察与对照组比较均未发现明显变化.结论 卡波姆凝胶和阿胶肺内应用均具有较好的安全性,可作为含抗结核药物凝胶的良好基质. 相似文献
10.
不同浓度的月桂氮(艹卓)酮对双氯芬酸钠凝胶剂透皮吸收的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
目的通过动物离体透皮吸收试验,选择双氯芬酸钠凝胶剂中最佳浓度的月桂氮(艹卓)酮(氮酮,Azone)作为渗透促进剂.方法采用改良的Franz扩散装置,以离体鼠皮为屏障、生理盐水为接受介质,研究了不同浓度的月桂氮(艹卓)酮(0%、1%、2%、3%、5%Azone)对双氯芬酸钠凝胶剂透皮吸收的影响.结果双氯芬酸钠凝胶剂12h累积透皮释药百分率依次为38.42%、62.35%、72.80%、32.10%、55.36%.结论 Azone促进双氯芬酸钠凝胶剂透皮释药的最大浓度为2%,筛选出2%月桂氮(艹卓)酮作为促进剂,制备了具有良好经皮吸收性能的双氯芬酸钠凝胶剂. 相似文献