脑小血管病致血管性认知功能障碍患者血清UA、Hcy水平与MRI影像特征的相关性

目的 ：分析脑小血管病（CSVD）致血管性认知功能障碍患者血清尿酸（UA）、同型半胱氨酸（Hcy）水平与磁共振成像（MRI）影像特征的关系。方法：回顾性分析97例CSVD患者资料,其中72例有血管性认知功能障碍为观察组,25例无血管性认知功能障碍为对照组。所有患者于入院第二天早晨测定血清UA、Hcy水平,分析血清UA、Hcy水平与MRI影像特征的关系。结果：观察组血清Hcy、UA水平分别为18.63±3.16μmol/L和421.30±29.11μmol/L,高于对照组的13.25±2.21μmol/L和366.92±23.05μmol/L,差异均有统计学意义（P<0.001）。观察组腔隙性梗死15例,脑白质疏松21例,脑微出血24例,血管周围间隙扩张12例。腔隙性梗死组Hcy、UA水平分别为24.36±3.87μmol/L和442.65±31.27μmol/L,脑白质疏松组分别为20.27±3.51μmol/L和429.01±28.49μmol/L,脑微出血组分别为15.42±2.85μmol/L和408.32±22.58μmol/L,血管周围间隙扩张组分别为15.02±2.6...     

过表达多巴胺脱羧酶、酪氨酸羟化酶和三磷酸鸟苷环化水解酶1重组慢病毒构建及其在帕金森病大鼠模型治疗作用的研究

目的构建同时表达3种多巴胺(DA)合成相关酶的重组慢病毒(rLV),验证其在6-羟基多巴胺(6-OHDA)帕金森病(PD)大鼠模型中治疗作用,为PD临床基因治疗提供实验基础。方法构建过表达多巴胺脱羧酶(DDC)、酪氨酸羟化酶(TH)和三磷酸鸟苷环化水解酶1(GCH1)rLV及对照rLV。6-OHDA制备的PD模型大鼠,随机分为生理盐水组(n=6)、阴性病毒组(n=6)和阳性病毒组(n=12),分别经立体定向向大鼠纹状体注射生理盐水、对照rLV和DDC+TH+GCH1-rLV。观察构建病毒对PD大鼠旋转行为的影响,免疫荧光法检测病毒转染情况,同时使用高效液相色谱-串联质谱联用法(HPLC-MS/MS)检测纹状体内DA及其代谢产物改变情况。结果 PD大鼠纹状体注射后,阳性病毒组行为改变与生理盐水组、阴性病毒组比较,差异有显著统计学意义(P0.01);阳性病毒组呈现显著的旋转行为改善。免疫荧光显示阳性病毒转染表达有TH活性的阳性细胞。阳性病毒组纹状体内DA及其代谢产物与生理盐水组、阴性病毒组比较,显著增高(P0.01)。结论成功构建过表达DDC+TH+GCH1-rLV,并且在PD模型大鼠中呈现显著的行为改善及DA水平增加,为PD的基因治疗提供实验基础。     

过表达SOD_1 G41S和G41D的重组腺相关病毒载体构建及其在体外N2a细胞中的作用研究

目的研究家族性肌萎缩侧索硬化(fALS)超氧化物歧化酶1(SOD_1)上G41S和G41D两种突变型所致神经元电压门控性钠通道(Na_v)电生理特性的差异及其可能的分子机制。方法构建过表达SOD_1野生型(WT)、SOD_1G41S及SOD_1G41D重组腺相关病毒(rAAV)载体后,体外感染小鼠神经瘤母细胞(N2a),并分为3个实验组:SOD_1WT组、SOD_1G41S和SOD_1G41D组,并以无目的基因rAAV感染的N2a细胞为阴性对照组。利用全细胞膜片钳技术分别记录4组细胞Na_v电流,绘制通道快速激活和稳态失活曲线后分析相关参数。比较各组细胞凋亡分子cleaved caspase-3在感染后24、48和72 h不同时间点的表达情况。结果与对照组和SOD_1WT组比较,感染过表达SOD_1G41S组、SOD_1G41D组rAAV的细胞峰值电流显著增加(P0.05),且SOD_1G41S组显著高于SOD_1G41D组(P0.01)。SOD_1G41S组和SOD_1G41D组细胞半数激活电压和半数失活电压显著高于对照组和SOD_1WT组(P0.05);但SOD_1G41S组半数激活电压高于SOD_1G41D组(P0.05);SOD_1G41S与SOD_1G41D组半数失活电压比较差异无显著性(P0.05);各组激活、失活曲线斜率差异无显著性(P0.05)。虽然24和48h,SOD_1WT、SOD_1G41 S、SOD_1G41D组cleaved caspase-3表达量差异无显著性;但转染72 h后,SOD_1G41S组和SOD_1G41D组cleaved caspase-3表达量高于SOD1WT组,且SOD_1G41S组高于SOD_1G41D组。结论SOD_1G41S和SOD_1G41D突变通过加快Na_v快速激活和抑制失活过程提高神经元活性,SOD_1G41S突变Na_v活性显著高于SOD_1G41D。SOD_1G41S突变导致cleaved caspase-3表达水平高于SOD_1G41D突变。     

自体外周单核细胞治疗肌萎缩侧索硬化疗效及外周淋巴细胞变化观察

目的：探讨体外扩增的自体外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)对肌萎缩侧索硬化(amyotrophic lateral sclerosis,ALS)患者的治疗作用,以及外周血淋巴细胞亚群分类与症状改善之间的关系。方法：收集2019年10月—2021年8月南京医科大学附属逸夫医院神经内科和南京中医药大学附属南京医院神经内科符合标准的ALS患者65例,通过随机表号码法将患者随机分为PBMC组(PBMC 1×10⁶个/kg体重+20%人体白蛋白100 m L,33例)和对照组(20%人体白蛋白100 mL,32例)。分别于治疗前、治疗后第5天及第14天,以修订版ALS功能评定量表(revised ALS functional rating scale,ALSFRS-R)评分,并测定外周血CD4⁺T细胞、CD8⁺T细胞、CD4⁺CD25⁺Foxp3⁺Treg细胞及CD16⁺CD56     

ALSFRS-R量表与AALS量表在评估肌萎缩侧索硬化不同治疗中的价值比较

目的 比较修订版肌萎缩侧索硬化功能评分量表(ALSFRS-R)和Appel肌萎缩侧索硬化评定量表(AALS)在肌萎缩侧索硬化(ALS)临床治疗中的应用价值差异。方法 回顾性分析94例ALS患者，依据不同治疗方案分为：利鲁唑组(31例)、依达拉奉组(32例)和对照组(未进行正规治疗的患者，31例)。收集患者的人口统计学及临床功能量表评分等资料。比较3组间临床资料，分析在不同药物治疗中两种量表的评分差异以及相关性。结果 采用标准化评分比较ALSFRS-R和AALS，结果提示基线两种量表评分呈显著负相关。ALS伦敦临床分期3期、4期患者中两种量表评分均呈显著负相关。利鲁唑组和依达拉奉组中两种量表评分反映的疾病严重程度在部分时间点上差异有显著性；对照组差异无显著性。3组的各时间点ALSFRS-R评分均较低。结论 ALSFRS-R与AALS在临床功能评估上差异有显著性，ALSFRS-R反映的疾病严重程度较轻。