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目的 研究特异小干扰RNA (small interfering RNA, siRNA)对宫颈癌HeLa细胞中人乳头瘤病毒(human papillomavirus, HPV)18型 E6基因的抑制及其对细胞凋亡的影响。方法 针对HPV18 E6 基因设计siRNA序列,经PCR方法体外扩增,得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物,利用LipofectamineTM2000脂质体转染HeLa细胞,在U6启动子的作用下于细胞内转录siRNA。针对转染后不同时间点采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力,流式细胞仪PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR测定HPV18 E6 mRNA变化。结果 转染siRNA后细胞活力受到显著抑制(P<0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,72h 的凋亡率达到55.8%。RT-PCR结果显示,细胞转染24、48和72h后HPV18 E6 mRNA分别减少了57%、78%和40%,而siRNA阴性对照与未转染细胞相比差异不显著。结论 siRNA可特异有效的干扰宫颈癌HeLa 细胞内HPV18 E6基因的表达,从而可诱导肿瘤细胞凋亡。 相似文献
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目的研究特异小干扰RNA(sm all interfering RNA,siRNA)对宫颈癌HeLa细胞中人乳头瘤病毒(hum an pap-illom avirus,HPV)18型E6基因的抑制及其对细胞凋亡的影响。方法针对HPV18E6基因设计siRNA序列,经PCR方法体外扩增,得到含有U6启动子以及siRNA序列的PCR产物,利用L ipofectam ineTM2000脂质体转染HeLa细胞,在U6启动子的作用下于细胞内转录siRNA。针对转染后不同时间点采用四唑盐(MTT)比色法测定细胞活力,流式细胞仪PI染色法检测细胞凋亡率,RT-PCR测定HPV18E6 mRNA变化。结果转染siRNA后细胞活力受到显著抑制(P<0.05),光镜下出现明显的凋亡形态,72 h的凋亡率达到55.8%。RT-PCR结果显示,细胞转染24、48和72 h后HPV18E6 mRNA分别减少了57%、78%和40%,而siRNA阴性对照与未转染细胞相比差异不显著。结论siRNA可特异有效的干扰宫颈癌HeLa细胞内HPV18E6基因的表达,从而可诱导肿瘤细胞凋亡。 相似文献
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目的:利用基因表达谱芯片研究青蒿素对体外培养的人红白血病K562细胞基因表达谱的影响.方法:青蒿素处理K562细胞24 h后,分别提取处理组和对照组细胞的总RNA,将两组RNA纯化为mRNA,逆转录成cDNA,用Cy3和Cv5两种不同的荧光染料进行线性扩增标记,与人全基因组基因表达谱芯片杂交,采用生物信息学方法分析青蒿素处理前后K562细胞基因表达谱的改变.结果:总共发现差异基因238个,其中上调基因136个,下调基因102个,并对其进行生物学功能分类.结论:应用全基因组表达谱芯片并结合Panther生物学软件分析差异表达基因,青蒿素作用K562细胞主要是通过细胞毒作用诱导细胞凋亡,而抑制细胞生长作用并不明显. 相似文献
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【目的】 探讨高容量血液滤过(HVHF)在肝移植术后因严重感染引起多器官功能障碍综合征(MODS)患者中的应用65377; 【方法】 分析2003年12月至2008年12月肝移植术后因感染引起MODS进行连续性血液净化治疗74例患者的临床资料,根据超滤率是否大于35 mL/kg/h分为HVHF组(49例)和连续性静脉-静脉血液滤过(CVVH)组(25例)65377;记录治疗前和治疗后24 h65380;48 h65380;72 h APACHⅡ评分65380;电解质65380;血流动力学和呼吸功能各项指标,以及临床转归65377;分别对组内治疗后各时间点与治疗前以及两组间各时间点之间的观察指标进行比较65377; 【结果】 HVHF组患者,APACHⅡ评分65380;乳酸65380;肌酐65380;心率65380;多巴胺用量65380;气道平均压和气道峰压65380;氧合指数等指标在治疗后24 h65380;48 h65380;72 h较治疗前明显下降(P < 0.05)65377;CVVH组患者,APACHⅡ评分65380;乳酸65380;气道平均压和气道峰压值治疗前后无明显变化(P > 0.05),心率65380;多巴胺用量和氧合指数虽较前有所改善,但程度均不如HVHF组(P < 0.05)65377;HVHF组死亡率为59.2%(29/49),CVVH组为84.0%(21/25),两者具有统计学差异(χ2 = 4.652,P = 0.031)65377;【结论】 HVHF通过维持机体内环境的稳定,为其他治疗创造有利条件,有助于提高肝移植术后危重患者的生存率65377; 相似文献
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人红白血病K562细胞是一株恶性程度较高的人红白血病体外细胞系,但在体外可被多种诱导剂诱导向红系终末分化,出现红系表征:停止分裂、表达珠蛋白基因产物、核固缩直至自然排核,因此已成为体外研究肿瘤细胞恶性表达调控的良好模型。本文就K562细胞红系分化的机制和研究进展作一综述。 相似文献
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目的:探讨甘草酸二铵对小鼠急性肝衰竭发生过程中小鼠肝组织高迁移率族蛋白 B1(HMGB1)表达的影响。方法取雄性昆明种小鼠72只,随机分为正常对照组、急性肝功能衰竭组及甘草酸二铵治疗组。模型组及治疗组予 D-Galn 500 mg/kg 及 LPS 10μg/kg 腹腔注射建立急性肝功能衰竭小鼠模型,并于建模1 h 后予以甘草酸二铵70 mg/kg 对治疗组小鼠进行灌胃处理,正常对照组及模型组予等量生理盐水灌胃。以建模后4,8,12,24 h分别取静脉血以常规生化方法检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总胆红素(TBIL)水平,HE 染色法检查肝组织病理学变化,采用免疫组织化学法及实时荧光定量 PCR 检测小鼠肝组织中 HMGB1的蛋白表达量及 mRNA 水平。结果模型组及治疗组小鼠血清 ALT 和 AST 水平均显著高于正常对照组(P <0.01),且模型4,8 h 组小鼠血清 ALT 和 AST 含量均高于相应治疗组(P <0.05),模型8,12,24 h 组及甘草酸二铵治疗12,24 h组小鼠血清 TBIL 水平均显著高于正常对照(P <0.05)。免疫组化结果发现,模型8,12,24 h 组及治疗8,12,24 h组小鼠肝组织中 HMGB1蛋白表达水平较相应正常对照组显著增加(P <0.01),且随肝衰竭发展明显增加,模型8,12 h 组 HMGB1蛋白表达量高于相应甘草酸二铵治疗组(P <0.05)。Real time-PCR 结果显示,模型组和治疗8,12,24 h 组小鼠肝组织 HMGB1 mRNA 表达量高于正常对照组(P <0.05),模型8 h、12 h 组 HMGB1 mRNA 表达量高于相应治疗组(P <0.05)。结论 HMGB1在小鼠急性肝功能衰竭过程中发挥了重要作用。甘草酸二铵可能通过抑制 HMGB1的产生减轻肝损伤。 相似文献
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目的评价髓样细胞触发受体(triggering receptor expressed on myeloid cells,TREM)-1用于监测肝移植术后感染的价值。方法 27例肝移植术后患者按临床转归分为非感染组(11例)、感染好转组(8例)和感染非好转组(8例)。比较三组在转入ICU48h内以及感染好转组和感染非好转组感染后48h内的外周血TREM-1、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)-α、乳酸水平变化。应用Pearson相关分析或Spearman等级相关分析来研究TREM-1与另两种指标的相关性,对有相关的指标利用受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线求出各指标的灵敏度及特异度。结果三组的TREM-1、TNF-α、乳酸组间各个时间点比较,差异均具有统计学意义(均为P〈0.05),且表达水平为感染非好转组〉感染好转组〉非感染组。感染好转组与感染非好转组的外周血TREM-1水平在发生感染前呈上升趋势,前组幅度平缓,后者升幅较大,且感染好转组外周血TREM-1水平于感染24h(高峰)后下降,而感染非好转组则持续升高。TREM-1与TNF-α、乳酸水平均呈正相关(均为P〈0.01)。三项指标之中,TREM-1灵敏度、特异度较高。结论监测转入ICU48h内的TREM-1水平可对肝移植术后患者的感染情况起到预警作用,TREM-1表达水平与肝移植术后患者感染的严重程度一致,可预测病情转归。 相似文献
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目的比较肝移植病区与非肝移植病区细菌菌种分布及耐药情况。方法对2008年1月1日至12月31日在中山大学附属第三医院肝移植病区和非肝移植病区住院患者的病原菌阳性标本进行分析。比较两个病区的菌株分布和耐药性。结果肝移植病区共检出菌株116株,其中革兰阴性(G-)杆菌占60.3%,革兰阳性(G+)球菌占39.7%。非肝移植病区共检出菌株1791株,G-杆菌和G+球菌分别占53.1%和46.9%。非肝移植病区检出的G-杆菌中,肠杆菌科细菌占57.2%,非发酵菌占32.2%;而肝移植病区非发酵菌占64.3%,肠杆菌科细菌占30%,两者差异有统计学意义(P〈0.01)。肝移植病区检出的大肠埃希菌和肺炎克雷伯菌中超广谱β-内酰胺酶(extended spectrumβ-lactamases,ESBLs)检出率明显高于非肝移植病区,分别为80.0%、51.1%,87.5%、48.9%(均为P〈0.05)。非肝移植病区未发现泛耐药G-杆菌,肝移植病区检出2株泛耐药的铜绿假单胞菌、1株鲍曼不动杆菌或溶血不动杆菌。非肝移植病区中1.9%肠球菌属对万古霉素耐药,肝移植病区为20%,比较差异有统计学意义(P〈0.01)。肝移植病区检出的3株金黄色葡萄球菌均为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,而非肝移植病区相应为41.6%。结论肝移植病区和非肝移植病区病原菌的菌种分布不同。与非肝移植病区比较,肝移植病区检出的病原菌耐药率明显增高。 相似文献