特异性人工抗原提呈细胞体外激活CD19嵌合抗原受体T细胞的构建

目的 构建CD19特异性人工抗原提呈细胞(aAPC)用于体外激活扩增CD19嵌合抗原受体(CAR)修饰T细胞(CD19-CAR-T),并考察其杀伤效应.方法 通过慢病毒介导的方法制备以NIH3T3为细胞骨架、表达共刺激分子CD86和/或CD137L的CD19特异性aAPC (NIH3T3-CD 19/86、NIH3T3-CD19/86/137L).采用照射的CD19特异性aAPC与CD 19-CAR-T细胞按一定比例混合培养激活扩增CD19-CAR-T细胞,台盼蓝染色法检测并绘制CD 19-CAR-T细胞生长曲线;流式细胞术检测CD19-CAR-T细胞CAR表达变化及分化表型;生物发光细胞毒性法检测扩增的CD19-CAR-T细胞体外靶特异杀伤效应.结果 流式检测结果显示NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞表面分别高表达CD19、CD86和/或CD137L分子;NIH3T3-CD19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞都能够高效扩增CD 19-CAR-T细胞,NIH3T3-CD19/86/137L细胞具有更好的扩增效应,其与CD19-CAR-T细胞混合培养14d后,扩增的T细胞数量明显高于NIH3T3-CD19/86细胞组(P＜0.05);同时,与刺激前相比NIH3T3-CD 19/86和NIH3T3-CD19/86/137L细胞刺激扩增的T细胞中CD19-CAR-T细胞比例显著增加(P＜0.05);扩增的CD 19-CAR-T细胞具有靶特异杀伤效应,能够特异性杀伤CD19阳性靶细胞;流式检测显示NIH3T3-CD19/86/137L扩增的CD19-CAR-T细胞含有约20％作用中心记忆性T细胞.结论 成功制备CD19特异性aAPC,其可在体外特异性扩增功能性CD 19-CAR-T细胞,为初步建立制备高质量临床级CD19-CART细胞的方法提供了技术支撑.     

K562 细胞为基础的人工抗原提呈细胞用于过继性免疫治疗的研究进展

过继性T 细胞治疗是目前肿瘤免疫疗法中最具发展潜力的治疗方法之一。过继性T 细胞治疗须首
先在体外制备抗肿瘤T 细胞,并选择性地扩增理想的T 细胞亚群,其目的是在癌症病人体内重建针对肿瘤的特
异性免疫反应,从而建立终身持久的免疫记忆。本文就K562 细胞为基础的aAPCs 及其应用于过继性T 细胞治
疗的研究现状和前景进行综述。     

B型尼曼-皮克病的临床、病理及影像学特点

0　引　　言Ｂ型尼曼 皮克病 (Ｎｉｅｍａｎｎ Ｐｉｃｋｄｉｓｅａｓｅ,ＮＰＤ)是一种罕见的遗传性磷脂代谢紊乱疾病 ,因神经鞘磷脂酶缺乏导致神经鞘磷脂异常沉积在身体各部[1] ,常常表现为肝、脾肿大 ,容易导致临床误诊。作者报告 1例Ｂ型尼曼 皮克病的临床、病理及影像学特点。1　病例报告患者 ,男 ,5 0岁 ,因脾肿大于 2 0 0 1 11 2 8入院。查体 :脾肋下 6ｃｍ ,心血管、呼吸系统和神经系统无异常 ,眼底镜检查正常。实验室检查示外周血白细胞和血小板计数偏低 ,分别为 3.8× 10 9/Ｌ和 83× 10 9/Ｌ ,血清三酰甘油浓度增高 ,达 2 .9ｍｍ…