推拿手法对家兔骨骼肌失神经支配后神经生长因子表达的影响

目的通过观察推拿手法家兔失神经支配骨骼肌干预后肌湿重、神经组织中神经生长因子(NGF)蛋白及信使RNA(mRNA)水平的变化,探讨推拿手法对受损神经及失神经支配骨骼肌的影响。方法新西兰家兔,随机分为3组:正常对照组、模型对照组、手法治疗组。分别于手法干预2周、3周、1个月、2个月、4个月后,每组各取6只家兔,称量肌湿重,计算术侧与健侧的肌湿重比值;测定NGF蛋白水平及NGF mRNA表达水平。结果 (1)腓肠肌肌湿重比:与正常组比较,模型组各时间点腓肠肌肌湿重比均明显下降(P 0. 01);与模型组比较,手法组各时间点肌湿重比均显著升高(P 0. 05)。(2)损伤神经NGF IHC法检测:造模后,与正常组相比,模型组神经组织NGF平均光密度(AOD)值各时间点均显著升高(P 0. 01);与模型组相比,手法组损伤神经NGF AOD值各时间点均显著升高(P 0. 01)。(3)损伤神经NGF mRNA qRT-PCR检测:造模后,与正常组相比,模型2周、3周组NGF mRNA水平均明显升高(P 0. 01),其余各时间点均降低(P 0. 01);与模型组相比,手法2周、3周组NGF mRNA水平有升高趋势,但无统计学差异,手法1个月、2个月、4个月组NGF mRNA水平升高,有统计学意义(P 0. 01)。结论推拿手法可以延缓周围神经损伤后骨骼肌萎缩、变性,促进损伤神经的修复。     

推拿手法对家兔骨骼肌失神经支配后成肌调节因子Myf-5、Myogenin表达的影响

目的观察推拿手法对家兔失神经支配骨骼肌干预后肌湿重、成肌调节因子中生肌因子5(Myogenic factor 5,Myf-5)、肌细胞生成素(Myogenin)表达的影响。方法普通级新西兰雄性家兔随机分为正常对照组、模型对照组、神经生长因子(nerve growth factor,NGF)治疗组和手法治疗组,每组30只。每组再随机分为2周、3周、1个月、2个月和4个月五个亚组,每组6只。模型对照组、NGF治疗组及手法治疗组家兔建立腓肠肌失神经支配模型,NGF治疗组给予肌注注射用鼠神经生长因子,手法干预组进行推拿干预,模型对照组及正常对照组不进行其他操作。分别干预后处死取材,称量腓肠肌肌湿重,计算术侧与健侧的腓肠肌肌湿重比值;检测腓肠肌组织Myf-5 mRNA、Myogenin mRNA表达水平。结果 (1)腓肠肌肌湿重比:NGF治疗组在2周(0.79±0.03)%、3周(0.70±0.06)%、1个月(0.58±0.04)%、2个月(0.44±0.05)%,手法治疗组在2周(0.72±0.05)%、3周(0.55±0.04)%、1个月(0.55±0.09)%、2个月(0.49±0.03)%、4个月(0.50±0.03)%高于模型对照组同期[2周(0.53±0.01)%、3周(0.41±0.03)%、1个月(0.40±0.03)%、2个月(0.38±0.05)%、4个月(0.38±0.05)%,P0.05]。手法治疗组在2周(0.72±0.05)%、3周(0.55±0.04)%低于NGF治疗组[2周(0.79±0.03)%、3周(0.70±0.06)%],4个月(0.50±0.03)%时则高于NGF治疗组(0.42±0.02)%(P0.05)。(2)腓肠肌Myf-5 mRNA表达:NGF治疗组在2周(18.50±1.79)、3周(12.52±0.58)、1个月(5.30±1.76)、2个月(2.82±0.23),手法治疗组在2周(20.48±2.20)低于模型对照组同期[2周(40.91±10.31)、3周(25.25±1.27)、1个月(13.91±1.40)、2个月(8.83±0.86),P0.05],手法治疗组在1个月(16.50±1.17)、2个月(12.20±0.84)、4个月(5.32±0.60)高于模型对照组[1个月(13.91±1.40)、2个月(8.83±0.86)、4个月(3.82±0.54),P0.05]。手法治疗组在3周(37.21±9.10)、1个月(16.50±1.17)、2个月(12.20±0.84)、4个月(5.32±0.60)时高于NGF治疗组[3周(12.52±0.58)、1个月(5.30±1.76)、2个月(2.82±0.23)、4个月(3.88±0.57),P0.05]。(3)腓肠肌Myogenin mRNA表达:NGF治疗组在2周(94.31±23.87)、3周(165.95±29.58)、1个月(156.59±64.76)、4个月(4.05±0.51),手法治疗组在4个月(5.74±1.35)低于模型对照组同期[2周(185.92±48.71)、3周(359.21±116.88)、1个月(597.50±146.66)、4个月(63.13±12.24),P0.05],手法治疗组在2个月(1026.75±132.63)高于模型对照组(168.84±31.85),P0.05]。手法治疗组在2周(209.80±91.25)、3周(482.37±97.95)、1个月(667.73±97.95)、2个月(1026.75±132.63)均高于NGF治疗组[2周(94.31±23.87)、3周(165.95±29.58)、1个月(156.59±64.76)、2个月(140.63±40.18),P0.05]。结论推拿手法可能通过改善成肌调节因子Myf-5、Myogenin表达来延缓失神经支配后骨骼肌的萎缩,远期疗效较NGF良好。     

裘昌林教授治疗难治性Meige综合征验案

介绍了一则裘昌林教授辨病辩证结合、中西药物共用治疗神经科顽疾的临床医案     

生酮饮食对癫痫大鼠海马的保护作用及机制研究

目的探讨生酮饮食（KD）对戊四氮（PTZ）点燃大鼠海马损伤及哺乳动物雷帕霉素钯蛋白（mTOR）通路表达的作用机制。方法将55只雄性SD大鼠隔日腹腔注射PTZ制作癫痫动物模型直至完全点燃,另5只大鼠（空白对照组）腹腔注射0.9%氯化钠溶液。完全点燃后的44只大鼠随机分成4组,即正常食物（ND）+PTZ组、ND+PTZ+雷帕霉素（RAP）组、KD+PTZ组、KD+PTZ+RAP组,每组11只,均予侧脑室置管并再次给予隔日腹腔注射PTZ,共5次;其中ND+PTZ+RAP组、KD+PTZ+RAP组给药前30min侧脑室注射RAP,ND+PTZ组、KD+PTZ组予以等量人工脑脊液。观察并比较5组大鼠癫痫发作等级,海马区神经元密度,海马区pS6、S6、pAkt、Akt、pAMPK、AMPK的表达（采用Westernblot法检测）。结果KD+PTZ组大鼠癫痫发作等级明显低于ND+PTZ组（P＜0.01）;KD+PTZ+RAP组发作等级明显低于ND+PTZ组及ND+PTZ+RAP组（均P＜0.05）。海马CA1区神经元密度：KD+PTZ组明显大于ND+PTZ组（P＜0.05）,KD+PTZ+RAP组大于ND+PTZ+RAP组（P＜0.05）,ND+PTZ+RAP组大于ND+PTZ组（P＜0.05）。与空白对照组相比,ND+PTZ组pS6/S6、pAkt/Akt蛋白表达增加（均P＜0.05）,其余4组pAMPK/AMPK蛋白表达均增高（均P＜0.05）;与ND+PTZ组相比,KD+PTZ组pS6/S6、pAkt/Ak蛋白表达均降低（均P＜0.05）,pAMPK/AMPK蛋白表达增高（P＜0.05）;与ND+PTZ组相比,ND+PTZ+RAP组pS6/S6、pAkt/Akt蛋白表达均明显降低（均P＜0.05）;与KD+PTZ组相比,KD+PTZ+RAP组pS6/S6、pAkt/Akt蛋白表达明显降低（均P＜0.05）;与ND+PTZ+RAP组相比,KD+PTZ+RAP组pS6/S6蛋白表达明显下降（P＜0.05）,pAMPK/AMPK增高（P＜0.05）。结论KD具有抗癫痫发作、减少神经元丢失的作用,这种保护作用可能与其对mTOR通路的抑制有关,且其上游可能通过抑制Akt通路的磷酸化、激活AMPK通路的磷酸化来调节mTOR通路。     

郁金提取物对CCI大鼠脊髓P-P38表达的影响

目的 探讨不同剂量郁金提取物对神经病理性疼痛模型慢性压迫性神经损伤(chronic constriction injury,CCI)大鼠痛阈及脊髓早晚期因子P-P38表达的影响及调节作用,并讨论郁金提取物对神经病理性痛的影响机制。 方法 选择成年健康雄性SD大鼠36只,体重250～294 g,建立CCI大鼠模型,将SD大鼠随机分为:正常组,模型组,郁金提取物低、中、高剂量组,加巴喷汀组和溶媒组,每组4只,对各组大鼠进行热缩足潜伏期测定,用蛋白免疫印迹(Western blot)法检测大鼠L₄～L₆脊髓的中早晚期因子P-P38表达。 结果 ①与正常组相比,造模后大鼠热缩足潜伏期(TWL)值显著下降(P<0.05),说明神经病理性模型造模成功;与溶媒组相比,郁金提取物高剂量组能显著上调CCI模型大鼠(Thermal withdrawal latency,TWL)值(P<0.01)。②造模后大鼠L₄～L₆脊髓的中早晚期因子P-P38表达灰度值与内参的比值成上升趋势,均较正常组显著增加(P<0.01);与溶媒组相比,郁金提取物高剂量组和加巴喷汀组能显著降低L₄～L₆脊髓的中早晚期因子P-P38的表达(P<0.01)。 结论 高剂量郁金提取物可能通过降低神经病理性疼痛CCI模型大鼠脊髓的中早晚期因子P-P38的表达而发挥抑制神经病理性疼痛的产生和发展。