呼吸道合胞病毒融合蛋白第168～289氨基酸片段的表达与纯化

目的:利用杆状病毒-昆虫细胞表达系统表达RSV融合蛋白中主要抗原性区域的片段(第168～289氨基酸)并纯化重组蛋白.方法:在人胚肺二倍体细胞2BS株上培养RSV Long株,从培养物中提取病毒总核酸.采用RT-PCR法从RSV基因组RNA中扩增出F基因546-881 bp片段(F'),F'插入到转移载体质粒pBacPAK9中再与线性杆状病毒BacPAK6 DNA(Bsu36I digested)共转染Sf9昆虫细胞.重组蛋白经镍离子柱螯合亲和层析纯化.经SDS-PAGE和Western-Blot鉴定重组蛋白.结果:外源基因在昆虫细胞中获得了表达,并通过其所带的信号肽分泌到了无血清培养基中.表达产物的分子量约为15×103,与理论值相符.结论:成功地用昆虫细胞表达系统表达了能分泌到培养基中的呼吸道合胞病毒F基因546-881 bp片段编码的融合蛋白第168～289氨基酸片段.     

血栓弹力图评价血小板花生四烯酸途径抑制率对血凝块形成的影响

目的了解血小板花生四烯酸途径抑制率对血凝块形成的影响及其与ADP受体途径抑制率的关系。方法联用阿司匹林和氯吡格雷的急性冠脉综合征80例,血栓弹力图测定血小板抑制率和花生四烯酸通道的α角、K时间、MA、TMA。结果花生四烯酸途径抑制率为（81.7±20.7）%,ADP受体抑制率为（65.9±25.3）%,α角为（48.2±15.9）°,MA为（20.8±14.2）mm,TMA为（13.8±7.5）min。随花生四烯酸途径抑制率增高,α角缩小,MA降低,TMA缩短,ADP受体抑制率增高（P〈0.05）,K时间延长并且无K时间病例增多。结论抑制血小板花生四烯酸途径不利于血凝块形成,随抑制率增高,血凝块形成减慢、强度变小;二条途径抑制率呈正相关。     

酚磺乙胺等药物对酶法测定肌酐的干扰及其防治对策探讨

[目的]研究酚磺乙胺等药物对酶法测定肌酐的干扰及防治对策。[方法]利用本院临床各科室在一个月中的有关病例的检测材料,用苦味酸法与酶法鉴别干扰的存在,并对材料进行整理分析。[结果]一个月中共检出70例存在负干扰现象。[结论]酚磺乙胺等几种药物对酶法测定肌酐有负干扰,并对其性质、范围、机理及防治对策进行了讨论。     

高岭土-血栓弹力图评价阿司匹林和氯吡格雷的抗血小板效果

目的用高岭土-血栓弹力图评价阿司匹林和氯吡格雷的抗血小板效果。方法观察组97例,联用阿司匹林和氯吡格雷;对照组22例,未服此二药。检测两组患者的高岭土-血栓弹力图;并检测观察组血小板抑制率。结果两组患者高岭土-血栓弹力图K时间、α角、MA和TMA均无差别（P〉0.05）,观察组R时间较短（P〈0.01）;两组患者K时间、α角、MA异常患者的发生率相似（P〉0.05）;根据观察组花生四烯酸途径抑制率做3分位亚组,低、中、高分位亚组的R时间、K时间、α角、MA和TMA值均无差别（P〉0.05）;ADP受体抑制率也有类似情况,但高分位亚组TMA较长（P=0.017）。花生四烯酸途径抑制率和ADP受体抑制率呈直线性正相关（r=0.486,P〈0.001）。结论高岭土-血栓弹力图评价阿司匹林和氯吡格雷抗血小板效果价值有限,阿司匹林对血小板花生四烯酸途径抑制率与氯吡格雷对ADP受体抑制率存在一定正相关。     

NK细胞与早发型重度子痫前期疾病进展的相关性研究

目的探讨自然杀伤细胞(natural killer cell,NK)与早发型重度子痫前期发生、发展的相关关系。方法选取2012年1月至2014年12月在北京潞河医院定期孕检的重度子痫前期患者44例(早发型重度子痫前期20例,晚发型重度子痫前期24例)为研究对象。选取同时期正常无合并症的患者20例为对照组。采集母亲外周血2 m L,胎儿脐带血2 m L及蜕膜组织。采用流式细胞学方法检测外周血和脐带血中的CD3-CD16-CD56+的百分率;蜕膜组织应用免疫组织化学方法,计算CD3-CD16-CD56+的数量取均值,应用计算机图像分析法读取CD56+细胞平均灰度值。结果重度子痫前期组外周血、脐血、蜕膜组织中的NK细胞数量高于对照组,差异有统计学意义(均P<0.05);早发型重度子痫前期组脐血、蜕膜组织中NK细胞数量高于晚发型重度子痫前期组,差异有统计学意义(P<0.05)。重度子痫前期外周血、蜕膜组织中的NK细胞数量与病程进展呈负相关(r=-0.397,P=0.040;r=-0.391,P=0.044),与血压升高幅度呈正相关(r=-0.597,P=0.001;r=-0.416,P=0.031)。蜕膜组织中的NK细胞数量与确诊重度子痫前期的孕周呈负相关(r=-0.594,P=0.003)。结论重度子痫前期患者外周血、脐血、蜕膜中NK细胞数量增加,早发型重度子痫前期增加更为显著。外周血、蜕膜中NK细胞数量与早发型重度子痫前期的发生、发展相关。     

多发性骨髓瘤患者骨髓中CD56和CD117水平表达对评估疾病预后的价值

目的　探讨多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)患者CD56和CD117表达在疾病预后评估中的价值。方法　选取2019年12月～2020年12月首都医科大学附属北京潞河医院32例初诊MM患者,根据骨髓中CD56和CD117表达,分为CD56+CD117+,CD56+CD117-,CD56-CD117+和CD56-CD117-四组,分别检测各组骨髓瘤细胞数、M蛋白含量和细胞遗传学结果;采用单因素方差分析CD56,CD117表达与骨髓瘤细胞数量、细胞遗传学结果在疾病预后判断中的意义。结果　CD56和CD117阳性率分别为62.5%和33.3%。CD56-CD117-组骨髓瘤细胞为36.6%±23.9%明显高于其他三组（5.5%±2.8%,12.1%±7.3%,24.4%±5.9%）,差异有统计学意义（F=4.061,P=0.022）。TP53阳性率在CD56-组（25%）显著高于CD56+组（14.3%）,差异有统计学意义（χ2=3.854,P=0.04）。CD117+组与CD117-组相比,TP53,1q21+,IGH融合阳性率比较差异无统计学意义（χ2=0.323~2.677,均P>0.05）。TP53和CCDN1/IGH阳性率在CD56-CD117-组（33.3%和50.0%）明显高于CD56+CD117+组（20.0%和40.0%）和CD56+CD117-组（11.1%和33.3%）差异均有统计学意义（χ2=6.036~14.579,均P<0.05）。结论　CD56-和CD117-MM患者肿瘤负荷较高,并且出现TP53缺失、CCND1/IGH融合和复杂核型等细胞遗传学异常风险较高,预后较差。     

呼吸道合胞病毒F蛋白第168～289氨基酸片段的昆虫细胞表达及其抗原性分析

目的 研究人呼吸道合胞病毒(RSV)F基因第546～881碱基编码的融合蛋白(即F蛋白)主要抗原性区域第168～289氨基酸片段的抗原性初步探讨其作为诊断抗原的应用价值.方法 用逆转录(RT)-PCR的方法扩增出RSV Long株F基因546～881 bp片段(F'),将其插入到转移载体质粒pBacPAK9中,获得相应的重组质粒pBacRSV F',与线性杆状病毒BacPAK6 DNA(Bsu36 Ⅰ酶切)共转染Sf9昆虫细胞获得重组病毒BacPAK F',并在昆虫细胞中表达.重组蛋白用Ni2+螫合柱亲和层析纯化,用免疫印迹(Western blot,WB)法检测重组蛋白的抗原活性.并用该方法检测33例急性下呼吸道感染患儿血清特异性抗体,同时用间接免疫荧光法检测患儿的鼻咽分泌物中RSV抗原.对两种方法检测标本的阴性率进行比较.结果 重组病毒BacPAK F'在昆虫细胞中表达相对分子质量约13 000的重组蛋白.纯化后的重组蛋白能与特异性抗RSV抗体结合.WB检测33例急性下呼吸道患儿血清特异性抗体,结果显示阳性11例,阳性率为33.3%,免疫荧光法检测结果阳性9例,阳性率为27.3%,2种检测方法阳性率差异无统计学意义(x2=0.29,P>0.05).结论 纯化后的在昆虫细胞中表达的RSV F基因546～881 bp片段编码的融合蛋白片段具有较强的抗原活性,对RSV感染的快速诊断具有一定的临床应用价值.     

免疫表型在鉴别急性早幼粒细胞白血病与HLA-DR阴性急性髓系白血病中的应用

摘要:目的探讨免疫表型 在急性早幼粒细胞白血病( APL)和HLA-DR阴性的急性髓系白血病( AML)之间的鉴别诊断中的价值。方法回顾性研究 2014年至2024年间收治的42例APL患者和28例初治及复发的HLA-DR阴性AML患者。通过流式细胞免疫表型分析,比较两组患者CD64、MPO、CD7、CD11e、CD9、CD123等抗原的阳性表达率。利用X2检验进行统计学分析,并应用ROC曲线评估CD9和CD123的表达模式,以及CD64*MPO* CD7-CD11c"对APL的诊断价值。结果AML 组患者的CD64、CD9、MPO阳性率显著低于APL组,而CD11c、 CD7阳性率显著高于APL组,差异具有统计学意义( P<0.05)。CD64* MPO* CD7-CD11e”的综合抗原积分表达模式在鉴别诊断APL方面的ROC曲线下面积( AUCROC)为0.859,敏感性为93.8% ,特异性为75.0% , CD9/CD123的鉴别诊断APL的AUCROC 为0.919,敏感性为83.3%,特异性为84.0%;而联合应用CD9/CD123和综合抗原积分的诊断模式,AUCROC为0.955,敏感性为83.3%,特异性为100%。结论CD9/CD123 表达模式及CD64* MPO* CD7~CD11e联合应用可作为鉴别诊断APL与HLA-DR阴性的AML的重要依据     

普通肝素抗凝时高岭土-血栓弹力图R时间目标值研究

目的探讨普通肝素抗凝时,高岭土-血栓弹力图R时间目标值。方法检测不同浓度肝素时血液aPTT和R时间。检测15例（21例次）肝素抗凝患者的高岭土-血栓弹力图R时间和肝素酶-血栓弹力图△R％,比较R时间和△R％判断肝素抗凝效果。结果肝素浓度在0-0．5u／ml,与aPTT、R时间均呈直线相关（P〈0．01）。aPTT为正常值2倍时,肝素浓度为0．10-0．22u／ml,肝素浓度在此范围内的R时间为13．9-22．3min。21例次肝素抗凝患者R时间为7．7±3．4min。肝素酶-血栓弹力图△R％为4．0±19．3％。R时间和肝素酶△R％判断肝素抗凝效果符合率为85．7％,无明显差别（P〉0．05）。结论肝素治疗并达到抗凝效果时,高岭土-血栓弹力图R时间目标值为13．9～22．3min（取整数14-22min）,约为R时间正常上限的1．5-2倍（R时间正常值为5-10min）。     

快速法测定血清脂质唾液酸

采用单一化学试剂法测定血清脂质唾液酸。此法快速、简便、呈色稳定；批内变异系数2．14％，批间变异系数3．6％，健康人群值66±12μg／ml．用于肿瘤诊断总阳性率为68．2％，特异性94．6％。该法特异性优于TSA测定，其建立有助于LSA更广泛地应用于临床。