基于转录组学探讨何首乌不同炮制品的肝细胞毒性作用机制

目的 探讨何首乌（Polygonum Multiflorum, PM）炮制后降低肝毒性的作用机制。方法 通过使用生何首乌（raw Polygonum Multiflorum, RPM）与制何首乌（processed Polygonum Multiflorum, PPM）处理L02肝细胞,采用CCK-8与EdU试剂检测L02肝细胞的细胞活力与增殖能力;运用转录组学技术分析正常组、RPM、PPM组之间的差异基因,并对差异基因进行富集分析,在此基础上采用Western blot和免疫荧光验证相关通路上关键蛋白的表达水平。结果 CCK-8和EdU实验中发现,与正常组相比,RPM组能够显著抑制肝细胞的细胞活力与增殖能力（P<0.01）,与RPM组相比,PPM组的肝细胞活力与增殖能力明显升高（P<0.01）。RNA测序结果发现,与正常组相比,RPM组有3449个上调基因、3793个下调基因。与RPM组相比,PPM组有3788个基因上调、3515个基因下调。将正常组与RPM组的差异基因和RPM组与PPM组的差异基因进一步取交集,得到6854个共同差异基因;GO分析类结果显示主要参与细胞杀...     

HPLC波长转换法同时测定白芥子饮片中2种活性成分含量

目的 建立HPLC波长转换法同时测定白芥子饮片中白芥子苷和芥子碱硫氰酸盐含量的方法。方法 对建立的高效液相色谱法进行方法学考察，并对收集的15批样品进行白芥子苷和芥子碱硫氰酸盐含量检测。色谱条件采用Kromasil C₁₈柱(5μm, 250 mm×4.6 mm),水(含0.08 mol/L磷酸二氢钾，A)-乙腈(B)作为流动相，梯度洗脱，流速为1 ml/min; 0～10 min检测波长为227 nm, 10 min以后为326 nm;柱温30℃;进样量5μl。结果 白芥子苷质量浓度在7.485～74.85μg/ml(R²=0.999 5,n=6),芥子碱硫氰酸盐质量浓度在0.864～8.64μg/ml范围内与峰面积线性关系良好(R²=0.999 2,n=6)。精密度、稳定性、重复性试验的RSD<2%;白芥子苷的平均加样回收率为107.99%,RSD为1.00%(n=6),芥子碱硫氰酸盐的平均加样回收率为106.42%,RSD为1.14%(n=6)。结论 本研究建立的高效液相色谱法操作简便、结果准确可靠，可用于同...