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改进ＰＣＲ技术的实验条件，使之快速、微量、简便。缩短反应时间，仅在３０ｍｉｎ完成，反应体系体积１０μｌ；试剂一步加入，使成本大为降低，缩短了扩增时间，保持了酶的高活性，提高了反应产物的特异性。利于临床的快速诊断。 相似文献
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王某,女,22岁,身高159 cm,体重55 kg,本校2000年级临床医学专业学生,山东籍. 本次入学体检时发现牙齿异常. 相似文献
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目的建立特异、灵敏的聚合酶链反应（ＰＣＲ）结合长臂光敏生物素探针杂交检测幽门螺杆菌（ＨＰ）的方法。方法用ＰＣＲ产物直接克隆并测序，以含ＨＰＤＮＡ序列的重组质粒外源片段为探针。用细菌培养、单纯ＰＣＲ和ＰＣＲ结合杂交（ＰＣＲ－Ｓｂ）检测经胃镜诊断为慢性胃炎、胃溃疡、十二指肠球部炎症、十二指肠溃疡的胃活检组织、唾液和粪便标本中的ＨＰ。结果检测胃活检标本７９份，ＰＣＲ－Ｓｂ阳性率为９９％，单纯ＰＣＲ及细菌培养的阳性率分别为９５％和６５％，ＰＣＲ－Ｓｂ的灵敏度达到１ｆｇ。唾液标本的检测阳性率为３５％，粪便标本的检测结果均为阴性。结论测序证实了ＰＣＲ扩增的正确性。ＰＣＲ结合长臂光敏生物素探针杂交是特异、灵敏、简便和对人体无害的检测ＨＰ的方法。 相似文献
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上文中叙述了从茜草提取物中分离出二个具有使正常狗外周血白细胞升高作用的甙——茜草酸甙Ⅰ及Ⅱ,但根据其光谱及化学数据还不能对其结构作出推断。为此,必须先经水解,分离出甙元或其衍生物,才能进行化学结构的分析。我们采用的分离流程见图1。依此分离出甙元及甙元的几种衍生物,进行化学结构的探讨。 相似文献
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聚合酶链反应快速检测绿脓杆菌的研究黄文杰，郭先健，马立人，刘耀清１．菌株：绿脓杆菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌标准菌株均由军事医学科学院微生物所提供。肺炎链球菌及流感嗜血杆菌标准株由中国生物制品药品鉴定所菌种保存中心提供。２．ＤＮＡ提取：（１）痰标本的... 相似文献
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致病性小肠结肠炎耶氏菌DNA多态性 总被引：1，自引：0，他引：1
探讨致病性小肠结肠炎耶氏菌（简称：耶氏菌）DNA分子遗传特征。用聚合酶链反应（PCR）、DNA序列分析、随机扩增多态性DNA（RAPD）检测致病及非致病性耶氏菌10株。耶氏菌0：3、0：9、0：5，27血清型均含有致病基因粘附侵袭位点（ail),DNA指纹图谱也极其相似，与非致病型耶氏菌完全不同。然而，非致病性耶氏菌0：22血清型也含有ail基因，DNA指纹图谱在分子构像上部分与致病血清型相似。致病性耶氏菌具有相似的分子遗传特征，并表现为多态性。O：22血清型与致病性耶氏菌存在较近缘的种系进化关系。可能存在潜在致病性。 相似文献
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骨髓移植受体由于免疫抑制或免疫缺陷诱发人巨细胞病毒感染常常造成移植失败。应用套式ＰＣＲ对骨髓移植３３例受体和９８例供体检测发现，受体人巨细胞病毒的感染率（７５．８％，２５／３３）明显高于普通正常人（５７％，５６／９８），移植后４０天可达９３．９％（３１／３３），呈感染上升趋势。结果提示有必要在ＢＭＴ时对供受体进行人巨细胞病毒感染检测，便于ＢＭＴ术前选择和术后治疗，以提高移植的成功率。 相似文献
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聚合酶链反应直接检测粪便中志贺氏菌和侵袭性大肠杆菌 总被引：8，自引：2，他引：8
为探讨聚合酶链反应（ＰＣＲ）在腹泻病快速诊断的实用性，应用ＰＣＲ和长臂光敏生物素标记福氏２ａ的特异ＤＮＡ片段作探针，Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交法，检测志贺氏菌和侵袭性大肠杆菌（ＥＩＥＣ）共有的侵袭相关性基因（ｉａｌ），９株志贺氏菌和２株ＥＩＥＣ均存在特异的３２０ｂｐＤＮＡ片段。最小检测菌量为１００菌落形成单位（ｃｆｕ）。１９株非志贺氏菌均阴性。检测５８份粪标本，ＰＣＲ２３份阳性（３９．６％），粪培养１８份阳性（３１％）。全部实验，包括ＤＮＡ粗提取，仅需６～７小时。结果表明其敏感性高于粪培养，ＰＣＲ操作简便、快速、敏感、结果可靠，适用于腹泻病的快速诊断。 相似文献
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幽门螺旋杆菌（Ｈｐｙ）是急性胃炎和大多数慢性胃炎的病原菌，与胃、十二指肠溃疡的病理改变关系密切，与胃癌也有很高的相关性。对Ｈｐｙ清除不彻底是胃及十二指肠疾病复发的重要原因之一，所以检测微量、残存的Ｈｐｙ有着重要的临床意义。本文建立ＴＨｐｙ的ＰＣＲ检测技术，用ＰＣＲ产物直接克隆构建重组质粒ｐＨＰ０１，测序证实了ＰＣＲ扩增的正确性，并用常见的胃肠道细菌证实了扩增的特异性。建立了ＰＣＲ微量快速扩增法，最低可检出Ｈｐｙ基因组ＤＮＡ１００ｆｇ，用长臂光敏生物素标记探针进行转印杂交检测Ｈｐｙ的ＰＣＲ产物，检… 相似文献
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应用本室建立的聚合酶链反应（PCR）系统，利用20bp与21bp的一对特异寡核苷酸引物介导，扩增HBV-X基因区400bp片断，经凝胶电泳，紫外分析以及Southern印迹杂交表明，扩增产物正确，效果满意。 相似文献