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1.
目的 研制一种以单抗Fab′片段为基础的抗肿瘤导向药物。方法 制备单抗 3A5Fab′片段及其与平阳霉素 (PYM )偶联物Fab′ PYM后 ,测定Fab′ PYM与肿瘤细胞的免疫反应性、偶联物中PYM的抑菌活性、对肿瘤细胞的杀伤作用和体内抑瘤作用。结果 Fab′及Fab′ PYM保持了与靶细胞C2 6的免疫反应性 ;偶联物中PYM的抑菌活性为游离PYM的 15 % ;Fab′ PYM对C2 6细胞的杀伤作用强于PYM ;对非靶细胞KB的杀伤作用与PYM相似 ;ip和iv给药 ,Fab′ PYM对小鼠皮下接种的肠癌 2 6生长抑制作用均强于 3A5 PYM和PYM。结论 Fab′ PYM具有比PYM及 3A5 PYM更强的体内外抗肿瘤作用 相似文献
2.
目的观察抗肿瘤抗生素云南霉素对人肝癌HepG,细胞凋亡的影响。方法体外培养人肝癌细胞株HepG,,MTT法检测云南霉素对细胞增殖的影响,Hoechest33342法检测细胞凋亡的形态变化,Western blotting法检测凋亡相关蛋白PARP的表达,AnnexinV—FITC/PI双染结合流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果云南霉素对HepG2细胞增殖抑制的Ic,。值为24.13μmoL/L;HepG2细胞经云南霉素作用24h后,可诱导胞内凋亡标志蛋白PARP的切割,并随浓度的增高而作用增强;而HepG2细胞经云南霉素作用48h后,可出现典型的凋亡形态变化,呈剂量依赖性引起细胞凋亡。结论云南霉素可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖,诱导细胞发生凋亡。 相似文献
3.
抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其F(ab′)_2与Fab′片段的抗肿瘤作用 总被引:1,自引:0,他引:1
目的研究抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其F(ab′)2、Fab′片段对小鼠肝癌22(H22)及小鼠Lewis癌肺转移的治疗作用。方法ELISA实验检测3G11及其片段与多种肿瘤细胞及Ⅳ型胶原酶的免疫反应性,明胶酶谱法测定其对HT-1080细胞分泌Ⅳ型胶原酶活性的影响,MTT法测定其对H22细胞的细胞毒作用。用小鼠肝癌22及小鼠Lewis肺癌模型评价单抗3G11及其片段抑制肿瘤生长及抗肿瘤转移活性。结果单抗3G11及其片段对多种肿瘤细胞及Ⅳ型胶原酶均呈阳性反应,单抗3G11抑制肿瘤细胞HT-1080分泌Ⅳ型胶原酶的活性。单抗3G11对H22细胞有微弱的细胞毒作用。单抗3G1130mg/kg对小鼠移植性肝癌的抑制率为51·8%,F(ab′)210mg/kg为49·9%,Fab′20mg/kg为39·3%。F(ab′)2片段10mg/kg对小鼠Lewis癌肺转移的抑制率为76%。结论抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其片段对小鼠移植性肝癌22生长以及对小鼠Lewis癌肺转移有中度抑制作用,可能用于研制抗体靶向药物。 相似文献
4.
目的 研究靶向EGFR/HER-2的融合蛋白Ec-LDP-Hr及其烯二炔强化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE对结肠癌的抗肿瘤活性.方法 ELISA和细胞免疫荧光法鉴定融合蛋白与结肠癌HCT-15的结合活性.克隆形成实验和MTT法检测Ec-LDP-Hr对结肠癌HCT-15细胞的增殖活性影响,并用Western blot法检测EGFR/HER-2的表达量改变.用MTT法和流式细胞术检测强化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE对HCT-15的细胞毒性及诱导凋亡情况.体内实验研究融合蛋白Ec-LDP-Hr、强化形式Ec-LDP-Hr-AE及其联合对裸鼠结肠癌移植瘤的抑瘤效果.结果 结肠癌HCT-15、HCT-116和HT-29细胞都显示较高的EGFR和HER-2表达量.融合蛋白Ec-LDP-Hr能与结肠癌HCT-15细胞结合,并可通过下调靶点EGFR/HER-2的表达从而抑制HCT-15细胞的克隆形成和细胞增殖.强化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE对HCT-15有很强的细胞毒作用,并且在低浓度下即可诱导细胞的凋亡.动物实验结果显示融合蛋白和强化融合蛋白对结肠癌HCT-15裸鼠移植瘤的抑瘤率分别为和37.6%和56.7%,两者联合可提高抑瘤率至71.4%.结论 靶向EGFR/HER-2的双特异性融合蛋白Ec-LDP-Hr对结肠癌HCT-15的裸鼠移植瘤有一定的抑瘤作用,联合强化融合蛋白Ec-LDP-Hr-AE能提高抗结肠癌疗效. 相似文献
5.
目的观察抗肿瘤抗生素云南霉素对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响。方法体外培养人肝癌细胞株HepG2,MTT法检测云南霉素对细胞增殖的影响,Hoechest33342法检测细胞凋亡的形态变化,Western blotting法检测凋亡相关蛋白PARP的表达,AnnexinⅤ-FITC/PI双染结合流式细胞仪检测细胞的凋亡率。结果云南霉素对HepG2细胞增殖抑制的IC50值为24.13μmol/L;HepG2细胞经云南霉素作用24h后,可诱导胞内凋亡标志蛋白PARP的切割,并随浓度的增高而作用增强;而HepG2细胞经云南霉素作用48h后,可出现典型的凋亡形态变化,呈剂量依赖性引起细胞凋亡。结论云南霉素可抑制人肝癌细胞株HepG2的增殖,诱导细胞发生凋亡。 相似文献
6.
平阳霉素与单克隆抗体3D6及其Fab'片段偶联物对肝癌的实验治疗 总被引:3,自引:1,他引:2
单抗3D6是抗IV型胶原酶单克隆抗体。以葡聚糖T-40(DxtranT-40)为中介体制备3D6和平阳霉素(PYM)的偶联物3D6-PYM。采用间接ELISA法、TTC抑菌效价检测法,克隆形成法,MTT法及动物移植性肿瘤模型测定偶联物的生物学活性与体内外抗肿瘤作用。实验表明,3D6-PYM偶联物与PG、KB、C26及H22细胞等于免疫学阳性反应;3D6-PYM偶联物对BEL-7402、B和H22细胞的细胞毒作用强于游离PYM。应用小鼠移植性肝癌模型观察偶联物对肝癌生长的抑制作用及长期疗效。结果显示,3DY-PYM偶联物对肿瘤生长有较强的抑制作用且在体内作用时间延长,发挥较好的疗效。第21天时,按100mg/kg剂量比较,3D6-PYM偶联物、3D6与PYM混合物及PYM的抑瘤率分别达到99.7%、95.6%、81.5%,停止治疗后,继续观察各组动物的生存时间,对照组的中位生存期脒38d,按10mg/kg剂量比较,3D6-PYM偶联物组、3D6与PYM混合物组以及PYM组的中位生存期分别为>120、88和54d。120d时,3D6-PYM偶联物10mg/kg组未见动物死亡。以β-环糊精为中介体制备单抗3D6 Fab′片段与PYM偶联物Fab′-PYM,小鼠移植性肝癌模型皮下接种后第7天给药,Fab′-PYM偶联物组与PYM抑瘤率分别为81.0%和29.1%,以上研究结果表明,3D6-PYM及Fab′-PYM偶联物具有比游离PYM更强的抑制肝癌生长作用,特别是长期观察,其差别更为显著。 相似文献
7.
采用辛酸-硫酸铵沉淀法从大鼠杂交瘤腹水中纯化大鼠抗人肝癌BEL-7402细胞单克隆抗体3A5,纯度大于90%,抗体类型为IgGI型,与人肝癌BEL-7402细胞及小鼠结肠癌C-26细胞均有强免疫反应性.为探讨Fab’片段制备方法,首先分别以胃蛋白酶、菠萝蛋白酶和无花果蛋白酶消化3A5,结果表明3种酶均可使3A5酶解产生F(ab’)_2,其中以胃蛋白酶法在合适的反应条件下产生的F(ab’)_2产率较高,与BEL-7402细胞的免疫反应性为完整抗体的60%.在此基础上,以二巯基苏糖醇(DTT)还原F(ab’)_2并以DE-52纯化可以得到保留了抗体绞链区巯基的Fab’片段,可用于药物的定向偶联,其与BEL-74O2细胞的免疫反应性约为完整抗体的20%.以葡聚糖T-40(DextranT-40)为中介体,将Fab’与抗肿瘤抗生素平阳霉素相偶联,制得偶联物.偶联分子比为1:50.氯代三苯基四氟唑(TTC)抑菌效价检测法测定偶联物中平阳霉素 相似文献
8.
目的:建立LEICA Q500IW图象分析方法对小鼠结肠癌肝转移进行定量分析,并评价博安霉素对小鼠结肠癌肝转移的疗效,方法:建立小鼠结肠癌26例脾内移植肝转移模型,利用LEICA Q500IW图象分析系统对肝转移组织切片进行定量分析,获得转移病变面积的百分率,通过计算机处理数据,并评价博安霉素对小鼠结肠癌肝转移的疗效。结果:博安霉10mg.kg^-1,7.5mg.kg^-1,5mg.kg^-1对于肝切片中的转移病变总面积的抑制率为100%,98.2%和63.3%,对于表浅肝转移面积的抑制率为100%,100%和61.7%,对于深部肝转移的抑制率为100%,94.7%和39.3%,结论:应用LEICA Q500IW图象分析系统来定量分析肝转移组织切片中的转移病变,对判断肝转移更为准确,评价药物的疗效,特别是对深层病变的疗效。 相似文献
9.
目的 研究抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其F(ab’)2、Fab’片段对小鼠肝癌22(H22)及小鼠lewis癌肺转移的治疗作用。方法 ELISA实验检测3G11及其片段与多种肿瘤细胞及Ⅳ型胶原酶的免疫反应性,明胶酶谱法测定其对HT-1080细胞分泌Ⅳ型胶原酶活性的影响,MTT法测定其对H22细胞的细胞毒作用。用小鼠肝癌22及小鼠Lewis肺癌模型评价单抗3G11及其片段抑制肿瘤生长及抗肿瘤转移活性。结果 单抗3G11及其片段对多种肿瘤细胞及Ⅳ型胶原酶均呈阳性反应,单抗3G11抑制肿瘤细胞HT-1080分泌Ⅳ型胶原酶的活性。单抗3G11对H22细胞有微弱的细胞毒作用。单抗3G1130mg/kg对小鼠移植性肝癌的抑制率为51.8%,F(ab')210mg/kg为49.9%,Fab’20mg/kg为39.3%。F(ab’)2片段10mg/kg对小鼠lewis癌肺转移的抑制率为76%。结论 抗Ⅳ型胶原酶单抗3G11及其片段对小鼠移植性肝癌22生长以及对小鼠lewis癌肺转移有中度抑制作用,可能用于研制抗体靶向药物。 相似文献
10.
苦参碱联合顺铂抗肝癌的实验研究 总被引:1,自引:4,他引:1
目的:研究苦参碱和顺铂联合应用抗肝癌的疗效及增效机制。方法:体外实验采用MTT试验观察苦参碱和顺铂联合应用对肝癌细胞Hep G2增殖的影响;体内实验采用裸鼠移植性人肝癌观察二者联合应用对肝癌的抑制情况。结果:体内外实验结果均表明,苦参碱和顺铂联合用药对人肝癌的抑制率显著提高,而毒副作用明显减轻,CDI≤0.75。结论:苦参碱和顺铂联合用药抗肝癌有协同增效的作用。 相似文献