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目的通过优化复性液的组成、pH值、稀释度等,建立幽门螺杆菌细胞毒素相关基因A(cytotoxin associated gene A,cagA)表达产物的制备级复性及纯化方法。方法以包涵体形式存在的cagA表达产物先用5mL/LTritonX-100进行初步纯化,使其纯度达到约90%;再用含8mol/L脲的变性剂溶解包涵体,用复性液[0.1mol/LTris-HCl、2mmol/L乙二胺四乙酸(EDTA)、0.1mmol/L氧化型谷胱甘肽(GSSG)、8mmol/L还原型谷胱甘肽(GSH)及50mmol/L精氨酸(Arg),pH8.0]稀释复性后,用DEAE-HP阴离子交换色谱进行纯化。结果用稀释法复性及液相色谱法纯化,一次可得到100~140mg的cagA。ELISA检测其抗原活性为1∶16000;SDS-PAGE检测纯度为98%。结论用制备级复性、纯化制备的cagA,可作为抗原用于制备检测抗幽门螺杆菌抗体的检测芯片,效果良好,并已获得国家新药批文。 相似文献
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目的探讨组蛋白修饰与人脑星形细胞瘤发生及病理分级的关系。方法选取西京医院神经外科2006年至2008年经病理证实的星形细胞瘤患者肿瘤组织标本67例和正常脑组织标本10例,通过免疫组化方法,检测组蛋白3个位点(H3K4diMe、H4K12Ac、H3K18Ac)的修饰水平。结果在正常脑组织中组蛋白3个位点均无修饰;在星形细胞瘤中均有修饰,有2个位点(H3K4diMe、H4K12Ac)的修饰水平随星形细胞瘤病理级别的增高而升高,且呈现明显差异(P〈0.05),但H3K18Ac的修饰水平并末随肿瘤病理级别的增高发生显著变化。结论组蛋白修饰与人脑星形细胞瘤的发生有关,且修饰水平的变化与病理级别相关。 相似文献
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胶质细胞瘤是中枢神经系统最常见的原发性肿瘤,发病率约占颅内肿瘤的57%,其侵袭性生长特性往往是患者肿瘤复发、预后欠佳、治疗失败和死亡的首要原因。由于侵袭的肿瘤细胞可逃避手术切除、放疗和化疗的治疗作用,因而越来越多的学者开始致力于胶质细胞瘤侵袭的分子生物学机制研究,探索可能的分子医学治疗靶点,以期寻求能够有效治疗该类肿瘤的新方法。本文对胶质细胞瘤侵袭性有关的分子生物学机制及相应分子靶向治疗的研究进展作一综述。 相似文献
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目的:探讨参芍口服液对创伤性脑损伤后小鼠神经炎性反应的影响及作用机制。方法:54只C57小鼠随机等分为假手术组(Sham组)、创伤性脑损伤组(TBI组)和参芍口服液组(SS组),采用限制性皮层损伤的方法对TBI组和SS组小鼠进行损伤手术,造模6 h后,SS组给予5 ml参芍口服液灌胃干预,Sham组和TBI组用等量0.9%氯化钠溶液灌胃,持续7 d。采用mNSS评分对各组小鼠的神经功能进行评估,TUNEL法检测细胞的凋亡情况,酶联免疫吸附实验测定脑组织中炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、IL-18的含量,用蛋白印迹法检测脑组织内NRLP3、Caspase-1的表达水平。结果:伤后1、3、7 d,对比Sham组,TBI组的mNSS评分明显升高(均P<0.05),皮层损伤区神经元凋亡率明显增加(均P<0.05);SS组的mNSS评分明显低于TBI组(P<0.05),皮层损伤区神经元凋亡率也较TBI组明显减少(P<0.05);相比Sham组,伤后7 d, TBI组的炎症因子(IL-18、TNF-α、IL-1β)的表达均上升(均P<... 相似文献
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