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rhTPO在大肠杆菌中的表达、纯化及生物活性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
目的:探讨人促血小板生成素(human thromlbopoietin,hTPO)在大肠杆菌中表达、分离纯化及生物学活性初步鉴定。方法:利用RT-PCR法从人胎肝细胞中扩增目的基因片段,将其定向插入pQE30表达质粒T5启动子下游的多克隆区,转化大肠杆菌M15,得到pQE30-TPO的工程菌,诱导目的蛋白表达、纯化。将表达产物给血小板减少模型小鼠尾静脉注射,观察注射后不同时间血小板量的改变。结果:经异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(isopropylthio-β-D-galactoside IPTG)诱导培养,该工程菌可以产生单一特异性的高表达蛋白条带。将纯化后的表达蛋白注射小鼠,结果显示对实验性小鼠血小板减少症具有一定的治疗作用。结论:在大肠杆菌中成功地高效表达了重组hTPO,该产物具有促血小板生成的活性。 相似文献
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研究了10例正常人和29例急性淋巴细胞性白血病(急淋)患者外周血糖皮质激素受体高、低亲和力结合位,或(GCRH、GCRL),利用Ru38486对GCRL进行封闭,对部分患者GCRH、GCRL在激素联合化疗前后水平的变化进行了动态观察。结果表明,正常对照组GCRH、GCRL分别为4608±1889位点/细胞和135238±88509位点/细胞,两者相关良好。急淋患者GCRH、GCRL分别为6052±3888位点/细胞和126405±102133位点/细胞,经过糖皮质激素药物联合化疗后,其水平分别为3616±1962位点/细胞和143597±112289位点/细胞,GCRH下降明显(P<0.01),下降率为40.3%;而GCRL化疗前后差异不显著(P>0.05)。提示GCRL在介导糖皮质激素联合化疗疗效的维持中起重要的作用。 相似文献
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采用~3H-Spiperone作放射性配体,测定了兔纹状体细胞膜多巴胺受体的特异性结合特性,证明特异性结合可达饱和状态,并有两种不同的结合位点。作者用该受体蛋白建立了测定血清中氟哌啶醇的放射受体分析法,最小可测浓度为1.8±0.5ng/ml,批内和批间变异系数分别为6.5%和10.54%。放射受体法测定的结果与高压液相测定的结果密切相关,因前者测定的是血清中游离的氟哌啶醇,后者测定血清中氟哌啶醇的总浓度,故前者测定值低于后者。 相似文献
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一般不主张在唾液腺区作活检,造影也只有20—60%的可能性确定唾液腺包块的性质,因此唾液腺扫描作为一种安全简便的辅助诊断方法是很有价值的,特别是冷结节和热结节的意义更大。 相似文献
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观察153例8~16岁肥胖症患者空腹血糖、总胆固醇、甘油三脂的变化,检测了血清生长激素、血清总T_3、T_4、TSH,胰岛素、C肽和胰高糖素的含量,并研究了它们之间的关系。与141例健康儿童对照实验比较,证明肥胖儿呈高脂血症,空腹血糖正常。高脂血症与胰岛素增高、生长激素低下相关;与正常对照组相比,甘油三脂、胰岛素明显增高,P<0.01,生长激素明显降低,P<0.01。 相似文献
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为从糖皮质激素受体(GCR)角度探讨小柴胡汤治疗肾病综合征(NS)的机理,应用放射配体结合分析法测定人外周血白细胞GCR水平。结果表明,单独使用小柴胡汤可减少NS患者24h尿蛋白量,但降低蛋白作用缓慢;在用激素后加用小柴胡汤,NS患者24h尿蛋白量可进一步减少。小柴胡汤和激素均能使患者GCR水平明显下降(P<0.01),提示小柴胡汤具有糖皮质激素(GC)样作用;患者在应用激素治疗有效后开始减量,蛋白尿回升时,加用小柴胡汤,患者GCR水平明显回升(P<0.01),提示小柴胡汤对GCR具有双向调节作用 相似文献
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目的 :探讨肾素 -血管紧张素 -醛固酮系统、内皮素、一氧化氮在肾血管性高血压病人、肾上腺腺瘤病人中的作用和意义。方法 :采用放射免疫分析的方法测量所收集的经临床验证的肾血管性高血压病人(30例 )、肾上腺腺瘤病人 (35例 )和正常人 (35例 )的血清中肾素 (PRA)、血管紧张素Ⅱ (AⅡ )、醛固酮 (ALD)、内皮素 (ET)的含量 ,用酶法测定上述人群中的一氧化氮合酶 (Nitricoxidesynthase ,NOS)的含量来表示NO的量。结果 :对照组肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、内皮素、NOS分别为 (1 0 4± 0 90ng ml h ,71 0 6± 16 18pg ml,14 4 77±32 5 7pg ml,4 5 86± 2 0 85pg ml,32 2± 4 6 1U ml)。肾血管性高血压病人的血清中的肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、内皮素的含量分别为 (7 5 3± 2 2 3ng ml h ,14 4 77± 6 8 4 5pg ml,2 6 1 0 7± 73 0 3pg ml,96 72± 31 36pg ml)高于正常人 ,p <0 0 1,NOS(2 8 8± 6 14U ml) ,低于正常人 ,差别显著。肾上腺腺瘤病人肾素、血管紧张素Ⅱ、醛固酮、内皮素、NOS的含量分别为 (0 5 5± 0 4 7ng ml h ,5 1 85± 17 5 8pg ml,2 4 7 0 3± 84 0 3pg ml,81 83± 2 8 38pg ml,32 34± 9 0 2U ml) ;醛固酮、内皮素高于对照组 ,p <0 0 1,肾素、血管紧张素Ⅱ小于对 相似文献
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作者建立了外周血淋巴细胞亚群分类免疫放射自显影法,并用此法对20例急性期格林-巴利综合征(GBS)和10例恢复期GBS患者的外周血T淋巴细胞亚群分析,显示急性期患者OKT_8为16%±2.49,明显低于恢复期患者(20.7±2.67)及正常健康人(21.4%±4.21),P<0.01;而OKT_(11),OKT_4在两组间无显著性差异,P>0.05。 相似文献