PCR技术检测DMD/BMD的策略和方法

假肥大性肌营养不良 (ＤＭＤ/ＢＭＤ)是由营养不良性基因突变引起的Ｘ 连锁性疾病。应用分子遗传学分析方法检测突变 ,在常规诊断实验中很难实现 ,主要是由于基因的大小和结构所决定的。这段基因长度为 2 4Ｍｂ ,包括 79个外显子 ,这些外显子由 14ｋｂ的ｍＲＮＡ编码。每个外显子均 <2 0 0ｂｐ ,而内含子却在 10 9ｂｐ到 2 0 0ｋｂ以上变化不等。由于发生新突变 (约占ＤＭＤ的 1/ 3) ,基因重组率高于正常水平 (约 10 % ) [1 ] 以及种系镶嵌现象 ,进一步阻碍了其研究[2 ] 。1　策　略建立一套固定的基因诊断程序来分析所有的ＤＭＤ/ＢＭＤ是…     

两种白细胞形态改变在肾综合征出血热早期诊断中的意义

肾综合征出血热(HFRS)早期临床表现复杂,误诊率高,常因误治而使病情恶化.在基层医疗单位寻找简便可靠的早期诊断方法对提高HFRS治愈率具有重要意义.凤台地区是我省HFRS的主要高发区之一[1].我们在临床实践中观察到HFRS患者血片中两种白细胞的形态改变对HFRS早期诊断和鉴别诊断具有较高的参考价值.现报告如下.     

重组人酸性成纤维细胞生长因子促进烧伤与创伤愈合作用研究

目的观察重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)对小型猪创伤修复和家兔烫伤创面修复的促进作用。方法建立小型猪创伤模型，其中3组分别按90，60，30 AU·(cm2) 1的剂量给予人碱性成纤维细胞生长因子（haFGF），阳性对照组按60 AU·(cm2) 1的剂量给予rhbFGF，阴性对照组给予等量基质，空白对照组不给予任何药物，采用创面照像和透明膜描记称量法记录伤后第4，8，14天创面面积，用注水法测量伤腔容积。观察伤后第8天和第14天创面肉芽组织生长与再上皮化变化，评价修复效果。另建立家兔烫伤创面模型，分组与给药方法同上。观察伤后3，7，14，21 d创面面积，以及伤后14，21 d创面肉芽组织生长与再上皮化变化情况，评价修复效果。结果各组小猪创面面积随伤后时间的延长逐渐缩小，其中rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组小猪的疗效更显著。各组小猪创面伤腔容积随伤后时间的延长而逐渐缩小，其中rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组更为明显（P＜0.05）。组织学检查，可见经rhaFGF和rhbFGF治疗8 d后小猪的创面成纤维细胞生长活跃，数量多，毛细血管胚芽与成纤维细胞数量显著多于对照组。伤后第14天，各组家兔创面均已愈合，但各rhaFGF治疗组和阳性对照组家兔的创面表皮层较厚。各组家兔烫伤创面面积随伤后时间的延长而逐渐缩小，其中以rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组和hbFGF 60 AU·(cm2)^-1组的效果更明显。组织学检查，可见rhaFGF 90 AU·(cm2)^-1组家兔的创面在伤后14 d大部分已被新生表皮覆盖，表面附着少量坏死组织，创面基本愈合。结论rhaFGF对小型猪背部刀伤创面有促修复作用，可促进创面肉芽组织生长、毛细血管胚芽形成与再上皮化。rhaFGF对家兔背部烫伤创面有促修复作用，可促进创面肉芽组织生长，还可以促进坏死组织脱落与再上皮化。     

从雄激素受体及其活化因子角度探讨多囊饮对多囊卵巢模型大鼠卵泡发育及子宫内膜容受性的影响

目的：探讨多囊饮对雄激素致不孕多囊卵巢(PCO)模型大鼠卵泡发育、子宫内膜容受性的影响及其作用机制。方法：取225只雌性成年SD大鼠随机分为造模组180只与正常组45只,造模组大鼠采用一次性皮下注射丙酸睾酮注射液法建立PCO大鼠模型,正常组注射等量溶剂中性茶油。造模成功后将造模组大鼠随机分为模型组、阳性药物组(枸橼酸氯米芬片每日100 mg/kg)、多囊饮大剂量组(多囊饮每日68.66 g/kg)、多囊饮小剂量组(多囊饮每日34.33 g/kg),每组45只。多囊饮各剂量组每日分别按规定剂量灌胃,连续给药10 d;阳性药物组参照人的用药方法,每个动情周期灌胃给药2 d,余3 d予等体积生理盐水,共给药2个动情周期;模型组和正常组每日予等体积生理盐水灌胃,连续10 d。于开始给药或生理盐水后的第11天各组随机取15只大鼠腹股沟静脉丛采血,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测血清睾酮(T)、卵泡刺激素(FSH);取子宫内膜组织,反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测雄激素受体(AR)及辅助活化因子雄激素受体相关蛋白70(ARA70)、可溶性补体受体1型(SCR1)、SRC羧基末端激酶结合...     

药品生产洁净室空气洁净度的比较和浅析

本文对中国GMP、美国FDA、日本制药工业协会GMP、欧盟(EU)GMP的空气洁净度等级、各等级划分指标进行了比较和浅析。     

补肾益髓法治疗β地中海贫血的平行对照临床研究

目的:研究补肾益髓代表方益髓生血颗粒治疗β地中海贫血的临床效果及安全性。方法:采用随机、单盲和安慰剂平行对照进行60例患者临床观察,疗程3个月,观察治疗前后症状、血红蛋白、红细胞、胎儿血红蛋白、网织红细胞水平变化和肝、脾B超。结果:治疗组患者自疗程第1个月起至第3个月结束,各项血液学参数(血红蛋白、红细胞、胎儿血红蛋白、网织红细胞)均有提高,与治疗前相比,差异有统计学意义(P<0.01);肝脾肿大缓解(P<0.05);中医临床症状改善及动态观察与血液参数提高一致(P<0.01);未见副作用。安慰剂组患者各项血液指标及中医证候治疗前后无明显改善,肝脾肿大未见缓解(P>0.05)。结论:益髓生血颗粒治疗β地中海贫血疗效显著,未见毒副作用。     

益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF—β／smad信号通路及结缔组织生长因子的影响

目的：观察益气活血方对肾间质纤维化大鼠肾脏TGF-β／smad信号通路及结缔组织生长因子（connectivetissue growthfactor,CTGF）的影响。方法：健康雄性Wistar大鼠30只诱导建立单侧输尿管梗阻（unilateralureteralobstruction,UUO）致肾小管间质纤维化模型,模型成功后随机分为模型组,益气活血方大、中、小剂量组和西药组,另取健康雄性Wistar大鼠6只设为假手术组。3周后处死大鼠,称取体质量;取血清检测肌酐（creatinine,Cr）、尿素氮（bloodureanitrogen,BUN）水平;取肾脏组织采用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应法和免疫印迹法检测各组转化生长因子G（transforminggrowthfactor—B,TGF-β）、smad2、smad7、CTGFmRNA和蛋白表达水平;苏木精一伊红染色和Masson染色检测各组肾间质纤维化指数。结果：模型组大鼠血清Cr和BUN值较假手术组偏高;与模型组比较,大剂量益气活血方可以降低Cr和BUN值,但差异无统计学意义。苏木精-伊红染色和Masson染色显示模型组肾小管上皮细胞萎缩,大部分肾小管管腔扩张,间质纤维组织增生,大量炎性细胞浸润,肾小球数目明显减少,胶原成分显著增加。益气活血方大剂量组、中剂量组和西药福辛普利钠组大鼠肾间质炎性细胞浸润、纤维组织增生、肾小管扩张情况较模型组明显减轻,胶原成分明显减少。与假手术组比较,模型组大鼠肾脏组织中TGF—D、smad2和CTGFmRNA以及蛋白表达水平明显升高（P〈0．05）,smad7的表达水平则明显降低（P〈0．05）。与模型组比较,益气活血方大剂量组和中剂量组大鼠TGF-β、smad2、CTGFmRNA和蛋白表达明显下降（P〈0．01,P〈0．05）,smad7表达明显升高（P〈0．01,P＜0．05）。结论：UUO大鼠肾组织中CTGFmRNA的表达可能通过TGF-β／smad信号通道进行调节;益气活血方可以通过下调TGF—β、smad2和上调smad7的表达来抑制CTGF表达,进而遏制肾纤维化的进展。     

本刊声明

我们在工作中发现长春西丁（商品名：润坦，由郑州羚锐制药有限公司生产）与地塞米松（由泗水希尔康制药有限公司生产）之间存在配伍禁忌，现报道如下。1病例介绍患者，女，43岁，主诉左眼视力下降1个月，加重2d，诊断为视神经网膜炎。于2006年9月2日入院．在执行医嘱过程中发现当静脉滴注5％葡萄糖注射液250ml加长春西丁30mg的溶液后，     

冠状动脉粥样硬化性心脏病肾虚血瘀证理论源流及临床应用

冠状动脉粥样硬化性心脏病（CHD）是心血管疾病死亡的首要原因,是我国乃至全球亟待解决的重大公共卫生问题。目前的医学研究发现,CHD与慢性肾脏疾病相关,慢性肾脏疾病的许多常见指标是CHD发生发展的独立危险因素,控制肾脏疾病的进展或成为防治CHD的新思路。中西医结合防治CHD具有确切疗效。中医认为心肾生理相关、病理相通,随着社会生活方式的改变,CHD的中医证候不仅呈现出血瘀证,“肾虚血瘀”证的组合形式逐渐增多,成为CHD形成过程中的重要证候组合。本研究旨在梳理和探讨CHD肾虚血瘀证的理论源流与临床应用,以期为提高CHD的中医药防治水平提供理论依据。     

局部晚期食管鳞癌新辅助放疗剂量与病理完全缓解关系分析

目的 探讨接受新辅助放化疗的局部晚期食管鳞癌患者新辅助放疗剂量与病理完全缓解(pCR)的关系。方法 收集2017-2019年间在四川大学华西医院肿瘤中心经病理确诊为食管鳞癌并接受新辅助放化疗和手术的 116例局部晚期患者临床资料。116例患者中 40~45Gy组 80例,≥45Gy组 36例,分析两组术后pCR率。结果 全组患者的pCR率为38.8%(45/116),40~45Gy组与≥45Gy组的pCR率分别为44%(35/80)和28%(10/36)(P=0.105)。结论 术前新辅助采用较高的放疗剂量不增加局部晚期食管鳞癌的pCR率,有必要进行前瞻性的临床研究确定合适的新辅助放疗剂量。