发展中国家（地区）青少年人群性与生殖健康问题及成因分析

发展中国家（地区）青少年的性与生殖健康面临着诸多挑战。青少年自身因素、经济发展与教育因素、文化背景以及医疗保健服务状况等,是造成青少年性与生殖健康问题的主因。着力于消除贫困、改善卫生服务、加强学校与社区干预,并促进青少年与家长和教师间的衮流,将有助于性与生殖健康问题的解决。     

氧化应激诱导自噬对骨髓间充质干细胞增殖与凋亡的影响

 目的: 观察氧化应激是否可诱导骨髓间充质干细胞(MSCs)自噬,探索在氧化应激微环境中自噬对MSCs增殖和凋亡的影响及可能机制,以期提高移植MSCs治疗糖尿病勃起功能障碍(DMED)的效果。方法: 以过氧化氢(H₂O₂)模拟氧化应激微环境。台盼兰染色细胞计数法及MTT分析检测不同浓度(0 、50、100、200、400 μmol/L)H₂O₂对MSCs增殖的影响。联合MTT、流式细胞术、Western blot及透射电镜等方法研究H₂O₂对MSCs凋亡及自噬的影响。结果: H₂O₂呈浓度依耐性抑制MSCs增殖,IC₅₀=(384.5751±16.8895)μmol/L;Western blot分析及透射电镜提示H₂O₂在诱导MSCs凋亡的同时,诱导MSCs产生自噬;MTT分析及流式细胞术提示H₂O₂组细胞增殖受抑、凋亡率上升,阻断自噬后细胞增殖进一步减弱,凋亡率进一步上升;Western blot结果提示H₂O₂诱导cleaved caspase-3增多及多聚ADP-核糖聚合酶1(PARP1)裂解增强;阻断凋亡后,cleaved caspase-3降低及PARP1裂解减弱;阻断自噬后,cleaved caspase-3进一步增多及PARP1裂解进一步增强。结论: 氧化应激对MSCs存活具有双重作用,在诱导MSCs凋亡的同时还诱导保护性自噬,阻断MSCs自噬可以增加MSCs的凋亡,因此进一步增强细胞保护性自噬将有望提高移植MSCs在糖尿病高氧化应激微环境中的存活率,从而改善移植MSCs对糖尿病勃起功能障碍的疗效。     

PI3K/Akt通路介导TRPV1抑制离体小鼠心脏缺血再灌注后的细胞凋亡

目的研究瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)对离体小鼠心脏缺血/再灌注(I/R)后心肌细胞凋亡的影响及与PI3K/Akt通路的关系。方法 TRPV1基因敲除(TRPV1~(-/-))和野生型(WT)小鼠各54只,均各随机分为假手术组(sham)、缺血再灌注组(I/R)和LY294002处理组(LY)。建立Langendorff离体心脏灌注模型,检测心功能;灌注结束后,TTC染色法检测心肌梗死面积;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Western blot检测Bcl-2、Bax、Akt和p-Akt的蛋白表达水平。结果 I/R后,TRPV1~(-/-)小鼠较WT小鼠的LVDP明显降低(P0.001),LVEDP明显升高(P0.001),同时心肌梗死面积和心肌凋亡细胞明显增加(P0.01),Bcl-2/Bax和p-Akt表达水平下降(P0.001)。LY294002阻断PI3K后,与相应的I/R组相比,WT小鼠心肌梗死面积明显扩大(P0.001),心肌凋亡细胞明显增加(P0.01),Bcl-2/Bax和p-Akt蛋白表达水平降低(P0.001)。结论 TRPV1可能通过PI3K/Akt通路抑制离体小鼠心脏缺血/再灌注所致的心肌细胞凋亡。     

茶多酚联合表柔比星对人膀胱癌T24细胞增殖和凋亡的影响及机制

目的：研究茶多酚（polyphenols,TP）对表柔比星（epirubicin,EPI）诱导人膀胱癌T24细胞增殖及凋亡的影响,探讨两者联合对T24细胞生长影响的机制。方法：不同浓度TP和EPI作用膀胱癌T24细胞24 h,MTT试验选择药物作用浓度TP（88.8 μmol/L）和EPI（4.6 μmol/L）。试验分空白对照组、TP组（88.8 μmol/L）、EPI组（4.6 μmol/L）、联合组（TP 88.8 μmol/L +EPI 4.6 μmol/L）共4组,处理T24细胞24 h后,Annexin V-PI双流式细胞术检测各组细胞凋亡率;处理T24细胞8 h后,透射电镜观察各组细胞内自噬体的变化;处理稳定表达GFP-LC3的T24细胞8 h后,荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白LC3荧光斑的形成与变化;处理T24细胞不同时间,Western blot技术检测自噬标志蛋白LC3-Ⅱ（8 h）、底物蛋白P62（8 h）、凋亡相关蛋白CASP3、 PARP（16 h）表达变化。结果：TP（88.8 μmol/L）联合EPI（4.6 μmol/L）处理组较单药组引起的细胞增殖抑制率（F=730.411,P=0.000）和细胞凋亡率（F=161.945,P=0.000）明显提高。EPI（4.6 μmol/L）单药处理T24细胞后引起明显自噬,透射电镜下细胞质内自噬体双层膜结构形成;荧光显微镜下胞质内有明显点状荧光斑聚集形成,且含荧光斑的细胞数量也明显增加,差异有统计学意义（F=41.944,P=0.000）;Western blot结果显示EPI组自噬相关蛋白LC3-Ⅱ的表达增多,P62表达降低。联合TP作用后自噬明显减弱,自噬相关蛋白表达降低,而凋亡相关蛋白活性显著增高。结论：TP可以增强EPI对膀胱癌T24细胞的致凋亡敏感性,其机制与TP抑制EPI化疗过程中诱导的保护性自噬有关。