“补肾育精丸”治疗男性不育症

不孕症的治疗历来属于妇产科的范畴。社会、家庭亦多把不孕责任归咎于女方,其实这是不科学的。据有关资料统计,不孕夫妇中,因男方原因所致者占30％—40％左右,因此必须重视不孕症男方因素的探讨。分析精液是鉴定男子生育能力的重要方法。观察82例,均排除人为所造成的精液异常因素。精液是由精浆、精子及其它细胞所组成。正常的精液是灰白或乳白色、不透明的液体。射精量平均每次2—6毫升,排出体外30分钟左右自行液化,变为稀薄液体。存显微镜下镜检,每毫升精子密度含精子0.6     

MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响

[目的]探讨MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响。[方法]设计合成两种针对MDR1 mRNA的siRNA双链分子（#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA）,并转染入COLO 320DM和HT-29结肠癌细胞,观察其对结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp表达的影响。并分别与5-FU、阿霉素和长春新碱等抗肿瘤药联用,观察结肠癌细胞活力的变化。用阿霉素处理后,观察转染MDR1 siRNA结肠癌细胞的细胞内阿霉素累积浓度的变化。RT-PCR检测细胞MDR1 mRNA的表达,免疫印迹法检测细胞P-gp的表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞内阿霉素累积浓度。[结果]#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA均可抑制COLO 320DM结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达,其最低有效浓度分别为5nmol/L和25nmol/L。同时MDR1 mRNA和P-gp表达的抑制伴随着抗肿瘤药（5-FU、阿霉素和长春新碱）对COLO 320DM结肠癌细胞毒性的增强和细胞内阿霉素累积浓度的增加。而在对照HT-29结肠癌细胞却观察不到此效应。[结论]MDR1 siRNAs能特异逆转结肠癌细胞的多药耐药性,为MDR1/P-gp依赖的多药耐药性结肠癌的治疗提供了一条新的途径。     

MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响

 [目的]探讨MDR1 siRNA对结肠癌细胞多药耐药性的影响。[方法]设计合成两种针对MDR1 mRNA的siRNA双链分子（#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA）,并转染入COLO 320DM和HT-29结肠癌细胞,观察其对结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp表达的影响。并分别与5-FU、阿霉素和长春新碱等抗肿瘤药联用,观察结肠癌细胞活力的变化。用阿霉素处理后,观察转染MDR1 siRNA结肠癌细胞的细胞内阿霉素累积浓度的变化。RT-PCR检测细胞MDR1 mRNA的表达,免疫印迹法检测细胞P-gp的表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞内阿霉素累积浓度。[结果]#4123 MDR1 siRNA和#4029 MDR1 siRNA均可抑制COLO 320DM结肠癌细胞MDR1 mRNA和P-gp的表达,其最低有效浓度分别为5nmol/L和25nmol/L。同时MDR1 mRNA和P-gp表达的抑制伴随着抗肿瘤药（5-FU、阿霉素和长春新碱）对COLO 320DM结肠癌细胞毒性的增强和细胞内阿霉素累积浓度的增加。而在对照HT-29结肠癌细胞却观察不到此效应。[结论]MDR1 siRNAs能特异逆转结肠癌细胞的多药耐药性,为MDR1/P-gp依赖的多药耐药性结肠癌的治疗提供了一条新的途径。     

靶向MDR1基因的RNAi稳定逆转结肠癌细胞的多药耐药性

目的： 探讨靶向多药耐药蛋白-1 (MDR1)基因的RNA干扰（RNAi）对结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性的稳定逆转作用。方法：分别构建含编码#4029 MDR1 siRNA和#4123 MDR1 siRNA的质粒载体,并转染COLO 320DM结肠癌多药耐药细胞,采用G418筛选克隆细胞,经实时定量RT-PCR及Western blotting鉴定阳性克隆细胞。MTT法检测细胞活力并计算各抗肿瘤药的IC50。流式细胞术检测细胞周期并计算PI/AI值。流式细胞仪测定细胞内adriamycin药物累积浓度。结果：阳性克隆细胞（clone #4029和clone #4123）的MDR1 mRNA和P-gp的表达均被抑制。COLO 320DM结肠癌亲本细胞adriamycin及vincristine的IC50分别为9.616 μmol/L和0.358 μmol/L,而clone #4029的IC50分别降至1.094 μmol/L和0.023 μmol/L（P<0.01）,clone #4123的IC50分别降至0.780 μmol/L和0.035 μmol/L（P<0.01）。COLO 320DM结肠癌亲本细胞用adriamycin及vincristine处理后其PI/AI值分别为5.68及9.59,而clone #4029的PI/AI值分别降至2.74及3.59（P<0.01）,clone #4123的PI/AI值分别降至2.75及3.24（P<0.01）。COLO 320DM结肠癌亲本细胞用10 μmol/L adriamycin处理后细胞内adriamycin累积浓度为27.92,而clone #4029及clone #4123细胞内adriamycin累积浓度分别增加至187.24和215.57（P<0.01）。结论：稳定转染含编码MDR1 siRNA的质粒载体能稳定逆转结肠癌细胞MDR1/P-gp依赖的多药耐药性。     

SLP-2基因对食管鳞癌细胞系的影响

目的验证SLP-2在食管鳞癌中高表达的cDNA微阵列结果，构建SLP-2真核表达载体，探讨SLP-2与食管鳞癌发生、发展的关系。方法利用PCR从正常食管上皮cDNA中扩增SLP-2开放阅读框，构建SLP-2／pcDNA3．1／myc—His(-)真核表达质粒。然后将重组子导入食管鳞癌细胞系KYSFA-50和TE12中。半定量RT—PCR鉴定转染细胞，获得阳性细胞克隆。并采用MTT比色法、平板克隆形成实验、流式细胞术分析SLP-2对食管鳞癌细胞的影响。结果SLP-2在食管鳞癌中高表达。SLP-2基因反义转染抑制SLP-2表达时，可抑制细胞生长和增殖，并导致S期阻滞。说明SLP-2表达上调参与细胞生长和增殖。结论食管鳞癌中SLP-2表达上调促进细胞过度生长和增殖，提示SLP-2表达上调参与食管鳞癌恶性的产生。