刺五加苷B对疲劳小鼠学习记忆能力的改善作用及其激活Keap1/Nrf2/ARE信号通路的机制

目的：探讨刺五加苷B（ELB）对疲劳小鼠学习记忆能力的影响,阐明其可能的作用机制。方法：60只ICR小鼠随机分为对照组（灌胃给予蒸馏水,静坐实验）、模型组（灌胃给予蒸馏水,游泳实验）、ELB（C）组（灌胃给予80 mg·kg^-1 ELB,静坐实验）及ELB（M）组（灌胃给予80 mg·kg^-1 ELB,游泳实验）,每组15只。持续给药4周后采用转棒实验观察小鼠的抗疲劳能力,采用Morris水迷宫实验和避暗实验检测疲劳小鼠的学习记忆能力,采用比色法检测小鼠血清中乳酸（LD）水平,微量酶标法检测小鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）活性,脲酶法检测小鼠血清中尿素氮（BUN）水平,羟胺法检测小鼠脑组织中超氧化物歧化酶（SOD）活性,硫代巴比妥酸法（TBA）检测小鼠脑组织中丙二醛（MDA）水平,酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测小鼠脑组织中活性氧簇（ROS）、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）、γ氨基丁酸（GABA）和谷氨酸（GLU）水平,分光光度法检测小鼠脑组织中三磷酸腺苷酶（ATPase,包括Na⁺K⁺-ATPase、Mg²⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase和Ca²⁺Mg²⁺-ATPase）活性,Western blotting法检测小鼠脑组织中Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1（Keap1）、核因子E2相关因子2（Nrf2）和血红素加氧酶1（HO-1）蛋白表达水平,HE染色法观察小鼠脑组织海马区神经元结构。结果：与对照组比较,模型组小鼠转棒时间明显缩短（P<0.05）,水迷宫潜伏期明显延长（P<0.05）,避暗潜伏期缩短（P<0.05）,错误次数增加（P<0.05）,血清中LDH活性和LD、BUN水平升高（P<0.05）,脑组织中eNOS水平和SOD、Na⁺K⁺-ATPase、Mg²⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase、Ca²⁺Mg²⁺-ATPase活性及GLU/GABA比值降低（P<0.05）,MDA和ROS水平升高（P<0.05）,脑组织中Keap1蛋白表达水平升高（P<0.05）,Nrf2和HO-1蛋白表达水平降低（P<0.05）;ELB（C）组小鼠转棒时间延长（P<0.05）,但其余各检测指标差异均无统计学意义（P>0.05）。与模型组比较,ELB（M）组小鼠转棒时间延长（P<0.05）,水迷宫潜伏期缩短（P<0.05）,避暗潜伏期延长（P<0.05）,错误次数减少（P<0.05）,血清中LDH活性和LD、BUN水平降低（P<0.05）,脑组织中eNOS水平和SOD、Na⁺K⁺-ATPase、Mg²⁺-ATPase、Ca²⁺-ATPase、Ca²⁺Mg²⁺-ATPase活性及GLU/GABA比值升高（P<0.05）,MDA和ROS水平降低（P<0.05）,脑组织中Keap1蛋白表达水平降低（P<0.05）,Nrf2和HO-1蛋白表达水平升高（P<0.05）。与对照组比较,模型组小鼠海马区神经元排列松散,层次不清,部分海马区神经元形态有明显的病理学改变;与模型组比较,ELB（C）和ELB（M）组小鼠脑组织海马区结构层次清晰,神经元增多,排列较为紧密有序,海马区神经元形态和体积趋于正常。结论：ELB能够改善疲劳小鼠的学习记忆能力,其机制可能与调节Keap1/Nrf2/ARE信号通路的相关因子表达有关。