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分泌抗人C_(1q)单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立 总被引:2,自引:1,他引:2
以人C_(19)免疫的BALB/c小鼠脾细胞与Sp2/0骨髓瘤细胞融合,用固相C_(19)-ELISA筛选和有限稀释法克隆化以后,获得三株(A_4、B_6及D_5)分泌抗人C_(19)单克隆抗体的杂交瘤细胞系。培养上清和小鼠腹水的特异性抗体效价分别为10~(-3)、10~(-5)及10~(-7)。单克隆抗体与人IgG无交叉反应,与灭活C_(19)呈阴性反应,经人C_(19)吸收后,OD值明显下降,能阻断补体经典途径的活化,从而抑制溶血活性。根据上述结果表明,三株细胞所分泌的单克隆抗体是针对人C_(19)特异性的。经鉴定单克隆抗体A_4属小鼠IgG_(2b)、B_6及D_5属IgG_1亚类。杂交瘤细胞系核型分析表明,染色体数为87~91条。 三株杂交瘤细胞系贮存液氦6个月,体外培养传20代,仍保存分泌特异性单克隆抗体的能力。 相似文献
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本文报道了按Yonemasu及Stroud二氏略加改进的从人血清中分离C_(1q)的方法。该制剂通过双向扩散、免疫电泳及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳等免疫化学分析和红细胞凝集试验、~(125)Ⅰ-结合试验等生物学活性鉴定,其活性及纯度均较满意,产量达血清中C_(1q)量的15—25%。 相似文献
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本文报导了一种以抗人Clq单克隆抗体亲和层析柱分离人血清中Clq的方法。该法简便快速,可于24—48小时内完成。Clq产量约为10mg/100ml血清。该制剂经双向扩散及免疫电泳试验,未发现免疫球蛋白污染;SDS-PAGE分析发现典型的Clq亚单位结构;经红细胞凝集和胶乳凝集试验测定,其生物学活性比较好。抗人Clq单克隆抗体Sepharose 4B柱反复使用10余次,4℃冰箱保存将近一年仍保持活性。 相似文献
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This paper is to report a procedure for the isolation of Clq in humanserum with anti-human C1q McAb affinity column chromatography.Thisprocedure is simple and rapid,Which can be performed within 24 to 48 hours.The yield of Clq can reach 7-10 mg per 100 ml serum.The preparation isimmunoglobulin free as proved by double diffusion and immunoelectrophoresisassay and exhibits typical C1q subunit structure on SDS-PAGE.After biologicalactivity evaluation with red blood cell agglutination and latex agglutinationassay,this C1q preparation was found to be satisfactory in its activity.The anti-human C1q McAb sepharose 4B column can be used repeatedly.Itcan be stored in 4℃ for approximately a year without losing any of its absorptionactivity. 相似文献
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医院感染致眼球摘除案例分析 总被引:2,自引:0,他引:2
医院感染致眼球摘除案例分析河北医学院附属第三医院冯庆和靳占兵郭建坤(石家庄050051)本文报道的是1例左眼老年性白内障患者,于手术后发生铜绿假单胞菌(PA)严重医院感染致左眼球摘除的案例。报告如下。1临床病例1.1病例患者女,63岁,1994年5月... 相似文献
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以牛血清白蛋白(BSA)为抗原,大剂量(250毫克/公斤体重)一次注入家兔耳静脉内,造成动物“一过性”血清病。隔日采集静脉血,分离血清于-40℃冻存,在统一条件下用聚乙二醇沉淀-补体消耗试验检测家兔循环免疫复合物(CIC)的动态,并用CH_(50)试验平行测定血清中总补体量。实验结果表明:家兔于注射BSA抗原后第6天开始检出CIC,第10天达最高峰,第12天下降;血清中补体含量与此相反,第6天开始下降,第10天下降到最低水平,第12天后又逐渐回升。本法检测家兔急性实验性血清病CIC较为适用。 相似文献
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为检测抗人C1q单克隆抗体,我们建立了固相C1q-ELISA。经取代试验、阻断试验及交叉试验证明本法具有特异性;同时用C1q-ELISA及双向免疫扩散试验检测15份鼠抗人C1q血清抗体滴度,表明C1q-ELISA法较双向免疫扩散法高20156倍,用6份血清试验批内及批间的变异系数范围,分别为1.8~6.5%及6.2~16.5%,说明有较好的重现性。因而,本法适用于杂交瘤细胞上清中抗人C1q单克隆抗体的检测。 相似文献
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以实验性急性血清病家兔为实验模型。10只实验组动物于接种BSA抗原后5天,以300伦~(60)Co全身照射;10只对照组动物,不做照射处理。两组动物均于接种抗原前及接种后2、4、6、8、10、12、14、16天分别采血,分离血清后以PEG沉淀-补体消耗试验测定循环免疫复合物。检测结果证明照射组与对照组动物循环免疫复合物的动态基本一致,充分说明于抗原注射后5天进行γ射线照射,虽然动物已造成急性放射病亦不影响体内形成免疫复合物。 相似文献