加减地黄饮子提取工艺的研究

目的:优选加减地黄饮子的最佳提取工艺.方法:以浸膏得率和毛蕊花糖苷及石斛总碱的含量为指标,采用正交试验对水提和醇提过程中的溶剂用量、提取时间、提取次数等因素进行优选研究,同时采用水蒸气蒸馏法提取挥发油,根据收油率考查加水量和提取时间.结果:本方最佳提取工艺为肉苁蓉、麦门冬、人参、远志、五味子、山茱萸等用8倍量70%的乙醇回流提取3次,每次2h:生姜、薄荷、石菖蒲加10倍量水6h提取挥发油:方中熟地黄、茯苓、巴戟天、石斛、大枣与醇提取后的药渣及挥发油提取后药渣一同加16倍的水,回流提取3次,每次1h:血竭等原粉入药.结论:用正交试验方法优选此方的提取工艺是可行的.     

地黄饮子对转tau基因果蝇AD模型PI3K/AKT/dTOR信号通路基因表达的影响

目的观察地黄饮子对转tau基因果蝇AD模型PI3K/AKT/dTOR信号通路基因表达的影响,探讨其防治阿尔茨海默病的药物疗效和作用机制。方法将果蝇分为3组,即空白组、地黄饮子组、模型组。空白组为正常CS果蝇喂普通培养基,地黄饮子组为转tau基因果蝇喂2%浓度地黄饮子培养基,模型组为转tau基因果蝇喂普通培养基,各组均喂养5天。采用果蝇嗅觉记忆测试检测果蝇学习记忆能力,并运用荧光定量PCR法检测地黄饮子对转tau基因果蝇PI3K、AKT、dTOR mRNA表达的影响。结果 1嗅觉记忆测试中,各组进入有纱布障碍的离心管的果蝇数目变化趋势:空白组果蝇数量变化幅度最小,其次是地黄饮子组果蝇,模型组果蝇变化幅度最大。各组进入无纱布障碍的离心管的果蝇数目变化趋势:地黄饮子组果蝇前4 h进入离心管的数量变化速度较慢,4 h后数量变化速度明显高于其他组的果蝇;模型组果蝇进入离心管的数量整个过程比较缓慢,并且低于其他组果蝇;空白组的果蝇开始4 h进入离心管的数量变化较快并高于地黄饮子组果蝇,4 h后数量变化减慢明显并低于地黄饮子组果蝇。2与空白组比较,模型组和地黄饮子组PI3K、AKT、dTOR mRNA表达差异均有统计学意义(P0.05)。地黄饮子组与模型组比较,PI3K、AKT、dTOR mRNA表达增加,差异有统计学意义(P0.05)。结论地黄饮子可以改善转Tau基因果蝇的学习记忆能力,并上调转tau基因果蝇PI3K、AKT、dTOR mRNA的表达。     

洋参御糖丸对实验性糖尿病大鼠心肌SOD活性与MDA含量的影响

目的:观察洋参御糖丸干预糖尿病大鼠心肌损伤的疗效并探讨其作用机制.方法:采用高脂高糖饮食饲养大鼠,并腹腔注射链脲佐茵素(STZ)复制糖尿病模型.用洋参御糖丸治疗,以二甲双胍、糖尿乐作为阳性对照药,以比色法检测模型大鼠心肌组织丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性.结果:洋参御糖丸能显著提高心肌组织SOD活性,降低MDA含量.结论:洋参御糖丸能有效降低糖尿病大鼠心肌组织的氧化应激水平,提高糖尿病大鼠心肌的抗氧化能力.     

正交实验法优选洋参御糖丸最佳水提工艺研究

采用正交试验法对洋参御糖丸的水提工艺进行筛选研究,以芍药中芍药苷的提取率作为考查指标,采用高效液相色谱法测定含量,最佳工艺为A3B1C3,所得提取液中芍药苷含量最高。     

健脾补肾益气养阴法对Ⅱ型糖尿病大鼠肾脏CTGFmRNA、TGF-β1mRNA表达的影响

目的:观察健脾补肾、益气养阴法对糖尿病肾病大鼠肾脏基因表达的影响.方法:选用Wistar大鼠,通过高脂高糖饮食加腹腔小剂量注射链脲佐菌素复制糖尿病肾损伤大鼠模型,采用逆转录聚合酶链反应检测肾内TGFβ1 mRNA、CTGF mRNA表达情况.结果:健脾补肾、益气养阴法能下调TGFβ1 mRNA、CTGF mRNA的表达...     

补肾健脾益气养阴法对糖尿病大鼠细胞免疫影响的研究

目的：观察补肾健脾益气养阴法对糖尿病（DM）大鼠IL-6、IL-2以及胸腺指数等免疫指标的影响。方法：应用链脲佐菌素腹腔注射造模的糖尿病大鼠模型,观察补肾健脾益气养阴法对STZ-DM大鼠胸腺指数、IL-6、IL-2的影响。结果：补肾健脾益气养阴法能使STZ-DM大鼠胸腺指数升高、IL-6水平升高、IL-2水平降低,并且疗效与中西药对照组相当。结论：健脾补肾益气养阴法对糖尿病模型大鼠细胞免疫系统具有一定程度的调节作用。     

远志皂苷防治阿尔茨海默病作用机理研究进展

远志具有良好的益智作用,广泛应用于阿尔茨海默病的防治中,远志主要成分远志皂苷目前广泛应用于远志益智机理的研究中,并取得预期的研究成果。远志皂苷对AD患者的神经保护作用,体现在减轻β淀粉样蛋白的毒性、调控异常tau蛋白和胆碱能及免疫系统、抗氧化、抑制细胞凋亡及促进神经元存活及再生。     

含地黄饮子脑脊液对PC-12细胞氧化应激的影响

目的 通过建立Aβ损伤的PC12细胞模型,分析含地黄饮子脑脊液对PC-12细胞氧化应激的影响.方法 将PC12细胞离体培养,待细胞进入对数生长期后吸弃培养液,分别加入空白培养液10％、正常脑脊液10％、含安理申脑脊液10％、含地黄饮子脑脊液5％、含地黄饮子脑脊液10％、含地黄饮子脑脊液20％,并加培养液补至等量,即成为:空白组、模型组、安理申组、地黄饮子低剂量组、地黄饮子中剂量组、地黄饮子高剂量组,37℃孵育2h.除空白组外各组均加入4μl经老化处理终浓度为10μ mol/L的Aβ25-35,建立AD细胞模型,空白组则加入4μl空白培养液,继续37℃孵育24h.然后收集培养液,离心细胞.检测各组PC12细胞培养液中MDA、SOD、CAT、GSH-Px的含量.结果 地黄饮子能降低Aβ25-35损伤PC-12细胞培养液中的MDA含量,提高PC-12细胞培养液中SOD的活性、提高CAT、GSH-Px的含量即抗氧化酶活性,提高自由基清除能力,减少自由基对PC-12细胞的损伤.结论 含地黄饮子脑脊液可能通过改善Aβ25-35损伤的PC-12细胞状态,减轻脂质过氧化反应,提高降低的抗氧化酶活性,清除自由基,从而起到保护细胞的作用.     

地黄饮子对阿尔茨海默病模型鼠脑神经元细胞凋亡及超微结构的影响

目的:探讨地黄饮子对阿尔茨海默病动物模型凋亡基因及超微结构的影响。方法:实验于2003-08/2004-08在黑龙江中医药大学基础理论实验室完成。选择120只Wistar大鼠,随机分成6组:假损伤组,模型组,抗脑衰对照组,石杉碱甲对照组,地黄饮子5.4g/(kg·d)和地黄饮子2.7g/(kg·d)组,每组20只。模型组以D-半乳糖腹腔注射合并淀粉样β蛋白注射海马制备阿尔茨海默病动物模型,假损伤组腹腔注射生理盐水,其余各组分别在造模的同时,地黄饮子治疗组分别给予地黄饮子灌胃[相当含生药5.4g/(kg·d)和2.7g/(kg·d)],抗脑衰对照组、石杉碱甲对照组分别给予抗脑衰胶囊、石杉碱甲溶液灌胃[含生药分别为2.403g/(kg·d),0.018mg/(kg·d)],1次/d,共5周。运用反转录-聚合酶链反应测定各组海马凋亡基因的表达,及采用透射电镜观察各组海马神经元超微结构的变化。结果:120只动物中,因造模死亡共20只,模型组5只、石杉碱甲对照组6只,抗脑衰对照组3只,地黄饮子5.4g/(kg·d)组3只,地黄饮子2.7g/(kg·d)组3只,进入结果分析100只。①大鼠海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3、核转录因子κB、hsp70基因mRNA的表达:反转录-聚合酶链反应结果示,淀粉样β蛋白可诱发大鼠海马半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3mRNA表达增加,与模型组比较,抗脑衰对照组,石杉碱甲对照组,地黄饮子5.4g/(kg·d),2.7g/(kg·d)组均可不同程度降低大鼠海马区域的表达(P<0.05)。地黄饮子5.4g/(kg·d)组下调幅度最大。与假损伤组比较,模型组鼠脑海马核转录因子κBmRNA、hsp70mRNA水平显著降低;与模型组比较,抗脑衰对照组,石杉碱甲对照组,地黄饮子5.4g/(kg·d),2.7g/(kg·d)组均有明显的上调作用(P<0.05)。地黄饮子5.4g/(kg·d)组对hsp70mRNA水平的上调作用优于抗脑衰对照组,石杉碱甲对照组。hsp70mRNA电泳强度比较显示:假损伤组>地黄饮子5.4g/(kg·d)组>地黄饮子2.7g/(kg·d)组>抗脑衰对照组>石杉碱甲对照组>模型组。②海马神经元超微结构的观察:模型组海马神经元显现凋亡早期的形态特点,各治疗组和对照组对凋亡皆有抑制作用。结论:地黄饮子对痴呆鼠海马神经元细胞凋亡有抑制作用,且呈剂量依赖性,其作用机制可能与地黄饮子上调核转录因子κB、hsp70的表达,抑制线粒体释放细胞色素C,控制半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3的激活有关。