小鼠骨髓间充质干细胞分离培养新方法

本研究旨在建立一种方便、快捷、有效体外分离培养小鼠骨髓间充质干细胞（mesenchymalstemcells,MSC）的方法。在无菌条件下取小鼠股骨、胫骨,分别用全骨髓贴壁法、骨片消化法、骨髓加骨片法分离小鼠MSC,比较Msc集落出现时间、大小及数量;应用流式细胞术检测细胞免疫表型,并进行MSC成骨、成脂分化鉴定。结果表明,骨髓加骨片法出现的集落时间最早,集落数量最多,第4天集落数为20±4个;骨片消化法为11．5±2．5个;全骨髓贴壁法最少,为9．5±1．5个;到第3代时,骨髓加骨片法获得细胞数量最多,是全骨髓贴壁法和骨片消化法的2倍;流式细胞术检测结果显示,获得的细胞高表达干细胞标志之一Sca-1,高表达CDdd、CD29,不表达白细胞表面抗原CIM5和内皮细胞标志CD31等;所分离的MSC在成骨诱导体系和成脂诱导体系中能分别向成骨细胞和脂肪细胞分化,具有典型的MSC特性。结论：骨髓加骨片法是一种方便、快捷、有效的小鼠骨髓MSC分离方法。     

细胞因子Irisin缓解高糖诱导骨髓间充质干细胞凋亡的机制研究

背景 高糖可诱导骨髓间充质干细胞(bone-marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)凋亡,而细胞因子Irisin对糖毒性所致的细胞损伤具有保护作用.目的 探讨细胞因子Irisin对高糖环境中BMSCs凋亡的影响及其作用机制.方法 复苏BMSCs并将其分为对照组(Vehicle)、高糖诱导组(high glucose,HG)、Irisin干预组(HG+irisin;Irisin)和抑制剂组(HG+irisin+compound C,CC).各组细胞培养3 d后,流式细胞术检测细胞凋亡率.Western blotting检测凋亡相关蛋白Bcl-2/Bax比值和磷酸化AMP依赖的蛋白激酶(phosphorylated AMP-activated protein kinase,p-AMPK)、AMPK的表达水平.结果 与Vehicle组相比,HG组BMSCs细胞凋亡率显著升高(P<0.05);Irisin可降低高糖诱导的BMSCs细胞凋亡(P<0.05),提高Bcl-2/Bax的蛋白表达比(P<0.05),同时激活AMPK.当特异性地抑制AMPK后,Irisin缓解高糖诱导BM-SCs凋亡的作用明显减弱.结论 Irisin可通过激活AMPK缓解高糖诱导的BMSCs凋亡.     

大麻二酚对高糖诱导小鼠肾脏足细胞系MPC5细胞凋亡的保护作用

目的 探讨大麻二酚(cannabidiol,CBD)对高糖环境中小鼠足细胞系MPC5细胞凋亡的影响.方法 将MPC5细胞分为对照组(Vehicle)、高糖组(high glucose,HG)和CBD组.CCK-8试剂盒检测MPC5细胞的增殖活性,流式细胞术检测MPC5细胞的凋亡率,Western blot检测裂孔膜蛋白...     

对分课堂在口腔颌面肿瘤学住院医师规培教学中的应用

目的:探讨对分课堂在口腔颌面肿瘤学住院医师规范化培训中的应用效果.方法:选取参加2017与2018年在空军军医大学第三附属医院口腔颌面外科规范化培训的住院医师(以下简称规培医师)各20名为研究对象,分为试验组20名(2018年)和对照组20名(2017年).回顾性对比分析两组教学效果.结果:试验组规培医师口腔颌面肿瘤学...     

大麻二酚缓解高脂饮食老龄小鼠肝脏脂肪变性的实验研究

目的 探究大麻二酚(cannabidiol, CBD)对高脂饮食老龄小鼠肝脏脂肪变性的保护作用及其信号机制。方法 30只老龄雄性C57BL/6J小鼠随机分为三组：正常饮食组(NC组;基础饲料)、高脂饮食组(HFD组;高脂饲料)和CBD治疗组(CBD组;高脂饲料加大麻二酚治疗)。12周后,测定各组小鼠血清葡萄糖、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)、胰岛素、游离脂肪酸(FFA)。葡萄糖耐量实验(IPGTT)和胰岛素耐量实验(ITT)检测小鼠糖处理能力。油红O染色检测小鼠肝脏的脂质沉积情况。qRT-PCR检测脂代谢相关基因的mRNA表达,Western blot检测腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)蛋白水平。结果 与NC组比较,HFD组小鼠的血糖、TG、TC、FFA、ALT及AST均显著升高,肝脏脂质沉积增加(P<0.05)。CBD组的上述糖脂代谢相关指标明显降低(P<0.05),小鼠对葡萄糖的处理能力提高,肝脏脂质沉积减轻,脂代谢相关基因的mRNA表达水平降低(P<0.05)。CBD显著增加磷酸化A...     

生长分化因子11对高糖环境中人甲状腺乳头状癌K1细胞凋亡的影响

 目的 探讨生长分化因子11(growth differentiation factor 11,GDF1)对高糖环境中人甲状腺乳头状癌K1细胞凋亡的影响。方法 将人甲状腺乳头状癌K1细胞分为3组:对照组(Vehicle)、高糖组(HG)和GDF11组(HG+GDF11;GDF11)。各组细胞培养3 d后,流式细胞术检测细胞凋亡率,western blot检测凋亡相关蛋白Bax与Bcl-2的蛋白水平,实时荧光定量逆转录PCR检测核转录因子E2相关因子(nuclear factor erythroid2-related factor 2,Nrf2)的转录表达,活性氧(ROS)试剂盒检测细胞内的ROS水平。结果 与对照组相比,高糖环境中K1细胞的凋亡率降低,Bcl-2/Bax蛋白表达比升高,Nrf2基因表达上调,细胞内ROS水平下降;而GDF11干预显著提高高糖环境中K1细胞的凋亡率,降低Bcl-2/Bax蛋白表达比,下调Nrf2基因转录表达,并提高细胞内的ROS水平。结论 GDF11可能通过提高高糖环境中K1细胞内的氧化应激反应促进细胞凋亡。     

激光快速成形镍铬烤瓷合金离子溶出体外实验研究

目的:研究激光快速成形镍铬烤瓷合金在人工唾液中的离子溶出行为.方法:采用激光快速成形技术制备Ni- Cr烤瓷合金试件10 个,并以同种成分及组成的铸造Ni- Cr烤瓷合金作为对照.每种试件分为2 组,分别浸泡于中性和酸性人工唾液中7 d,测定腐蚀液中试件的金属离子溶出成分、溶出量以及试件表面的理化状态. 结果:①同种方法成形的试件,酸性人工唾液中离子溶出量高于中性人工唾液中离子溶出量;②pH值相同的人工唾液中,激光快速成形Ni- Cr烤瓷合金的离子溶出量低于铸造烤瓷合金离子溶出量;③电镜下,各组激光快速成形Ni- Cr烤瓷合金均未见明显腐蚀迹象. 结论:激光快速成形Ni- Cr烤瓷合金较铸造Ni- Cr烤瓷合金具有更优异的抗腐蚀性能.     

大麻二酚对衰老小鼠骨髓间充质干细胞成骨分化影响的体外细胞实验

背景 衰老状态的骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化能力降低,影响正常骨代谢.细胞自噬在衰老过程及成骨代谢中发挥重要作用,大麻二酚(cannabidiol,CBD)能促进自噬,但CBD能否通过调节自噬进而促进衰老BMSCs成骨分化仍不清楚.目的 探...     

精脒对衰老兔骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及机制研究

背景 研究发现衰老兔骨髓间充质干细胞(bone-marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)的成骨分化能力减弱,而精脒(Spermidine)对衰老相关疾病具有保护作用.目的 探讨精脒对衰老兔骨髓间充质干细胞成骨分化的影响及其作用机制.方法 复苏BMSCs并将其分为3组:对照组(Vehicle,培养基中不加入药物),D-半乳糖诱导衰老组(D-gal,培养基中加入40 g/L D-gal诱导BMSCs衰老),Spermidine干预组(Spermidine,培养基中加入40 g/L D-gal + 3 μmol/L Spermidine处理BMSCs).试剂盒检测细胞内烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD+)与还原型NAD+(NADH)比例,MTT法检测细胞增殖活性.成骨诱导培养后,Western blot检测Sirt1蛋白的表达,qPCR检测成骨相关基因的转录水平.结果 与Vehicle组相比,D-gal组细胞内NAD+/NADH比例降低,BMSCs增殖减弱(P<0.05);Spermidine可提高细胞内NAD+/NADH比例并促进BMSCs增殖(P<0.05).成骨诱导培养后,D-gal抑制Sirt1表达并下调成骨相关基因Runx2、Osx和ALP的转录表达(P<0.05);而Spermidine可上调Runx2、Osx和ALP的转录表达(P<0.05).当采用siRNA抑制Sirt1表达后,Spermidine上调成骨相关基因转录表达的作用明显减弱(P<0.05).结论 Spermidine可通过激活Sirt1促进衰老兔BMSCs成骨分化.     

精脒对老龄小鼠股骨微结构的影响

目的 探讨精脒(Spermidine)对老龄小鼠股骨微结构的影响.方法 选取20只21月龄C57老龄小鼠随机分为对照组(Vehicle,n=10)和实验组(Spermidine,n=10),Spermidine组在饮水中按3 mmol/L的浓度加入Spermidine,干预时间为12周.每周测量各组小鼠的体重;实验结束...